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乳铁蛋白抑制坦布苏病毒感染细胞的应用
本发明公开了乳铁蛋白抑制坦布苏病毒感染细胞的应用。本发明中乳铁蛋白竞争结合宿主细胞表面坦布苏病毒受体,干扰坦布苏病毒与靶细胞特异性受体的结合,从而抑制坦布苏病毒感染靶细胞。结果表明,乳铁蛋白具有干扰坦布苏病毒与靶细...
赵冬敏钱卫平于建宁赵芳林志平王慧利
乳铁蛋白对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其机制
2025年
目的探讨乳铁蛋白(bovine lactoferrin,bLF)对肺癌A549细胞增殖和凋亡的影响及其可能的机制,为bLF抗肺癌相关研究提供实验依据。方法使用不同浓度的bLF处理A549细胞,显微镜观察bLF对细胞形态的影响,CCK-8法检测其对细胞增殖活性的影响,克隆形成与划痕试验检测其对细胞增殖和迁移的影响,qRT-PCR和Western blot检测细胞凋亡相关基因和蛋白的表达情况。结果bLF对A549细胞生长具有明显的抑制作用,且呈浓度和时间依赖性。与0 mg/mL bLF组相比,经0.5与1.0 mg/mL bLF处理后的A549细胞集落形成能力均明显降低(t分别为6.016和30.24,P分别为0.0038和0.000),体外迁移能力逐渐减弱。此外,bLF可引起A549细胞凋亡信号通路的激活。与对照组相比,0.5与1.0 mg/mL bLF组细胞中的促凋亡蛋白Bax及P53的表达水平显著提高(Bax:t分别为6.454和11.11,P分别为0.0232和0.008;P53:t分别为6.962和49.46,P分别为0.0022和0.0004),抑凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著降低(t分别为4.333和10.44,P分别为0.0494和0.0091),高浓度(1.0 mg/mL)bLF组可切割pro-caspase-3信号,激活caspase-3(t=5.759,P=0.0289)。结论bLF可显著抑制肺癌A549细胞增殖,并促进其凋亡,从而发挥抗肿瘤作用。
苏津贤舒星富陈遥赵钰张博文张海霞
关键词:牛乳铁蛋白肺癌增殖凋亡
一种快速精准检测各种品中乳铁蛋白含量的广适性ELISA方法
2025年
[目的]验证夹心法ELISA技术是否可成为包括风味发酵在内的各种制品中乳铁蛋白含量的精准检测方法。[方法]利用优化的夹心法ELISA检测试剂分别检测乳铁蛋白(LTF)标准品溶液、巴氏杀菌样本、加标巴氏杀菌样本、12种北京地区市场常见的风味发酵、7种加标风味发酵、7种混合巴氏杀菌的风味发酵乳铁蛋白含量,计算加标回收率及CV值。用该检测试剂检测3种加标风味发酵乳铁蛋白对72℃热处理的敏感度;并与乳铁蛋白国标检测(高效液相色谱法)方法对比检测生和巴氏灭菌。[结果]该检测试剂可检测乳铁蛋白(LTF)标准品溶液和巴氏杀菌样本中乳铁蛋白,且加标回收率91.7%~106.4%。经检测,12种风味发酵乳铁蛋白含量为无;7种加标风味发酵的加标回收率86.3%~109.1%,且检测CV值远低于12%;7种风味发酵与巴氏杀菌混合乳铁蛋白含量与对照组比值在92.3%~110.5%,且大多数检测CV值远低于12%;3种加标风味发酵乳铁蛋白含量随72℃加热时间延长而降低,且下降曲线相似。与国家标准方法对比分析,夹心法ELISA方法检测生和巴氏杀菌乳铁蛋白含量的符合率分别为97.54%、111.2%,说明该检测方法的准确性达到国标标准。[结论]夹心法ELISA检测试剂可精准检测风味发酵乳铁蛋白含量。
张婧朱孔迪刘传铭刘长振王鹏杰黄家强
关键词:牛乳铁蛋白
表达乳铁蛋白肽的罗伊氏杆菌分泌型信号肽的筛选及鉴定
2025年
本研究旨在构建一株高效表达乳铁蛋白肽的重组罗伊氏杆菌,通过筛选不同信号肽的方式提高乳铁蛋白肽的分泌表达水平,提高重组菌株的应用效率。对实验室分离的一株罗伊氏杆菌进行全基因组测序,筛选分泌蛋白的信号肽基因,构建表达乳铁蛋白肽(LFCA)的重组菌株,通过Western blot、ELISA、激光共聚焦等技术分析和比较信号肽分泌LFCA的效果,对重组菌分泌的LFCA对金黄色葡萄球菌增殖抑制作用及其半数最低抑菌浓度进行检测。结果显示,A2、A3、A4和A8信号肽能够表达LFCA,其中A3和A8能够使LFCA分泌到培养上清中,且A3信号肽使LFCA的分泌表达水平提高了近2倍,对宿主菌株的生长性能无显著影响,重组菌株分泌的LFCA对金黄色葡萄球菌的半数最低抑菌浓度为97.50μg·mL^(-1)。本研究成功筛选出能够高效分泌乳铁蛋白肽的信号肽,重组菌株的抑菌效率得到显著提高。
赵文悦杨景邵怡岚李佳璇姜艳平崔文王晓娜唐丽杰
关键词:罗伊氏乳杆菌抑菌活性
一种分泌表达乳铁蛋白抑菌肽的毕赤酵母及其应用
本发明公开了一种分泌表达乳铁蛋白抑菌肽的毕赤酵母及其应用,属于生物技术领域。本发明基于乳铁蛋白抑菌肽具有较强的抑菌性,但其在微生物细胞中的异源表达比较困难的问题,首先构建了能够成功表达乳铁蛋白抑菌肽的重组毕赤酵母...
张广华刘思国张雷孙海林赵东葵阮月敏
一种高效分泌表达乳铁蛋白抑菌肽的毕赤酵母及其构建和应用
本发明公开了一种高效分泌表达乳铁蛋白抑菌肽的毕赤酵母及其构建和应用,属于生物技术领域。本发明通过新型杂合信号肽构建了能够高效表达乳铁蛋白抑菌肽的重组毕赤酵母菌株X‑33‑UTH1‑α‑LFcinB,摇瓶发酵产量为2...
吕雪芹刘龙陈坚堵国成李江华刘延峰张予婷
乳铁蛋白对幽门螺杆菌根除作用的实验研究
2024年
目的从体外和动物实验评价乳铁蛋白(bovine lactoferrin,bLF)对H.pylori的作用。方法将bLF分别与H.pylori标准菌株及临床耐药菌株共培养,记录bLF对H.pylori的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)值。构建H.pylori感染小鼠模型,评价加用bLF治疗后小鼠H.pylori根除情况及胃黏膜损伤程度、炎症因子及细胞间紧密连接蛋白变化情况。结果在bLF为1.5 g/L的浓度下能够抑制H.pylori标准菌株的生长,同时bLF在该浓度下能与抗生素协同抑制H.pylori耐药菌株生长;bLF能够减轻H.pylori感染小鼠胃黏膜炎症损伤程度,能够降低炎症因子TNF-α的水平,减少紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的破坏。结论bLF具有一定的抗H.pylori作用,改善H.pylori造成的胃黏膜炎症程度,对胃黏膜细胞间紧密连接具有保护性作用。
葛超毅董锦沛胡伏莲张继新李江
关键词:牛乳铁蛋白幽门螺杆菌胃炎
糖基化修饰对乳铁蛋白结构和功能特性的影响研究
活性蛋白质因具有良好的生物活性、生物相容性以及多种生理功能,常以营养添加剂应用于食品工业,增强产品的营养价值和功能性,如提供活性肽段和必需氨基酸等营养物质。此外,部分活性蛋白在医药领域还有着重要的药理学应用,如药物载体等...
罗洲
关键词:牛乳铁蛋白功能特性热稳定性
乳铁蛋白功能片段在大肠埃希菌中的表达及其抑菌活性验证
2024年
以pET-30a和pEGX为出发载体,构建乳铁蛋白功能片段(BlfFf)基因工程表达的非融合性表达质粒(pET-BlfFf)和融合性表达质粒(pEGX-BlfFf),并在大肠埃希菌BL21中诱导了蛋白表达。SDS-PAGE分析结果表明,pET-BlfFf表达的目标蛋白主要以包涵体形式存在,而pEGX-BlfFf表达的目标蛋白则可大量溶于细胞破碎上清液中,说明后者更适合表达可溶性目标蛋白。pEGX-BlfFf诱导表达产物经GST标签填料柱亲和层析纯化后,可制备出可溶性融合蛋白GST-BlfFf,其产量约为60 mg/L。该蛋白经凝血酶去除GST标签,获得纯化的目标肽。BlfFf的生物活性试验结果表明,经过胃蛋白酶水解后的多肽对金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌均具有抗菌活性。
戴珊赵燕刘芬滕慧张学文
关键词:蛋白纯化抑菌活性
胶原蛋白肽-乳铁蛋白肽融合蛋白、基因及其表达方法
本发明公开了一株分泌表达胶原蛋白肽‑乳铁蛋白肽融合蛋白的重组巴斯德毕赤酵母菌株,编码该所述的胶原蛋白肽‑乳铁蛋白肽融合蛋白的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示,氨基酸序列如SEC ID NO.6所示。通过构建融合...
魏春刘春刘心雨刘辰龙阮柯钦

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许宁
作品数:17被引量:66H指数:6
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研究主题:牛乳铁蛋白 高效液相色谱法 高效毛细管电泳法 高效毛细管 毛细管区带电泳
朱婉萍
作品数:124被引量:459H指数:12
供职机构:浙江省立同德医院
研究主题:红豆杉 牛乳铁蛋白 烯醇 新药筛选 挥发油
冯兴军
作品数:64被引量:197H指数:7
供职机构:东北农业大学
研究主题:抗菌肽 牛乳铁蛋白 LACTOFERRICIN 生物学功能 抑菌活性
林祥梅
作品数:413被引量:996H指数:16
供职机构:中国检验检疫科学研究院
研究主题:单克隆抗体 引物 非洲猪瘟病毒 试剂盒 荧光PCR
刘晓飞
作品数:67被引量:85H指数:5
供职机构:中国检验检疫科学研究院
研究主题:非洲猪瘟病毒 单克隆抗体 风险评估 试剂盒 转基因牛