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沉默CHL1基因表达促进放射抗拒性食管癌KYSE-R细胞的放射敏感被引量:2
2020年
目的:探讨沉默细胞黏附分子CHL1(close homolog of L1)基因表达对食管癌KYSE-R细胞放射敏感的影响。方法:选取食管癌KYSE细胞,采用连续照射的方法构建放射抗拒性的KYSE-R细胞;分别采用克隆形成实验和FCM法检测放射抗拒KYSE-R与亲本细胞KYSE细胞间的放射敏感差异;蛋白质印迹法检测KYSE和KYSE-R细胞中CHL1蛋白的表达水平。采用脂质体法将3条针对CHL1基因不同靶点的siRNA-CHL1(siCHL1-1、siCHL1-2和siCHL1-3)分别转入食管癌放射抗拒细胞KYSE-R,利用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法确定干扰效果最佳的siRNA。将siCHL1-3转染至KYSE-R细胞中,经X-照射后再分别用克隆形成实验、FCM法和CCK-8法检测沉默CHL1基因表达后对KYSE-R细胞放射敏感的影响,并进一步采用蛋白质印迹法检测KYSE-R细胞中凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2和Bcl-XL的表达情况。结果:构建获得具有更强的放射抗拒性的KYSE-R细胞。KYSE-R细胞中CHL1蛋白的表达水平明显高于亲本KYSE细胞(P<0.05),siCHL1-3的干扰效果最佳(P<0.05)。沉默CHL1基因表达后,经X-射线照射后CHL1干扰组KYSE-R细胞的存活曲线明显降低(P=0.0001),细胞凋亡的凋亡率明显提高,被阻滞在G2/M期细胞所占的百分比明显增加(P<0.05),细胞的增殖能力被明显抑制(P值均<0.05)。蛋白质印迹法结果显示,经X-射线照射后,CHL1干扰组KYSE-R细胞中Bax蛋白表达水平明显增高,而Bcl-2和Bcl-XL蛋白的表达水平明显降低(P值均<0.05)。结论:干扰CHL1基因表达可增强食管癌放射抗拒KYSE-R细胞对放射的敏感
孙蕊格柯青邓鑫州柴晶晶丁燕鹏徐姝珺骆志国
关键词:食管肿瘤细胞黏附分子放射肿瘤学
EGFR通过激活内质网应激通路PERK-eIF2α-GRP94及IRE1α-XBP1-GRP78介导人口咽癌放射抗拒性
目的:表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)在很多恶肿瘤中过表达,且其过表达与恶肿瘤放射抗拒性的产生密切相关。我们前期研究中发现放疗可以损坏内质网(endopl...
张妙
关键词:EGFR口咽癌放射抗拒性
文献传递
一种鼻咽癌临床相关放射抗拒性细胞株的构建方法
本发明公开了一种鼻咽癌临床相关放射抗拒性细胞株的构建方法,包括以下步骤:培养CNE‑2细胞、构建CNE‑2R细胞株,照射模式为:按照“0.5Gy*5次,1.0Gy*5次,1.5Gy*5次,2.0Gy*30次,累计75Gy...
吴波应申鹏王勇丁笑笑朱杰陈卫军孙华丽丁燕倪玲琴
文献传递
放射抗拒性肿瘤细胞株构建研究进展
2018年
约70%的恶肿瘤患者需要放射治疗,局部复发和转移是治疗失败的主要模式,放射抗拒性是重要的因素之一。明确潜在的放射抗拒相关机制至关重要,通过放射线构建放射抗拒性肿瘤细胞株是关键的工作基础。根据分割剂量、照射次数及不同分割剂量组合方式等因素的不同,归纳出4种典型的照射模式:常规照射模式、反复照射模式、梯度照射模式和其他照射模式。不同的照射模式在总照射剂量、构建周期上不同,肿瘤细胞的生物学特也存在差异。梯度照射模式随着细胞株放射抗拒性增强而逐步提高分割剂量,较好地平衡了分割剂量和照射后细胞恢复至指数期时间,优于其他3种照射模式。临床相关放射抗拒性细胞株具备放射抗拒性表型的同时,保持与亲本细胞株相同的基因型,是未来肿瘤放射抗拒性研究的重要方向。
吴波王勇朱杰应申鹏吕佳铭熊华才胡洁胡炜
关键词:放射抗拒性
乏氧诱导的A549细胞外泌体特征及其对放射抗拒性的影响被引量:1
2018年
目的 收集乏氧和常氧条件下人肺腺癌A549细胞产生的外泌体,观察常氧下A549细胞与外泌体共培养后对X射线敏感及侵袭的变化。方法 分别在乏氧(1% O2)和常氧条件下(21% O2)培养A549细胞,超高速离心法收集在细胞分泌的常氧外泌体(N-EXO)和乏氧外泌体(H-EXO)。NanoSight检测外泌体数量,扫描电镜观察外泌体的外观和大小。蛋白印迹检测外泌体蛋白CD63。CCK8检测细胞对X射线的耐受。荧光显微镜观察A549细胞对PKH67标记的外泌体的摄取。细胞划痕实验和Transwell实验观察加入不同的外泌体后细胞侵袭和侵袭变化,ELISA方法检测细胞上清液中基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达变化。细胞克隆形成实验观察二种外泌体对细胞放射抵抗的改变。结果 每ml细胞培养液中H-EXO的数量增多。H-EXO和N-EXO均呈现出典型的环饼状,H-EXO直径变小,粒径分布在30~200 nm,小于N-EXO的粒径(50~220 nm)。H-EXO和N-EXO的CD63表达无明显差别。乏氧条件培养的A549细胞接受2 Gy X射线后,细胞的增殖水平在4和6 d时远高于常氧条件下的细胞。PKH67绿色荧光标记的外泌体分布在细胞内部。12、24、48 h后,H-EXO组细胞划痕宽度远小于N-EXO组(t=2.96、6.76、3.35,P〈0.05)。H-EXO组细胞穿膜细数量大于N-EXO组和对照组(t=4.84、7.88,P〈0.01)。H-EXO组上清液中MMP2(t=4.70、3.21,P〈0.05)和MMP9(t=5.61、3.76,P〈0.05)表达水平较对照组和N-EXO组均明显增高。对照组、N-EXO和H-EXO的D0值分别为2.614、2.552、4.850。H-EXO较N-EXO可以明显增强A549细胞的放射抵抗。结论 乏氧条件下,A549细胞释放的外泌体数量增多、粒径变小,乏氧外泌体可以促进常氧细胞的侵袭,并且能够增强细胞对X射线的耐受
朱传东王礼学王国相魏娟张启佳徐瀚峰童金龙郑勤
关键词:外泌体乏氧放射抗拒性
上调人食管癌Eca109细胞Shh-Gli1信号通路对放射抗拒性及细胞周期的影响被引量:3
2018年
目的:通过上调Sonic Hedgehog(Shh)信号通路关键因子Gli1,探究Shh信号通路与食管癌细胞放射抗拒性及细胞周期的关系。方法:用过表达Gli1质粒转染人食管癌Eca109细胞,记为Eca109-ox-Gli1组;转染空载质粒为阴对照组;以不作处理的亲本细胞株为正常对照组。Real-time PCR与Western blot检测转染后细胞内Gli1的表达,集落形成实验检测细胞放射敏感,流式细胞术检测转染前后细胞周期分布。结果:Real-time PCR与Western blot结果均显示Eca109-ox-Gli1组的Gli1表达显著高于阴对照组和正常对照组(P<0.05)。集落形成实验显示2 Gy射线照射后,Eca109-ox-Gli1组的存活分数较正常对照组明显升高(P<0.05),转染后细胞对射线敏感降低,放射抗拒性增加。Eca109-ox-Gli1组中S期细胞分布比例显著高于对照组(P<0.01),再照射6Gy后,3组细胞均出现了G_2/M期阻滞,正常对照组相比于Eca109-ox-Gli1组G_2/M期细胞分布显著增高(P<0.01)。结论 :上调Shh信号通路关键因子Gli1能够增强食管癌细胞的放射抗拒性,这一过程可能是通过调控细胞周期实现的。
余今菁贺昱霖刘佳琪刘佳琪刘群刘群龙辉
关键词:放射抗拒性细胞周期
一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用
本发明涉及一种放射抗拒性肺癌全细胞疫苗及其制备方法和应用,具体地,本发明建立了一个放射抵抗显著提高的放射抗拒性肺癌细胞株,保藏号为CCTCC C201537,利用该细胞株制备得到肺癌全细胞疫苗,通过动物实验证实该肺癌全...
乔田奎庄喜兵燕丽邢娜张琪
文献传递
癌细胞放射抗拒性机制的研究进展被引量:7
2017年
放疗是治疗癌症的重要手段之一,但是近年来因癌细胞产生放射抗拒性导致的放疗敏感低下和(或)放疗后复发是放疗失败的重要原因。目前对放射抗拒性机制的研究尚不全面,研究较多的是鼻咽癌、食管癌、神经母胶质瘤、肺癌、宫颈癌等的放射抗拒性机制。作者对鼻咽癌、食管癌、神经母胶质瘤、肺癌、宫颈癌、肠癌等放射抗拒性机制的研究进展作一综述。
张美婷山顺林耿炜
关键词:癌症放射抗拒性
上调Sonic Hedgehog信号通路关键因子Gli1对食管癌放射抗拒性的影响
目的:  探究Sonic Hedgehog(Shh)信号通路与食管癌放射抗拒的关系,进一步研究上调shh信号通路关键因子Gli1对食管癌放射抗拒性的影响。  方法:  1、以人食管癌细胞Eca109为亲本株,通过X射线反...
贺昱霖
关键词:食管癌SHH信号通路放射抗拒性
文献传递
放射致鼻咽癌细胞发生自噬过程PARP-1与LKB1-AMPK-mTOR通路关系及干扰该通路对放射抗拒性的影响
【研究背景】  鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)是一种好发于我国长江以南包括广东、广西、湖南、福建、浙江、香港及东南亚地区的恶上皮细胞肿瘤。由于其特殊的解剖位置,无论是早期还是局部晚期...
陈泽昙
关键词:鼻咽癌增敏治疗

相关作者

王亚利
作品数:66被引量:323H指数:10
供职机构:西安交通大学
研究主题:鼻咽癌 CASPASE-3 放射抗拒性 宫颈癌 细胞凋亡
张力
作品数:21被引量:74H指数:5
供职机构:温州医学院附属第一医院
研究主题:放射抗拒性 西妥昔单抗 食管癌 苦参碱 增殖
王中卫
作品数:53被引量:219H指数:9
供职机构:西安交通大学医学院第二附属医院
研究主题:鼻咽癌 放疗 乳腺癌 预后 放射抗拒性
金迎迎
作品数:43被引量:147H指数:7
供职机构:西安交通大学医学院第二附属医院
研究主题:鼻咽癌 放射抗拒性 食管癌 同期放化疗 食管癌细胞
李海英
作品数:14被引量:68H指数:5
供职机构:温州医学院附属第一医院
研究主题:放射抗拒性 苦参碱 增殖 细胞株 西妥昔单抗