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- 次级淋巴组织趋化因子及其受体CCL21/CCR7在原发干燥综合征T淋巴细胞移行浸润中的作用及其相关机制的研究
- 目的:原发干燥综合征(primary Sj?gren’s syndrome,pSS)是一种常见的慢性自身免疫性风湿病,临床上以口干、眼干为特征伴有自身抗体(抗Ro/SSA抗体、抗La/SSB抗体)的产生和高丙种球蛋白血症...
- 吴春玲
- 关键词：干燥综合征趋化因子CCL21趋化因子受体CCR7JNK
- 文献传递
- 次级淋巴组织趋化因子在溃疡性结肠炎中的表达及其意义被引量：2
- 2015年
- 背景:次级淋巴组织趋化因子(SLC)参与淋巴归巢和抗肿瘤免疫应答,对肠道淋巴细胞有趋化作用。多项动物实验表明SLC参与了溃疡性结肠炎(UC)的发生、发展。目的:探讨SLC在UC患者中的表达及其意义。方法:纳入2010年12月-2012年12月南通大学附属医院40例活动期UC患者,以20名健康志愿者作为正常对照,采用免疫组化法检测结肠组织SLC表达,并分析其与UC病情程度的关系。结果:UC组SLC均阳性表达,正常对照组呈阴性或弱阳性表达,UC组SLC表达显著高于正常对照组,差异有统计学意义(4.16±0.78对0.52±0.11,P<0.05)。UC病变程度越重,SLC表达阳性率越高。结论:SLC参与了UC的发生和发展,其可能在UC局部结肠组织破坏和病理变化中起重要作用。
- 高东锋周国雄曹维陈海琴张海峰
- 关键词：次级淋巴组织趋化因子免疫组织化学
- 雷公藤内酯醇抑制次级淋巴组织趋化因子表达对小鼠实验性结肠炎的影响被引量：2
- 2014年
- 目的:研究实验性结肠炎小鼠中次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid tissue chemokine,SLC)的表达,了解不同浓度雷公藤内酯醇(triptolide,TL)抑制SLC表达对小鼠结肠炎的影响.方法:40只♀Balb/c小鼠随机分为5组:正常组、葡聚糖硫酸钠(dextran sodium sulphate,DSS)模型组、丙二醇治疗组、TL治疗组1、TL治疗组2.正常组小鼠饮用蒸馏水,其余小鼠饮用5%DSS溶液7 d,诱导建立实验性结肠炎模型以模拟人类溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC).治疗组从造模第3天开始,丙二醇治疗组给予2%丙二醇0.2 mL腹腔注射(ip),TL治疗组分别给予溶于2%丙二醇的TL 0.6 mg/kg、TL 0.8 mg/kg,qd,ip 5 d.第8天处死小鼠后检测结肠长度、结肠大体形态评分、结肠组织学病理评分,应用免疫组织化学、实时荧光定量PCR检测小鼠结肠组织中SLC表达.结果:SLC在小鼠正常组中微弱表达,在小鼠UC中表达上调,正常组与DSS组、丙二醇治疗组相比差异有统计学意义(P<0.01);丙二醇治疗组小鼠与DSS组相比,SLC表达无明显差异(P>0.05);TL治疗组小鼠症状减轻,SLC表达下调,与DSS组、丙二醇治疗组相比,差异有统计学意义(P<0.01).结论:SLC表达参与了UC的发生和发展,TL对小鼠实验性结肠炎的治疗效应与抑制SLC的表达有相关性.
- 张霞周国雄张海峰陈海琴曹维
- 关键词：溃疡性结肠炎次级淋巴组织趋化因子雷公藤内酯醇
- 小鼠次级淋巴组织趋化因子的原核表达及纯化
- 2012年
- 背景:次级淋巴组织趋化因子(secondary lymphoid-tissue chemokine,SLC/CCL21)是近年来发现的,具有免疫调节作用及抗肿瘤活性。目的:构建小鼠次级淋巴组织趋化因子原核表达载体,并在大肠杆菌中高效表达重组蛋白。方法:取C57BL/6小鼠淋巴结细胞,体外用Poly(I:C)刺激后提取RNA并反转录,以此cDNA为模板,通过PCR技术扩增出CCL21成熟蛋白编码序列。克隆入原核表达载体pBEn-SBP-SET1a,构建融合表达载体pBEn-CCL21。将表达载体转化大肠杆菌BL21(DE3),经异丙基-β-D-硫代吡喃半乳糖苷诱导后TRICINE-SDS-PAGE电泳分析和鉴定重组蛋白的表达。CCL21融合蛋白经链霉亲和柱层析纯化。结果与结论:实验成功构建了CCL21基因的原核表达载体pBEn-CCL21,并获得相应的融合蛋白。结果显示CCL21可在大肠杆菌中高效表达,经链霉亲和柱层析纯化即可获得CCL21重组目的蛋白。
- 张力丹罗彦彦林青任向荣苏绍波林有坤
- 关键词：原核表达CCL21蛋白纯化小鼠
- 次级淋巴组织趋化因子及其受体对干燥综合征患者外周血淋巴细胞趋化性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的:研究次级淋巴组织趋化因子(CCL21)及其受体(CCR7)对干燥综合征(SS)患者外周血淋巴细胞趋化性的影响,并探讨其在SS发病机制中的作用。方法:选择31例SS患者(其中原发性SS18例、继发性SS13例)及正常对照20例(均为健康体检者)。分离SS患者及正常对照的外周血淋巴细胞,采用transwell细胞跨膜试验检测CCL21/CCR7对外周血淋巴细胞迁移的影响。结果:在CCL21的作用下,原发性SS和继发性SS患者外周血淋巴细胞的趋化指数(CI)分别为2.92±0.12和2.80±0.28,均明显高于正常对照(CI=1.32±0.11,P<0.01);原发性SS和继发性SS患者之间淋巴细胞的CI无统计学差异(P>0.05)。经过抗CCR7单抗(mAb)处理后,原发性SS和继发性SS患者的CI分别为1.04±0.05和1.03±0.08,与未经抗CCR7mAb处理的SS患者相比较明显降低(P<0.01)。结论:CCR7是导致淋巴细胞迁移的重要因素之一。CCL21/CCR7的相互作用可介导SS患者外周血淋巴细胞的迁移,可能与SS患者的外分泌腺中大量淋巴细胞浸润导致腺体损害有重要关系。
- 吴春玲张榕刘海娜赵丽娟肖卫国
- 关键词：干燥综合征CCL21CCR7趋化性淋巴细胞
- 次级淋巴组织趋化因子和甲胎蛋白共修饰的树突状细胞诱导特异性抗肝癌免疫作用的研究被引量：4
- 2010年
- 背景与目的:树突状细胞(dendritic cell,DC)是迄今发现的抗原呈递功能最强的专职抗原呈递细胞,近年来以DC为基础的肿瘤基因免疫治疗研究倍受瞩目。病毒载体介导的基因转移以其高效和良好的靶向性已被广泛应用于肿瘤基因治疗。本实验拟制备携带人AFP和SLC基因的慢病毒表达载体,并于体外感染CD34+造血干细胞来源的DC,诱导DC产生特异性抗肝癌细胞免疫作用,观察其对肝癌细胞株的杀伤作用。方法:采用化疗和集落刺激因子动员的肝癌患者外周血造血干细胞,血细胞分离机采集CD34+造血干细胞,IL-4、GM-CSF联合TNF-α刺激CD34+细胞分化为DC。并检测经Lenti-AFP/Lenti-SLC转染致敏后的DC对CTL增殖的影响,并检测其对人肝癌细胞HepG2的作用。结果:经细胞因子刺激诱导培养的DC具有典型的分枝状突起,高表达CD1a、CD11c、CD80和CD86。MTT法检测Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原冲击的DC能明显诱导CTL增殖。此CTL对表达AFP的肝癌细胞株HepG2的杀伤率显著性高于未转染DC组和无DC组(P<0.05和P<0.01),效靶比为50:1时杀伤效应达到最高峰(P<0.01)。结论:Lenti-AFP/Lenti-SLC抗原转染的DC在体外可诱导同种CTL产生和增殖,后者对AFP阳性肝癌细胞株具有特异性杀伤效应,该方法为肝癌免疫治疗奠定了基础。
- 侯静李明峰熊伟民何新颖邸立军任军
- 关键词：次级淋巴组织趋化因子甲胎蛋白树突状细胞细胞毒性T淋巴细胞肝癌
- 人次级淋巴组织趋化因子对宫颈癌Siha细胞侵袭能力的影响
- 2010年
- 目的研究人次级淋巴组织趋化因子(SLC)对Siha细胞侵袭能力的影响。方法从人脾脏cDNA扩增出SLC,构建真核表达载体,转染宫颈癌细胞株Siha。Transwell检测肿瘤细胞侵袭能力,利用NF-κB特异性启动子荧光素酶报告系统检测肿瘤细胞内NF-κB的活化。结果经PCR、酶切、测序及ELISA证实,SLC真核表达载体构建表达成功。SLC转染Siha细胞,肿瘤侵袭能力增强约(2.34±0.14)倍,且肿瘤细胞内NF-κB的活化增强约(3.98±0.194)倍。结论 SLC作为趋化因子,其作用已不局限于趋化作用,还可诱导肿瘤细胞NF-κB的活化,促进肿瘤细胞侵袭,有着多重作用。
- 刘宏杰胡萍张志丽卢晓沈关心吴砂
- 关键词：宫颈癌NF-ΚB
- 口服人乳头瘤病毒18 E7与次级淋巴组织趋化因子联合基因疫苗的抗肿瘤作用
- 2010年
- 目的观察口服人乳头瘤病毒(HPV)18型E7联合次级淋巴组织趋化因子(SLC)基因疫苗的抗肿瘤作用。方法Western blotting方法鉴定稳定表达E7的B16F1细胞株。小鼠腋下接种稳定表达E7的小鼠黑色素瘤B16F1细胞,荷瘤小鼠随机分为5组(n=12),灌胃途径给予各种伤寒沙门菌液免疫小鼠:生理盐水组(生理盐水0.2mL)、空载体组(携带空载体的菌液0.2mL)、E7组(携带E7的菌液0.2mL)、SLC组(携带SLC的菌液0.2mL)和E7联合SLC组(携带E7或SLC的菌液各0.1mL)。检测各组小鼠免疫后的瘤重及生存率、血清及阴道分泌物E7特异性抗体产生情况、脾细胞增殖指数和杀伤活性,并观察肿瘤组织局部淋巴细胞浸润情况。结果稳定表达E7的B16F1细胞株成功构建。E7联合SLC组小鼠瘤重显著降低,生存期显著延长(P<0.05),诱导产生血清E7特异性IgG抗体水平显著增加(P<0.01),淋巴细胞增殖指数和细胞毒T淋巴细胞杀伤率显著高于其他组(P<0.05或P<0.01)。SLC组及E7联合SLC组肿瘤组织浸润的淋巴细胞数均明显增多。结论口服HPV18型E7联合SLC基因疫苗可发挥抗肿瘤作用,其机制可能为增强体液和细胞免疫应答。
- 曾凡慧张昌菊朱平雷小敏柳长柏
- 关键词：人乳头瘤病毒18
- 次级淋巴组织趋化因子对溃疡性结肠炎大鼠淋巴细胞的体外趋化作用被引量：2
- 2009年
- 目的观察次级淋巴组织趋化因子（SLC）对溃疡性结肠炎（UC）大鼠淋巴细胞的体外迁移作用。方法采取UC模型组、对照组大鼠各20只大鼠的门静脉血，分离出淋巴细胞培养，通过流式细胞仪检测淋巴细胞表达趋化因子受体CCR7，利用Boyden小室法探讨趋化因子SLC对不同组别淋巴细胞的体外趋化作用．结果流式细胞仪结果证实二组大鼠淋巴细胞均能表达趋化因子受体CCR7，模型组结肠静脉回流血中CCR7^＋淋巴细胞的比例（68．74±5．18）％明显高于对照组（16．62±7．84）％，P〈0．01，SLC可增强淋巴细胞的移行能力，SLC对模型组淋巴细胞的趋化活性明显高于对照组，并呈现剂量效应关系，80ug/L为其饱和浓度。结论SLC／CCR7可促进淋巴细胞的迁移，为探讨UC肠淋巴细胞归巢提供实验依据。
- 葛步军陈锡美杨长青吴剑
- 关键词：溃疡性结肠炎淋巴细胞趋化因子流式细胞法
- 次级淋巴组织趋化因子及其受体CCR7在胰腺癌中的表达及临床意义被引量：4
- 2009年
- 目的研究胰腺癌中次级淋巴组织趋化因子(SLC)及其受体CCR7的表达情况,探讨其与胰腺癌临床病理关系。方法应用免疫组化、RT-PCR和实时荧光定量PCR技术检测30例胰腺癌组织、癌旁组织、正常胰腺组织和胰周淋巴结组织中SLC和CCR7的表达情况。结果SLC蛋白在胰腺癌组织中呈低表达状态、在癌旁组织和胰周淋巴结均呈中等表达状态、在正常胰腺组织中高表达,阳性率分别为16.7%(5/30)、43.3%(13/30)、46.6%(14/30)和76.7%(23/30)。RT-PCR和实时荧光定量PCR也证实SLCmRNA表达与SLC蛋白相同。CCR7蛋白在胰腺癌组织、癌旁组织和胰周淋巴结均呈高表达状态、在正常胰腺组织中呈低表达状态,阳性率分别为76.7%(23/30)、66.7%(23/30)、70.0%(/30)和30.0%;同时还发现CCR7蛋白在胰腺静脉平滑肌和淋巴结外脂肪组织也有阳性表达情况。RT-PCR和实时荧光定量PCR结果也证实CCR7mRNA表达与CCR7蛋白相同。结论SLC在胰腺癌进展和淋巴结转移过程中起双重作用,既发挥抗肿瘤作用,又通过趋化CCR7表达阳性的肿瘤细胞促进胰腺癌的淋巴结转移。CCR7与胰腺癌淋巴结转移和TNM分期密切相关,并可能参与胰腺癌的淋巴管生成和淋巴结转移的调控。
- 赵斌赵文华王长亮张波周武元张红雨仲伟霞李胜
- 关键词：胰腺肿瘤次级淋巴组织趋化因子CCR7
