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基于农杆菌介导法将CP4-EPSPS基因转入玉米自交系B73的研究
2023年
【目的】建立玉米遗传转化体系培育抗除草剂玉米材料,解决玉米杂草危害问题。【方法】采用农杆菌介导法在玉米自交系B73幼胚中转入抗除草剂基因(CP4-EPSPS),通过PCR、qRT-PCR鉴定转基因植株;利用ddPCR技术筛选低拷贝转基因植株,并对低拷贝植株进行草铵膦抗性鉴定。【结果】在所获得的181株抗性植株中12株为阳性,转基因植株的外源抗除草剂基因(CP4-EPSPS)在转录水平上均能正常表达;转基因植株中筛选到低拷贝植株5株;抗性鉴定证明转基因植株均具有草铵膦抗性。收获T1代转基因低拷贝植株种子5份。【结论】建立了以B73为受体,基于农杆菌法介导的玉米遗传转化体系。
韩平安常悦唐宽刚李晓东王力伟梁亚晖杨静石海波吴新荣
关键词:玉米农杆菌介导法
外源基因转入白桦实生苗的瞬时表达方法
外源基因转入白桦实生苗的瞬时表达方法,它涉及一种外源基因转入白桦苗的方法。本发明提供了一种外源基因转入白桦实生苗的瞬时表达方法。方法:一、Tween无菌水溶液震荡清洗,然后放入高渗液中浸泡;二、转化培养基中侵染浸泡;三、...
王艳敏杨传平王玉成张春蕊张一鸣王超梁福生
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利用农杆菌介导法将抗草甘膦基因转入玉米自交系H99的研究被引量:4
2020年
【目的】利用转基因手段培育抗除草剂玉米品种以解决草害问题。【方法】采用农杆菌介导法对玉米自交系H99的幼胚进行遗传转化研究,进行单因素试验,分别设置不同胚的大小、农杆菌的菌液浓度和共培养时间处理,比较分析转基因幼胚GUS的瞬时表达率。【结果】幼胚大小1.5~2.0 mm、农杆菌的侵染浓度OD_(600)为0.4、侵染5 min、共培养3 d,GUS的瞬时表达率最高。PCR检测证明成功获得7株阳性转基因苗,且抗性鉴定实验证明转基因苗具有草铵膦抗性。【结论】为玉米转基因技术体系优化和培育抗除草剂新品种提供了理论参考。
韩平安吴新荣孙瑞芬石海波薛春雷常悦唐宽刚梁亚晖任芹勇李晓东
关键词:农杆菌介导法GUS染色
基因转入/非侵入式光调控神经干细胞增殖分化及其分子机制的初步研究
本研究发现小鼠神经干细胞自身表达多种光敏感蛋白(photoreceptors),细胞及分子遗传系列实验证明:无需病毒载体转染外源基因,通过微弱蓝光(455nm,300μw/cm2)照射便可利用细胞内Melanopsin-...
王梅天
关键词:神经干细胞细胞分化光调控分子机制
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内脂素基因转入对Ang Ⅱ诱导小鼠心肌肥大发生的影响
目的:  本研究观察内脂素转基因小鼠在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导下的心肌细胞的形态及其BNP与β-MHC的mRNA表达水平变化,旨在探讨内脂素在AngⅡ诱导的心肌肥大中的作用。  方法:  8周龄、20-25g的雄性C...
郭宏洲
关键词:心肌肥大
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应用真空渗透法将SFL基因转入水稻的研究被引量:1
2018年
【目的】真空渗透法无需组培过程,可明显缩短转化周期,提高转化效率。文章建立了水稻的真空渗透转化体系。【方法】应用自主研制的真空渗透转化装置,对开花前的活体水稻进行短暂抽真空条件下的农杆菌侵染,快速将苦参凝集素蛋白基因(SFL)成功转入水稻。【结果】对大量T0代转化种子进行除草剂抗性筛选、氯酚红和PCR检测,获得一批转基因阳性苗,证明外源基因已整合到水稻基因组中;经苗期喷雾接种和田间人工诱发鉴定,与非转基因对照相比,最终筛选出抗性明显增强的转SFL基因水稻材料,证明SFL基因在水稻中得到表达。【结论】本研究为水稻及其它作物的基因转化提供了一条快速、有效的新途径,同时也为SFL基因的功能研究及抗稻瘟病水稻新品种的培育奠定了基础。
钟巧芳李定琴李维蛟陈越柯学陈玲肖素勤王波杨久程在全
关键词:稻瘟病水稻
一种外源基因转入桉树进行瞬时表达的方法
本发明公开了一种外源基因转入桉树进行瞬时表达的方法,该方法包括以下步骤:取刚好完全展开的桉树成熟叶片,消毒,损伤其表层表皮细胞,并取样得到叶盘;得到的叶盘置于外源基因重组农杆菌菌液中浸泡,抽真空;取出农杆菌侵染后的叶盘置...
钟子倩黄真池李柳如黄俊文
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利用农杆菌介导合子胚转化法将Bar基因转入玉米自交系的研究
2017年
基于农杆菌介导的合子胚转化方法是一种具有自主知识产权的转基因新方法。利用该方法转化玉米合子胚,可直接获得转化种子。以东北春玉米区玉米自交系8902、Pa91、丹340作为转化受体,通过合子转化法进行抗草丁膦除草剂基因Bar的转基因研究。在获得的3 560份材料中,通过对T_1代种子苗叶面喷施草丁膦除草剂Basta,共获得153株抗性植株,抗性频率为4.3%。PCR鉴定阳性植株为102株,转化频率为2.87%。对PCR检测出的阳性植株进行自交获得T_2代,对材料继续进行抗性筛选,对抗除草剂表型的分离比率进行抗性遗传分析。
曲祥春李毅丹李晓辉刘德璞郝文媛
关键词:农杆菌介导法BAR基因基因转化
RNA干扰高油GmPEPc基因转入大豆研究被引量:2
2017年
通过构建GmPEPc基因的植物RNAi双元表达载体,并通过农杆菌介导的大豆子叶节遗传转化方法将控制油脂和蛋白合成途径的相关基因GmPEPc转入受体品种沈农9号中,通过抑制大豆内源GmPEPc基因的表达,增加油脂积累,从而获得高油的转基因大豆新品种。在大豆组织培养过程中,共切取大豆外植体407块,获得T0代转化苗35株,转化率8.9%。通过对转基因后代中目的基因的整合及表达情况进行分子鉴定。获得23株T_1代转基因后代,其中高抗草丁膦除草剂(喷施浓度300 mg·mL^(-1))14株,通过PCR检测结果表明其中12株为PCR阳性;PCR和Southern杂交检测表明,GmPEPc基因已经成功插入到转基因大豆植株基因组DNA中。对T_1代测定结果显示,转基因大豆籽粒的平均含油量比对照高9.51%,平均蛋白质含量下降5.44%。这些研究结果为筛选高油脂含量的转基因大豆新株系提供了依据,为下一步高油新品种的选育提供了种质基础。
张原宇董英山于盛竹邢国杰李桐郑惠景张玲
关键词:大豆PEPCRNA干扰子叶节
蔗糖-果糖基转移酶SST基因转入甜菜产生果聚糖的研究
目的:果聚糖可用于预防并调节多种人类的疾病,并且对人体的毒副作用完全不存在,被认定是营养型的保健食品,已被许多国家批准并广泛的用在食品、化装品、饲料等。另外,果聚糖作为一种重要的渗透调节物质,与植物的抗逆性密切相关。因此...
梁文洁
关键词:甜菜果聚糖基因转入

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王罡
作品数:329被引量:1,945H指数:23
供职机构:天津大学
研究主题:大豆 枸杞 农杆菌介导 体细胞胚 基因
季静
作品数:304被引量:1,649H指数:21
供职机构:天津大学
研究主题:大豆 枸杞 农杆菌介导 体细胞胚 基因
钱伟
作品数:119被引量:178H指数:6
供职机构:西南大学
研究主题:甘蓝型油菜 核盘菌 甘蓝 菌核病抗性 分子标记
陈章良
作品数:324被引量:2,413H指数:28
供职机构:山东工商学院
研究主题:数控机床 基因 外壳蛋白基因 水稻矮缩病毒 水稻
刘启昆
作品数:8被引量:0H指数:0
供职机构:复旦大学
研究主题:重组表达载体 成花 基因转入 转基因植株 转基因植物