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澳洲棉细菌人工染色体文库构建: 2020年; 携带大片段基因组DNA的细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)文库是进行基因组结构与功能等相关研究的重要基因组资源。澳洲棉是二倍体野生棉,具有抗或耐棉蚜、抗黄萎病、抗干旱、增加衣分率、提高纤维成熟度的潜力,种子无腺体或植株有腺体等许多优良性状。本研究是在现有的野生棉二倍体和四倍体棉BAC文库基础上,以二倍体野生棉种澳洲棉为实验材料,提取澳洲棉幼嫩叶的DNA,经过HindⅢ酶切片段化,克隆到pSMART BAC (HindⅢ)载体,构建了澳洲棉的基因组细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome, BAC)文库。该文库总共包含16 128个克隆(42个384孔板),平均插入的片段为120 kb,基因组覆盖率约1.06倍。澳洲棉BAC文库的构建将为棉属野生种质资源的保存与利用积累重要基因组资源。; 刘玉玲刘林杰王聪韦洋洋彭仁海; 关键词：野生棉 BAC文库

雷蒙德氏棉细菌人工染色体文库的构建: 2016年; 细菌人工染色体(bacterial artificial chromosome,BAC)文库是开展基因组测序、基因图位克隆、分子标记开发、物理作图等研究的重要基因组资源。本研究以二倍体野生棉雷蒙德氏棉(G.raimondii,D5)为材料,从成株期暗培养的黄化幼嫩叶片中得到纯净、完整和高质量的基因组DNA。经脉冲场凝胶电泳检测,所提取基因组DNA大于700 kb。经酶切、片段选择、连接转化,构建了雷蒙德氏棉的基因组BAC文库,文库共包含26 880个克隆,平均插入片段为127 kb,覆盖该棉种全基因组的3.7倍左右,克隆空载率小于5%。该文库的构建,为雷蒙德氏棉基因组物理图谱的构建、功能基因的定位与克隆、以及比较基因组研究提供了重要的基因组资源。; 武亚磊王玉红刘玉玲王春英蔡小彦王星星周忠丽王坤波刘方彭仁海; 关键词：细菌人工染色体文库野生棉

马铃薯栽培品种‘合作88’细菌人工染色体文库的构建与评价被引量：2: 2015年; 以四倍体马铃薯栽培品种‘合作88’培养12~15 d苗龄的幼嫩叶片为试材,提取高分子量基因组DNA,利用限制性内切酶HindⅢ部分酶切后回收100~300 kb片段,连接到载体Copy ControlTM p CC1BACTM的HindⅢ位点上,构建了细菌人工染色体(BAC)文库。该文库约由850 000个克隆组成,空载率约2.08%,保存在1 700个混合池中,克隆插入片段平均大小约为90 kb,覆盖单倍型马铃薯基因组约85倍。随机挑取6个BAC克隆连续培养5 d,提取DNA进行HindⅢ完全酶切检测,确认不同培养时间的BAC克隆的指纹图谱完全一致,表明文库较好的稳定性。BAC文库的构建为马铃薯重要农艺性状基因克隆、基因组测序以及比较基因组研究等奠定了基础。; 杨煜杨晓慧李灿辉郭晓单伟伟马伟清黄三文李广存; 关键词：马铃薯细菌人工染色体文库抗病性

石麦15细菌人工染色体文库构建与鉴定被引量：2: 2014年; 为给小麦功能基因研究提供参考信息,以冬小麦栽培品种石麦15（Triticum aestivum L.）为试材,从暗培养7~10d的黄化幼苗地上部提取高分子量基因组DNA,使用载体pCC1BAC的HindⅢ位点构建了六倍体小麦细菌人工染色体文库。该文库由1 000 000个以上克隆组成,保存在1 020个混合池中,克隆插入片段平均大小为85kb,空载率为2.5%;覆盖小麦基因组5倍以上;挑取7个克隆培养5d后,经HindⅢ完全酶切检测,其指纹图谱稳定一致。石麦15细菌人工染色体文库的构建为小麦基因克隆、调控序列克隆以及比较基因组学研究奠定了基础。; 李孟军杨煜高欣娜郭晓何明琦史占良郭进考; 关键词：小麦细菌人工染色体文库稳定性

甘蓝基因组细菌人工染色体文库的构建被引量：1: 2014年; 细菌人工染色体(BAC)文库是克隆甘蓝抗病优质重要基因的基础,以抗枯萎病、富含硫代葡萄糖苷的结球甘蓝自交系R4P1为材料,美国Epicentre公司的CopyControlTMpCC1BACTM为载体,构建了甘蓝细菌人工染色体文库。该文库有73 344个克隆,插入片段平均大小约97 kb,空载率<3%,覆盖甘蓝基因组约10.9倍,筛选到甘蓝任一基因的概率为99.99%,这些结果表明,构建的文库质量较好,可用于后续分析。构建的甘蓝BAC文库不仅可用于枯萎病基因的克隆,而且为克隆其他重要的功能基因及基因组学等的研究奠定了基础。; 邢苗苗田多成李海龙姚丽君冀瑞琴康俊根; 关键词：甘蓝细菌人工染色体文库克隆

羊巴贝斯虫细菌人工染色体文库构建及物理图谱绘制: 巴贝斯虫病是一种蜱传性血液原虫病,广泛分布于温带、亚热带以及热带地区,对全世界养殖业造成巨大的危害。鉴于巴贝斯虫对畜牧业发展的重大影响,自上个世纪中期,科学家就针对巴贝斯虫的致病机理、病原入侵宿主细胞机制及防治技术和策略...; 张浩浩; 关键词：基因组细菌人工染色体文库物理图谱

棉花细菌人工染色体文库的构建与研究: 本书主要内容包括：杂交棉生产与发展概况、陆地棉18R核基因组BAC文库的构建、陆地棉18R核基因组BAC文库构建的技术要点等。; 郭红媛著; 关键词：棉花作物育种抗虫性

棉花细菌人工染色体文库构建方法探讨: 2013年; 细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库是开展基因组测序、基因图位克隆、分子标记、物理作图等研究的重要基因组资源。本文在构建了二倍体野生棉阿非利加棉(Gossypium herbaceum var.africanum)BAC文库的基础上,就棉花细菌人工染色体基因组文库构建过程中高分子量基因组DNA的提取、部分酶切片段选择、DNA的回收、连接转化以及BAC文库的保存等过程中一些细节和注意事项进行了比较详细的分析比较,希望能为棉花BAC文库的构建提供一些可供借鉴的经验。; 高海燕王省芬刘方彭仁海张艳马峙英王坤波; 关键词：细菌人工染色体文库野生棉

稻曲病菌UV-2菌株细菌人工染色体文库构建及分析被引量：5: 2013年; 【目的】稻曲病(Rice false smut)是由稻曲病菌[Villosiclava virens(Cooke)Tak.]引起的严重危害水稻的真菌病害。构建稻曲病菌UV-2的大片段DNA细菌人工染色体(Bacterial artificial chromosome,BAC)文库,为致病相关基因的鉴定及在图位克隆、比较基因组学等方面的研究奠定基础。【方法】以幼嫩菌丝为材料制备大分子基因组DNA包埋块,用Hind III部分酶解后经脉冲凝胶电泳筛选,回收大片段DNA并与pIndigoBAC536-S载体连接,连接产物转化大肠杆菌菌株DH10B T1 Phage-Resistant细胞后进行蓝白斑筛选,白色菌落捡入384孔板置于80°C低温保存。【结果】成功构建UV-2菌株的高质量、高覆盖度的BAC文库,该文库共含10 368个克隆,平均插入片段为124.4 kb,空载率小于1%,约覆盖该菌基因组的36.8倍。【结论】克服了真菌大分子基因组DNA制备难控制的技术难题,建立了首个稻曲病菌的BAC文库。该文库已作为一种公共基因组资源向研究者开放(http://GResource.hzau.edu.cn)。; 刘庆丽王晓明王革娇罗朝喜谭新球罗美中; 关键词：细菌人工染色体稻曲病稻曲病菌

阿非利加棉细菌人工染色体文库的构建: 阿非利加棉(Gossypium herbaceum var. africanum)是二倍体两个栽培种(草棉G. herbaceum和亚洲棉G. arboreum)唯一的野生类型，是四倍体棉种A亚组的供体种，既有栽培棉的纤...; 高海燕; 关键词：野生棉细菌人工染色体文库 SSR分子标记抗黄萎病; 文献传递

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