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MiRNA-126硬脂胺阳离子脂质体递送系统的构建及细胞摄取考察
2024年
目的基于阳离子脂质体制备血管细胞黏附分子-1(VCAM-1)单克隆抗体(VCAM-1 mAb)修饰的负载微小RNA-126(miR-126)的靶向递送系统,并初步评价其稳定性、细胞毒性及细胞摄取。方法采用薄膜分散-挤出法制备硬脂胺阳离子脂质体(SCL),以脂质体粒径、电位为指标,单因素法考察大豆磷脂与胆固醇质量比、硬脂胺用量、无水乙醇的用量、成膜温度、水合介质用量、水合制备温度、水合制备时间;并考察其稀释稳定性及储存稳定性。采用琼脂糖凝胶阻滞实验考察SCL对miR-126的负载能力及对酶解的保护效果。利用1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(EDC)/N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)交联法制备VCAM-1 mAb修饰的SCL(Va-SCL),并通过SDS-PAGE法考察VCAM-1 mAb与SCL的耦连效率。MTT法考察其对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的毒性,流式细胞术和荧光显微镜考察正常HUVECs及LPS(1μg·mL^(-1))刺激后HUVECs对miR-126、SCL/miR-126、Va-SCL/miR-126的摄取情况。结果精密称量大豆磷脂120mg、胆固醇40mg、硬脂胺10 mg于茄形瓶中,加入5 mL无水乙醇,50℃超声(功率300 W、频率40 kHz)使其充分溶解,肉眼观察无可见颗粒物或者不溶物,水浴减压蒸发除去有机溶剂,在瓶壁上形成均匀透明的脂质薄膜;加入12 mL DEPC水作为水合介质,水浴超声30 min,挤出器过孔径为200 nm聚碳酸酯膜7次,取续滤液,得SCL,稳定性良好。当氮磷比为10∶1时,SCL能够有效负载miR-126;miR-126通过静电吸附于SCL表面,SCL一定程度上保护miR-126不被酶解。SDS-PAGE结果显示,VCAM-1mAb与SCL成功偶联,接枝率为(53.2±7.6)%。MTT结果显示,Va-SCL、Va-SCL/miR-126对HUVECs的半数抑制浓度(IC_(50))值分别为17.38、71.61 nmol·L^(-1),SCL、SCL/miR-126的IC_(50)值分别为81.03、97.79 nmol·L^(-1)。荧光显微镜及流式结果均显示Va-SCL/miR-126的细胞摄取效果更为明显。结论成功制备了Va-SCL/miR-126,能明显增加miR-126的细胞摄取
唐永瑜邰诗蝶吴兴杰陈英冯发进沈祥春邹弢陶玲
关键词:阳离子脂质体MIR-126薄膜分散法
细胞外囊泡的靶细胞摄取机制及其在疾病诊疗中的应用
2024年
细胞外囊泡(EVs)是细胞分泌的纳米级小囊泡,在细胞间通讯中发挥重要作用。它们通过配体-受体结合、内吞作用、膜融合的方式被靶细胞摄取,从而执行生物学功能。在疾病诊断方面,EVs的组分可作为疾病诊断中的生物标志物,能够揭示其起源细胞的病理变化。在疾病治疗方面,EVs具有靶向递送的潜力,不仅可以作为疫苗开发的平台,还能被设计成药物递送系统,将药物直接运送到特定的细胞或组织。此外,EVs本身也可作为治疗剂用于自身免疫性疾病和癌症的治疗。本文总结EVs的生成过程和它们的摄取机制,同时探讨EVs在疾病诊断和治疗领域的最新研究进展。
黄宁宁齐莉莉王进波王梦婷吴玉琴
关键词:疾病诊断疾病治疗
ARNATAR化合物和用于增强细胞摄取的方法
本发明一般性涉及用于增强细胞摄取的化合物和方法的领域。具体地,本发明涉及N‑乙酰半乳糖胺化合物及其缀合物。还提供了用于制备这些分子的方法及其可能的用途,特别是在医药中的用途。
D·斯坦纳 王彦峰 梁雪海
作为双膦酸盐的载体的具有增强的细胞摄取的经卵磷脂改性的磷酸钙纳米颗粒的制剂及其制备方法
磷酸钙、优选地羟基磷灰石的纳米颗粒的制剂,所述纳米颗粒用卵磷脂、优选地磷脂酰胆碱改性,所述制剂具有增强的细胞摄取并且是双膦酸盐的载体,其特征在于,双膦酸盐选自被批准用于医疗用途的双膦酸盐药物的组,该组包括阿仑膦酸盐和唑来...
米哈乌·沃贾辛斯基乔兰塔·切尔斯卡-杜扎克乔安娜·拉托查阿图尔·马沃莱普西托马什·凯驰
基于“细胞摄取-配体垂钓”技术探讨黄柏“酒制升提”的炮制作用机制
赵佳慧
H/J-聚集体虾青素纳米制剂的制备、细胞摄取及抗氧化活性研究
谢世英
功能化氧化石墨烯/miRNA-20a促进成骨分化作用和细胞摄取机制的初步研究
纪玉洁
低强度超声促进细胞摄取外泌体的方法
本发明公开了低强度超声促进细胞摄取外泌体的方法,属于生物医学应用领域。本发明首次提出通过对体外细胞或活体动物施加一定的低强度超声,可以促进其靶细胞或组织对外泌体的摄取。通过低强度超声作用促进靶区细胞摄取外泌体,操作简单且...
燕雨蝶高培蓉谢木云孔亚菲张震
一种增强外泌体的细胞摄取效率的方法及应用
本发明提供了一种增强外泌体的细胞摄取效率的方法及应用,将溶血磷脂分子插入外泌体的脂质双分子中,对外泌体的膜脂质进行修饰。通过外泌体膜脂质构成的改变,可以提高外泌体的肿瘤细胞摄取效率。该溶血磷脂修饰的外泌体与天然外泌体相比...
原续波战琦康春生赵瑾侯信
一种预测纳米粒粒径对细胞摄取效率的综合性方法
本发明涉及一种预测纳米粒粒径对细胞摄取效率的综合性方法,制备不同粒径的磁纳米粒,获得磁流体,以FITC标记磁纳米粒并表征,对于培养后的细胞,以不同的磁纳米粒进行不同的摄取效率检测,以DPD模拟方法模拟不同粒径纳米粒的胞吞...
严琴英张志文杨根生翁嘉绮赵鑫溱

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胡富强
作品数:209被引量:275H指数:9
供职机构:浙江大学
研究主题:嫁接 壳寡糖 硬脂酸 固体脂质纳米粒 壳聚糖
袁弘
作品数:210被引量:398H指数:12
供职机构:浙江大学
研究主题:嫁接 硬脂酸 壳寡糖 固体脂质纳米粒 壳聚糖
杜永忠
作品数:142被引量:76H指数:4
供职机构:浙江大学
研究主题:嫁接 壳寡糖 硬脂酸 胶团 分子靶标
孙进
作品数:334被引量:729H指数:15
供职机构:沈阳药科大学
研究主题:前药 药物传递 药剂学 纳米粒 光敏剂
梁文权
作品数:263被引量:943H指数:15
供职机构:浙江大学药学院
研究主题:脂质体 离子导入 经皮渗透 透皮 经皮给药