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建立温石棉致BEAS-2B恶性转化细胞株的方法: 本发明公开了一种建立温石棉致BEAS‑2B恶性转化细胞株的方法，涉及细胞工程技术领域，包括：实验对象的选择和制备；确定合适的浓度，用温石棉染毒液染毒BEAS‑2B细胞；再对细胞恶性转化进行评价。本发明连续染毒46代后，B...; 张旭邓建军周云马骥霍婷婷杨洁杨芝芝何佳睿

温石棉染毒肺上皮细胞的miRNA表达谱分析: 2024年; [背景]温石棉被广泛应用于建筑、工业等领域。研究显示其易导致职业人群肺纤维化,但微小RNA(miRNA)参与温石棉致肺纤维化的研究较少,具体机制尚不明确。[目的]采用二代测序技术分析温石棉染毒对人肺上皮细胞(BEAS-2B细胞)miRNA表达谱的影响,探讨差异表达的miRNA及相关信号通路的变化,寻找温石棉诱导肺纤维化的潜在靶点及分子机制。[方法]本研究用激光粒度分析仪和X射线衍射仪对温石棉进行了粒径大小和物相分析,并对BEAS-2B细胞进行不同时间(12、24和48 h)、不同剂量(0、50、100和200μg·mL^(-1))的温石棉染毒。用细胞活力检测试剂盒(CCK8)检测细胞存活率。通过蛋白免疫印迹(WB)检测200μg·mL^(-1)温石棉染毒BEAS-2B细胞24 h后纤维连接蛋白(Fibronectin)、胶原蛋白Ⅰ(Collagen-Ⅰ)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平。二代测序技术分析温石棉染毒后与对照组的样本相关性和miRNA表达谱的变化。预测差异miRNA的靶基因并对其进行基因功能注释(GO)分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。[结果]本研究所用温石棉粉尘平均粒径为3.58μm,X射线衍射分析结果均为温石棉特征峰。与对照组比较,温石棉随浓度和染毒时间的增加而逐渐抑制BEAS-2B细胞存活率(P<0.01)。50、100和200μg·mL^(-1)温石棉染毒细胞12 h后的存活率分别为83.88%±1.86%、78.07%±3.97%、71.95%±2.99%;染毒24 h后的存活率分别为77.41%±1.58%、69.57%±2.23%、62.79%±3.65%;染毒48 h后的存活率分别为74.31%±4.93%、65.84%±2.71%、52.74%±6.31%。200μg·mL^(-1)温石棉染毒BEAS-2B细胞后Fibronectin、Collagen-Ⅰ和α-SMA蛋白表达水平升高(P<0.05)。温石棉实验组和对照组主成分分析显示两组样本成分存在差异,共筛选出163个差异miRNA,其中上调79个,下调84个。GO分析显示差异miRNA主要与RNA聚合酶Ⅱ的转录调控、DNA模板转录调控、细胞分化、蛋白磷; 何佳睿宋娟王玉君张旭杨洁霍婷婷董发勤邓建军; 关键词：温石棉肺纤维化 BEAS-2B细胞

温石棉对内皮细胞Wnt5a、p16和p21表达的影响: 2024年; 目的探讨温石棉对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的影响。方法实验组以50、100、200 mg/L温石棉纤维液刺激HUVECs 24、48、72 h,对照组仅加RPMI 1640培养基培养细胞,观察细胞形态变化,β-半乳糖苷酶法分析细胞衰老情况,四甲基偶氮唑蓝法检测细胞存活率。采用实时荧光定量PCR法检测细胞中Wnt5a、p16和p21 mRNA的表达情况。结果实验组HUVECs多呈梭形,部分呈圆形或不规则形,出现裸核及空泡现象,可见死亡细胞。随温石棉质量浓度及暴露时间的增加,细胞活性逐渐降低,衰老细胞逐渐增多。100 mg/L温石棉处理HUVECs 24 h时,细胞生长较活跃。与对照组相比,实验组Wnt5a、p16和p21 mRNA表达水平均增高(P<0.05)。结论温石棉可促进HUVECs衰老,Wnt5a、p16和p21参与此过程。; 李莘李雪王谙; 关键词：人脐静脉内皮细胞

一种新型多角度异形耐温石棉加工夹具结构: 本实用新型公开了一种新型多角度异形耐温石棉加工夹具结构，涉及夹具技术领域，包括卡座和工作台，所述卡座的内部设有固定机构，固定机构包括空腔，空腔开设于卡座的内部，空腔的内底壁通过轴承转动连接有螺纹杆，螺纹杆的外表面螺纹连接...; 王志燕熊国雄

温石棉暴露诱导上皮间质转化机制研究进展: 2023年; 温石棉是生活中广泛应用的矿物材料,其致纤维化、致癌性是公众关注较多的公共卫生问题。目前,已有50多个国家全面禁止进口和使用温石棉,但中国仍是世界上最大的温石棉消费国和第二大生产国,职业暴露人群庞大。调查显示温石棉矿工患肺纤维化、肺癌和间皮瘤的概率明显高于其他职业工作者。但温石棉诱发癌症的潜伏期一般长达数十年,难以及时发现和治疗,因此温石棉暴露所致的癌症死亡人数较多,是职业性癌症死亡的主要原因。上皮间质转化是组织、器官发生慢性炎症、纤维化、癌变及癌转移等生物学过程的关键步骤,在温石棉暴露所致肺纤维化、肺癌及其他疾病中发挥着重要作用。本文主要从炎症因子的表达水平变化、丝裂原活化蛋白激酶通路及氧化应激等其他生物学途径对温石棉诱导上皮间质转化的机制研究现状进行概述,并提出进一步研究温石棉诱导上皮间质转化可能的研究方向,为深入研究温石棉暴露对肺纤维化、肺癌等疾病的发生发展奠定基础,提供可靠的依据与参考。; 何佳睿邓建军; 关键词：温石棉上皮间质转化炎症因子丝裂原活化蛋白激酶氧化应激

温石棉矿山蛇纹岩型剥离废石的冶金助熔剂及其制备方法: 本发明提供了一种温石棉矿山蛇纹岩型剥离废石的冶金助熔剂及其制备方法，所述方法包括：将温石棉矿山蛇纹岩型剥离废石原料进行手选、属性破碎和筛分，获得粗制蛇纹岩碎块；擦洗、水洗除尘，获得精制蛇纹岩碎块，作为冶金助熔剂，其粒度在...; 罗利明彭同江孙红娟唐颂丁文金

以温石棉矿山剥离废石为骨料的免烧砌块及其制备方法: 本发明提供了一种以温石棉矿山剥离废石为骨料的免烧砌块及其制备方法，所述方法包括：将温石棉矿山剥离废石原料进行属性破碎、整形和筛分，获得粗制机制砂骨料；擦洗、水洗除尘和滤水，获得精制机制砂骨料；将精制机制砂骨料与水泥、助剂...; 孙红娟彭同江罗利明唐颂

温石棉矿山剥离废石为骨料的建筑轻型墙板及其制备方法: 本发明提供了一种温石棉矿山剥离废石为骨料的建筑轻型墙板及其制备方法，所述方法包括：将温石棉矿山剥离废石原料进行属性破碎、整形和筛分，获得粗制机制砂骨料；擦洗、水洗除尘和滤水，获得精制机制砂骨料；将精制机制砂骨料与助剂、轻...; 罗利明彭同江孙红娟唐颂

温石棉暴露诱发核糖体DNA拷贝数变异及DNA损伤反应研究被引量：2: 2022年; 目的探索温石棉暴露对核糖体DNA(rDNA)拷贝数的影响及其与DNA损伤反应的关系,为石棉致癌机制研究提供依据。方法分别用1.25、2.5、5μg/cm^(2)(低、中、高浓度)的温石棉悬液处理MeT-5A人胸膜间皮细胞,磷酸盐缓冲液处理作为对照。分别收集处理6、24、48和72 h的细胞,采用实时荧光定量PCR检测rDNA拷贝数及核仁蛋白基因BIRC5、HRAS、GINS4和RRM2 mRNA表达;使用Muse细胞分析仪及相应试剂盒检测细胞凋亡和DNA损伤。比较不同处理时间不同温石棉浓度组细胞rDNA拷贝数、DNA损伤反应和核仁蛋白基因mRNA表达水平。结果温石棉悬液处理6、48、72 h时,低、中、高浓度组和对照组45S rDNA拷贝数差异均有统计学意义(P<0.05);处理6 h时,各浓度组45S rDNA拷贝数均低于对照组(P<0.05);处理48、72 h时,高浓度组45S rDNA拷贝数高于低、中浓度组(P<0.05)。处理24、48、72 h时,各组5S rDNA拷贝数比较,差异均有统计学意义(P<0.05);处理24、48 h时,中、高浓度组5S rDNA拷贝数均低于对照组(P<0.05);处理24、72 h时,中、高浓度组5S rDNA拷贝数均低于低浓度组(P<0.05)。不同处理时间点各组总细胞凋亡率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);中、高浓度组总细胞凋亡率均高于对照组(P<0.05),以晚期凋亡为主。处理72 h时,各组ATM激活率和DNA双链断裂率比较,差异均有统计学意义(P<0.05);中、高浓度组细胞ATM激活率和DNA双链断裂率均高于对照组(P<0.05)。处理24、48 h时,各组BIRC5、HRAS、GINS4和RRM2 mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(P<0.05);中、高浓度组BIRC5、HRAS、GINS4和RRM2 mRNA相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论温石棉暴露可诱发人胸膜间皮细胞rDNA拷贝数变异,引起相关核仁蛋白表达改变,可能参与DNA损伤反应过程的调控。; 刘佳琪冯玲芳陈俊斐夏海玲蒋兆强吴帆龚晓雪楼建林; 关键词：温石棉核糖体DNA 拷贝数变异核仁蛋白

温石棉诱导支气管上皮细胞恶性转化中的基因表达谱变化特征分析: 2022年; 目的探讨温石棉对人支气管上皮细胞系BEAS-2B细胞基因表达的影响。方法将BEAS-2B细胞随机分为2组,温石棉恶性转化组细胞予质量浓度为20μg/cm~2温石棉标准品构建温石棉诱导恶性转化BEAS-2B细胞模型,对照组细胞予等体积磷酸缓冲盐溶液。提取2组细胞中的总RNA,逆转录合成c DNA。以Cy5-d CTP和Cy3-d CTP荧光素分别标记2组细胞制作探针,进行芯片扫描。采用Lux Scan 3.0图像分析软件分析被标记的DNA荧光信号,筛选差异表达基因进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析和基因本体(GO)富集分析。结果与对照组比较,温石棉恶性转化组细胞差异表达的基因有642个;其中,上调193个,下调449个。KEGG信号通路分析和GO富集分析结果显示,温石棉诱导恶性转化BEAS-2B细胞中差异表达的基因主要参与P53信号通路、组蛋白H3-K9甲基化和亚甲基四氢叶酸还原酶缺乏通路、磷酸肌醇结合蛋白3激活蛋白激酶B信号通路、核苷磷酸代谢过程和组织相容性复合物Ⅱ类抗原提呈表达抑制等信号通路。结论温石棉可诱导BEAS-2B细胞发生基因表达谱的改变;P53信号通路和组蛋白H3-K9甲基化等相关通路参与细胞恶性转化过程。; 李君贤黄何菲雷雨珊周书宇苑修源高雅楠朱丽瑾张芳芳; 关键词：温石棉恶性转化细胞转化差异表达基因基因表达

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