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精原干细胞命运调控的研究进展被引量：1: 2024年; 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)是体内一类特殊的成体干细胞,它的自我更新和分化平衡决定着雄(男)性持续一生的精子发生过程,是遗传信息在物种间世代稳定传递的基础。半个世纪以来,对SSCs的识别、培养、移植和命运调控相关分子机制的研究极大拓展了人们对其生物学特性的认知。该综述将介绍SSCs研究的相关历史、重要里程、进展和依然面临的瓶颈问题,以期为生育力拯救、干细胞基因改造、濒危动物多样性保护、畜牧业生产等研究和应用提供参考。; 朱立发孙嘉辰吴鑫; 关键词：精原干细胞男性生育力 RNA结合蛋白

腹腔注射白消安对精原干细胞代谢特征的影响: 2024年; 目的通过构建白消安处理的小鼠模型,探讨其对小鼠睾丸精原干细胞(SSCs)代谢的影响。方法采用8周龄C57BL/6J雄性小鼠,腹腔注射10 mg/kg白消安,于第0天、第5天和第10天取材,并通过免疫磁珠法分选出Thy1阳性细胞。随后对这些细胞进行了纯度鉴定和代谢组学分析。结果实验发现白消安处理能明显降低小鼠睾丸质量(P<0.05),并损伤睾丸的组织结构。基于主成分分析(PCA)和偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)模型显示,处理0 d、5 d和10 d的样本组间存在显著的代谢差异。共筛选鉴定出89种差异代谢物,包括谷胱甘肽(GSH)、牛磺酸、精氨酸、必需氨基酸(EAAs)和不饱和脂肪酸(UFAs)等,其重要相关代谢途径涉及甘油磷脂代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等。结论白消安通过影响特定的代谢途径,产生明显的生殖毒性效应,导致小鼠睾丸质量下降和组织结构损伤。代谢组学分析其潜在的生殖毒性机制可能与脂质代谢、精氨酸和脯氨酸代谢等代谢通路有关。; 余志鑫邙新雨邹定峰缪时英宋伟李凯; 关键词：白消安生殖毒性代谢组学精原干细胞

不同月龄波尔山羊睾丸中精原干细胞活性及增殖特征研究: 2024年; [目的]探究不同月龄波尔山羊睾丸中精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)在体外培养过程中的活性及增殖特征。[方法]分别采集1、3、5、58月龄的波尔山羊睾丸,通过组织学方法分别观察不同月龄波尔山羊睾丸的发育情况;分别收集不同月龄波尔山羊睾丸组织,利用三步酶消化法分离成单细胞,通过台盼蓝染色观察睾丸消化细胞总数和死亡细胞数;采用0.2%明胶富集差速贴壁法纯化SSCs并培养10 d,通过流式细胞术鉴定细胞悬液纯化前、纯化后及培养10 d后的Thy-1阳性(Thy-1+)细胞数;将纯化的SSCs培养10 d后,采用碱性磷酸酶染色鉴定SSCs克隆,分别计算不同月龄波尔山羊睾丸SSCs形成的克隆数和克隆面积。[结果]睾丸组织学观察发现1月龄波尔山羊曲细精管管腔生殖细胞数量最少,随着波尔山羊月龄的增加,逐渐发育出各级生殖细胞,但58月龄波尔山羊睾丸生精上皮明显退化。不同月龄波尔山羊睾丸组织经过三步酶消化,在纯化前及纯化后获得的睾丸细胞总数以5月龄波尔山羊最高,显著(P<0.05)高于1月龄波尔山羊;不同月龄波尔山羊纯化前及纯化后的睾丸细胞存活率之间均无显著(P>0.05)差异。在纯化前、纯化后的睾丸组织细胞以及培养10 d的纯化SSCs中,Thy-1+细胞数占睾丸细胞总数的比例均以1月龄波尔山羊最高,显著(P<0.05)高于其他月龄波尔山羊。培养10 d后,不同月龄波尔山羊睾丸来源的SSCs克隆均表现为碱性磷酸酶阳性,1月龄波尔山羊睾丸SSCs形成的平均克隆数显著(P<0.05)高于其他月龄波尔山羊,不同月龄波尔山羊的SSCs平均克隆面积无显著(P>0.05)差异。[结论]5月龄波尔山羊睾丸中细胞总数最多,1月龄波尔山羊睾丸中细胞总数最少,但SSCs活性和增殖效率最高。; 胡凯杨瑾芸杨敏张金龙范彩云朱冰玉程建波王菊花; 关键词：波尔山羊睾丸精原干细胞活性增殖

精原干细胞自我更新及分化的调控机制研究进展: 2024年; 精原干细胞(SSC)是睾丸中最原始的生殖细胞,通过自我更新和连续分化最终成为成熟的精子,SSC对维持高效的精子发生起着至关重要的作用,与生精微环境(niche)之间复杂的分子和细胞相互作用构成了精子发生的基础。以往认为niche主要由睾丸支持细胞构成,而新近研究表明,睾丸内多种细胞、分子信号通路均参与调控SSC的自我更新及分化。本文就睾丸生精微环境调控SSC自我更新及分化的研究进展进行综述。; 潘瑜李文鑫张韫超荆涛; 关键词：细胞自我更新细胞分化精子发生

EGFR抑制剂在提高精原干细胞重编程效率中的应用: 本发明属于干细胞生物学及细胞重编程领域，具体涉及EGFR抑制剂在提高精原干细胞重编程效率中的应用。本发明还提供了一种组合物，包含EGFR抑制剂、维生素C、SGC707、牛磺熊去氧胆酸；所述EGFR抑制剂为瑞香素和表没食子...; 赵小阳汪妹许言文陈雨寒

将精原干细胞直接转分化为神经干细胞样细胞的方法: 本发明提供了一种将精原干细胞(SSCs)直接转分化为神经干细胞样细胞(iNSCs)的方法。所述iNSCs具有增殖活性，可以在体外进行稳定的传代培养，并且具有向其他神经细胞如神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜能。本...; 吴际方乾

体外诱导人多能干细胞分化为精原干细胞样细胞的方法: 本发明涉及一种体外诱导人多能干细胞分化为精原干细胞样细胞的方法，包括以下步骤：S1、将人多能干细胞铺在基底胶包被的培养皿中，加入mTeSR培养基培养至细胞汇合度为80％‑90％；S2、将mTeSR培养基更换为SSCLC诱...; 李红钢王晓烔屈梦园

共培养法分离培养不同遗传背景的小鼠精原干细胞: 2023年; 目的建立一种简便、高效的小鼠精原干细胞(mouse spermatogonial stem cell, mSSC)分离、培养方法。方法选取昆明小鼠和C57BL/6小鼠的雄性幼鼠睾丸,通过机械分离和酶消化相结合的方法获得细胞悬液,随后将含有mSSC和支持细胞以及其它细胞的混合悬液以合适的密度接种至培养皿中共同培养,待mSSC形成克隆,但支持细胞还未进入大量增值期时,将mSSC移至饲养层细胞中扩大培养,最后通过特异性分子标志物检测和诱导分化等实验对分离的mSSC进行鉴定。结果通过将mSSC和支持细胞共同培养的方法建立了mSSC体外分离培养的共培养法,该方法从昆明小鼠和C57BL/6小鼠两种不同遗传背景的幼鼠睾丸中成功分离mSSC。RT-PCR实验结果表明,本研究分离培养的mSSC表达mSSC的特异性分子标志物Plzf、Gfrα-1和Ngn3,使用维甲酸(retinoic acid, RA)诱导后可观察到精子样细胞的出现,使用流式细胞术进行倍体分析表明,诱导后的细胞中有9.52%为单倍体,而未诱导的细胞中检测不到单倍体细胞存在。RT-PCR实验结果表明,诱导后mSSC开始表达精原干细胞分化相关基因Acrosin、Th2b和Sycp3。结论本研究建立了一种适合不同遗传背景mSSC的体外分离、培养方法,该方法既简化了分离步骤,又节约了培养成本,为广泛开展mSSC的研究提供了条件。; 范翠花邱东飚邱东飚张朵; 关键词：精原干细胞细胞培养技术分子标志物

BLOC1S1促进山羊精原干细胞增殖被引量：1: 2023年; 随着基因编辑技术迅速发展,研究精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)对精子发生及其调控机制研究、转基因动物研发、基因治疗和不孕不育症的治疗以及珍稀物种的保护均具有重要意义。溶酶体相关细胞器生物合成复合体1亚基1(biogenesis of lysosome-related organelles complex 1subunit 1,BLOC1S1)具有抗布鲁氏菌的潜能,研究BLOC1S1对山羊SSCs的影响不仅能探究BLOC1S1促进SSCs增殖的能力,还能为其抗病育种研究提供细胞学基础。本研究通过同源重组构建BLOC1S1过表达载体,通过慢病毒包装、转染与嘌呤霉素筛选成功构建了山羊精原干细胞BLOC1S1过表达细胞株。通过实时荧光定量PCR(real time quantitative PCR,RT-qPCR)检测BLOC1S1的过表达效率为18倍,同时细胞生长曲线、流式细胞术检测细胞周期、5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)染色等实验结果表明,BLOC1S1能显著增加山羊SSCs的增殖活性。RT-qPCR、免疫荧光染色、Western blotting结果显示与增殖相关的基因(PCNA、CDK2、CCND1)上调,同时调控精原干细胞增殖的关键基因EIF2S3Y的表达量也上调。本研究成功构建了山羊精原干细胞BLOC1S1过表达细胞株,提高其增殖能力,并且这种促增殖能力可能是通过EIF2S3Y/ERK通路实现的。本研究为探究BLOC1S1对山羊精原干细胞的调控作用奠定了细胞学基础,并为进一步研究BLOC1S1的生物学功能提供细胞平台,为繁育BLOC1S1修饰抗病山羊奠定了基础。; 万仕成张梦菲陈文博韩苗杨栋慧王聪亮吴文萍王瑜琪李娜朱海鲸Ahmed Hamed Arisha华进联; 关键词：山羊精原干细胞增殖

淫羊藿次苷I通过Akt信号通路上调Bmi1促进小鼠精原干细胞增殖被引量：1: 2023年; 目的:探究淫羊藿次苷I对小鼠精原干细胞增殖的促进作用及相关机制.方法:使用MTT实验、EdU细胞增殖实验检测淫羊藿次苷I对小鼠精原干细胞增殖能力的影响;Western blot法检测淫羊藿次苷I对Bmi1、p-Akt和Akt蛋白的表达情况;RT-PCR实验检测相关基因的表达结果,最后通过抑制剂和siRNA证明p-Akt和Bmi1蛋白之间存在上下游的调控关系.结果:与对照组相比,0.5-1μM淫羊藿次苷I促进小鼠精原干细胞增殖(P<0.05);相比于对照组,0.5-1μM淫羊藿次苷I处理组p-Akt和Bmi1蛋白表达水平上升(P<0.05);Akt抑制剂下调p-Akt和Bmi蛋白水平(P<0.05);siBmi1对Akt mRNA水平无显著影响(P>0.05).结论:淫羊藿次苷I激活Akt信号通路上调Bmi1表达促进小鼠精原干细胞增殖.; 廖天龙楚雪桐杨小平; 关键词：小鼠精原干细胞 BMI1 细胞增殖

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