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猪传染性胃肠炎病毒: 猪传染性胃肠炎(TGE)是由猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroen—teritis virus of swine，TFGEV)引起的一种以严重腹泻、呕吐和脱水为临床特征的高度接触性传染病。不同日...; 黄宝钦叶财旺; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒临床症状; 文献传递

一种猪流行性腹泻病毒、猪A群轮状病毒和猪传染性胃肠炎病毒的多重PCR检测核酸组合物及检测产品: 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒、猪A群轮状病毒和猪传染性胃肠炎病毒的多重PCR检测核酸组合物及检测产品，涉及猪病原体检测技术领域。检测核酸组合物其包括：如SEQ ID NO.1‑2所示的用于检测猪流行性腹泻病毒的第一核...; 高楠吴春梅王鹏云刘波涛高方鸣王保曼

猪传染性胃肠炎病毒分子检测方法研究进展: 2024年; 猪传染性胃肠炎是由猪传染性胃肠炎病毒引起的一种高度接触性肠道传染病,给全球养猪业造成了重大损失。精准检测传染性胃肠炎病毒对科学防控猪传染性胃肠炎具有重要的理论及现实意义。鉴于此,作者综述了近10年来猪传染性胃肠炎病毒分子检测方法的研究进展,主要包括免疫学检测技术(酶联免疫吸附试验、免疫荧光方法、免疫酶组织化学法、免疫传感器系统)、基于逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)的检测技术(常规RT-PCR、巢式RT-PCR、多重RT-PCR、荧光RT-PCR、多重荧光RT-PCR、纳米PCR)、核酸等温扩增技术(环介导等温扩增、重组酶聚合酶扩增、重组酶介导核酸等温扩增、恒温隔绝式RT-PCR)、芯片检测技术(液相芯片检测方法、多重液相芯片方法、cDNA芯片)等。此外,对这些方法的优缺点和传染性胃肠炎病毒分子检测方法未来发展方向进行了展望,以期为猪传染性胃肠炎的早期诊断和科学防控提供参考依据。; 申秋平黄子惠王冉刘晓明庄林林; 关键词：传染性胃肠炎病毒免疫学芯片技术

参与猪传染性胃肠炎病毒感染的靶点及其应用: 本发明公开了一类参与猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）感染的靶点及其应用，利用猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库技术，高通量筛选参与TGEV感染作用的靶点。实验证明，利用CRISPR/Cas9技术敲除候选靶点，能显著抑...; 彭贵青孙丽蒙赵书红谢胜松赵长志付亚楠付贞张金福李新云苏哲琳周媛项怡馨

参与猪传染性胃肠炎病毒感染的靶点LPP及其应用: 本发明是申请号为202111168854.7，发明名称为“参与猪传染性胃肠炎病毒感染的靶点及其应用”的中国发明的分案申请。本发明利用猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库技术高通量筛选出参与猪传染性胃肠炎病毒TGEV感...; 彭贵青孙丽蒙赵书红谢胜松赵长志付亚楠付贞张金福李新云苏哲琳周媛项怡馨

参与猪传染性胃肠炎病毒感染的靶点BARHL2及其应用: 本发明是申请号为202111168854.7，发明名称为“参与猪传染性胃肠炎病毒感染的靶点及其应用”的中国发明的分案申请。本发明利用猪全基因组CRISPR/Cas9敲除文库技术高通量筛选出参与猪传染性胃肠炎病毒TGEV感...; 彭贵青孙丽蒙赵书红谢胜松赵长志付亚楠付贞张金福李新云苏哲琳周媛项怡馨

猪传染性胃肠炎病毒RT-CPA检测方法构建及初步应用: 2024年; 为开发一种猪传染性胃肠炎病毒(Transmissible gastroenteritis virus,TGEV)RT-CPA快速且准确的检测方法。本试验根据TGEV S基因的D序列,设计了3对引物,使用构建的重组质粒作为标准阳性对照,通过优化筛选条件并应用可视化核酸试纸条,成功建立了一种一步法TGEV RT-CPA检测方法。本实验筛选最优条件为:Mg^(2+)浓度1.0 mmol/L,dNTP浓度0.8 mmol/L,Betaine浓度1.0 mol/L,BstDNA聚合酶浓度8.0 U,反应温度63℃,反应时间60 min,AMV逆转录酶5 U。本研究的扩增产物通过凝胶电泳显示出梯形条带,证明了其对TGEV的特异性检测和重复性良好,灵敏度高达10拷贝/μL。初步应用显示,该方法与TGEV抗原快速检测试剂盒的符合率超过90%,显示了高灵敏度。TGEV RT-CPA方法免去了RNA提取和cDNA合成的步骤,能够完成一步检测,且该方法不需要特殊仪器,适用于现场快速检测TGEV,为快速诊断和防控猪传染性胃肠炎提供了新的技术选择。; 赵子惠陈伯祥王佳成伟伟杨明李元新; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒 S基因

DEAD-box解旋酶21对猪传染性胃肠炎病毒复制的调控作用: 2024年; 旨在探究DEAD-box解旋酶21(DDX21)对猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)复制的调控作用。首先通过蛋白免疫印迹(Western Blot)分析了TGEV感染对DDX21表达的影响;进一步构建了猪DDX21真核表达质粒以及建立稳定敲低DDX21的PK-15细胞系,运用荧光定量PCR(RT-qPCR)、蛋白免疫印迹、间接免疫荧光(IFA)和半数细胞培养物感染量(TCID 50)探究外源过表达DDX21及敲低DDX21对TGEV体外复制的调控作用;构建一系列DDX21截短突变体真核表达质粒,鉴定了DDX21调控TGEV增殖的关键功能域。Western Blot分析显示,在TGEV WH-1株感染早期,PK-15细胞内源性DDX21蛋白的表达水平显著上调;RT-qPCR、Western Blot、IFA和TCID 50试验显示,超表达DDX21可以显著提高TGEV N基因的mRNA水平、N蛋白的表达及病毒滴度,且呈剂量依赖性,其601-784 aa区域是其影响TGEV复制的关键;与阴性对照相比,在相应DDX21敲低细胞系中TGEV的增殖显著被抑制,而回补试验逆转了DDX21敲低细胞系中TGEV的滴度。该研究首次揭示了猪DDX21对TGEV增殖的促进作用并鉴定了其调控TGEV复制的关键结构域,为今后研究DDX21蛋白的功能及TGEV的致病机理提供了理论依据。; 谢立兰尹杰黄冬蛾李么明; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒宿主蛋白病毒复制

猪传染性胃肠炎病毒S基因RAA检测方法的建立与初步应用: 2024年; 本研究旨在建立一种基于猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)S基因便捷、高效和特异的由重组酶介导的核酸等温扩增(recombinase-aid amplification,RAA)检测方法。通过基因组序列比对,选择TGEV S基因中特定片段为检测靶标,构建重组质粒pUC57-S,设计并筛选RAA引物和探针;建立RAA检测方法;评价该方法灵敏度、特异性和重复性;运用该方法检测腹泻临床样品,与荧光定量PCR方法比较检测结果的符合率。结果确定最佳引物对F2/R1和探针PF2;该方法在40℃恒温条件下,30 min即可完成反应;荧光型RAA法最低检出限可达1.34×10^(1)copies·μL^(-1);与猪流行性腹泻病毒、猪丁型冠状病毒、猪呼吸道冠状病毒等常见猪源病毒核酸无交叉反应;采用该方法检测107份临床样本,阳性率为5.61%(6/107),与荧光定量PCR法相比较,检测结果一致。本研究成功建立了一种灵敏、特异、可视化的RAA检测方法,可摆脱对昂贵设备、专业人员和检测技术的依赖,为临床检测TGEV提供良好的技术基础。; 吕林丹牟豪胡霞刘明妮李绍梅李星宋振辉杨柳; 关键词：猪传染性胃肠炎病毒

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