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- 肠出血性大肠杆菌O157
- 肠出血性大肠杆菌O157是牛肠中的大肠杆菌，用携带O157的牛肉做菜时，手上也会残留O157。如果蔬菜和其他食物被这只手接触到，同样会附着上O157。小朋友很可能在不知不觉中吃下这些食物，引发疾病。本书主要讲解了肠出血性...
- （日）冈田晴惠文
- 关键词：大肠杆菌
- 食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7的检测技术研究进展被引量：4
- 2024年
- 近年来,因食源性致病菌造成的食品中毒正在不断增加,严重威胁了人类的健康,大肠杆菌(E.coli)O157∶H7由于其低感染剂量和高致病性等特点引起了研究人员和世界卫生组织的高度重视。因此精准快速的检测食品中的E.coli O157∶H7对食品安全问题有着重要的意义,是预防和控制食源性疾病传播的重要技术,为此本文对E.coli O157∶H7的常规检测方法、免疫学法、分子生物学法和其他方法进行论述,介绍了这些方法的优缺点,对各种方法进行了整体比较,以期为有关工作者在选择检测方法或研发新方法提供参考。
- 周炳武于泽闫兆伦刘雨涵侯嘉欣刘晓倩谢婧宜刘晔
- 关键词：食源性致病菌食品安全
- 表达肠出血性大肠杆菌O157 O-抗原重组减毒沙门菌的构建及其免疫效果评价
- 2024年
- 为构建表达肠出血性大肠杆菌(EHEC)O157 O-抗原的重组减毒鼠伤寒沙门菌,本研究以EHEC O157基因组为模板,采用PCR分3段扩增O157 O-抗原基因簇(galF~gnd),并采用同源重组技术将EHEC O157 O-抗原基因簇与含asd基因的pSL2161线性化片段重组,构建表达EHEC O157 O-抗原的重组质粒pSL2161-O157并经PCR与测序鉴定正确后电转化4基因缺失沙门菌ATCC14028ΔcrpΔcyaΔasdΔrfbP,构建表达EHEC O157 O-抗原的重组减毒沙门菌O157-ATCC14028ΔcrpΔcyaΔasdΔrfbP,经PCR及测序鉴定。采用裂解法粗提野生型鼠伤寒沙门菌ATCC14028、EHEC O157与构建的重组减毒沙门菌种中的脂多糖(LPS),采用western blot鉴定上述3种菌中的LPS与EHEC O157 O-因子血清的反应性,并根据该重组菌与野生菌株ATCC14028的OD600nm值测定二者的体外生长能力。PCR与测序鉴定结果显示,重组减毒沙门菌正确构建。Western blot结果显示,重组减毒沙门菌和野生型EHEC O157的粗提LPS均能够与EHEC O157 O-因子血清反应,出现LPS特异性的梯状条带,ATCC14028株与O157 O-因子血清无反应条带。生长曲线结果显示,重组减毒沙门菌与ATCC14028株的生长速度无明显差异。表明EHEC O157 O-抗原基因簇在4基因缺失沙门菌中获得了表达,且该表达与4基因的缺失均不影响沙门菌的体外生长能力。采用首免-加强免疫策略对ICR小鼠分别口服免疫重组减毒沙门菌和4基因缺失沙门菌,二免后13 d采用间接ELISA检测各组小鼠血清中LPS的IgG抗体水平,利用荧光定量PCR(qPCR)检测各组小鼠脾细胞中细胞因子的转录水平。二免后14 d采用10 LD_(50)的EHEC O157攻毒,15 d内观察并记录各组小鼠的临床症状与死亡率,评估该重组菌株对免疫小鼠的保护效果。ELISA与q PCR结果显示,与阴性对照组和4基因缺失沙门菌免疫组相比,重组减毒沙门菌诱导小鼠产生的针对EHEC O157与ATCC14028 LPS的IgG抗体水平均极显著升高(P<0.001、P<0.01);该组小鼠
- 陈歆丹张晓荟高宇杰王温馨葛同鑫宋厚辉韩月程昌勇
- 关键词：减毒沙门菌O-抗原免疫保护
- 基于分子生物学方法的食品中肠出血性大肠杆菌O157∶H7检测技术研究进展
- 2024年
- 对检测大肠杆菌O157∶H7(E.coli O157∶H7)的预富集技术和聚合酶链式反应(PCR)技术、等温扩增技术、基于成簇规律间隔短回文重复序列及相关蛋白质系统(CRISPR/Cas)的技术等分子生物学方法进行论述,介绍了这些方法在E.coli O157∶H7检测中的研究进展,并对其检出限和靶基因等进行了比较,以期为E.coli O157∶H7的快速检测提供参考依据。
- 孙千雪周炳武王婷蔡琳雅胡珊珊刘晔
- 关键词：食源性致病菌
- 重组酶介导的肠出血性大肠杆菌O157:H7等温扩增方法的建立被引量：4
- 2022年
- 目的:建立新的快速检测常见食源性致病微生物肠出血性大肠杆菌(enterohemorrhagic E.coli,EHEC)O157:H7的方法。方法:根据EHECO157:H7保守区序列,结合重组酶介导的恒温扩增(recombinase-aided amplification,RAA)和荧光定量或胶体金侧向流免疫层析试纸条(lateral flow dipstick,LFD),建立两种EHEC O157:H7检测方法(RAA荧光法和RAA-LFD法)并进行优化,评估这两种方法的灵敏性及特异性。结果:两种检测方法均可在39℃恒温条件下16 min内完成检测,两种方法的检测限均可达1×10~4拷贝数,具有较高的灵敏性。两种方法与其他常见的肠道致病菌(金黄色葡萄球菌、沙门氏杆菌、弯曲菌、耶尔森菌、志贺杆菌)质粒模板无交叉反应,具有良好的特异性。结论:本研究建立的两种检测EHEC O157:H7的方法,检测时间短并具有较好的特异性、灵敏性和重复性,可用于EHEC O157:H7的快速检测。
- 蔡欣王源林赵杰匡衡孙学伟刘宗财崔茜杨展汪茂荣
- 关键词：RAA
- 肉桂精油对肠出血性大肠杆菌O157:H7生长及代谢特征影响的研究
- 植物精油,也叫植物源抗菌保鲜剂,一直被公认为,具有低毒、安全、广谱的抗菌性,主要包括香辛材料和从中草药中提取的物质,在食品中精油可以作为调味剂添加。但是,关于植物精油的具体的抗菌机制,尚不清晰完整,所以,这个问题在很大程...
- 费莹莹
- 关键词：肉桂精油肠出血性大肠杆菌O157:H7抗菌机制代谢组学
- 肉桂精油抑制肠出血性大肠杆菌O157∶H7活性研究被引量：6
- 2022年
- 肠出血性大肠杆菌O157∶H7(Entero{7}emorr{7}agic Esc{7}eric{7}ia coli 157∶H7,EHEC O157)因具有生长繁殖快,污染途径广泛,高染病率和高致病率的特点成为最常见的食源性病菌之一。为探究肉桂精油对EHEC O157细胞膜特性和呼吸代谢的影响。以EHEC O157为研究对象,用不同浓度的的肉桂精油处理,37℃恒温振荡培养。结果显示,肉桂精油对EHEC O157的最小抑菌浓度(minimum in{7}ibitory concentration,MIC)为0.0004 g/L。随精油处理时间的延长,菌液中核酸和蛋白质含量,β-半乳糖苷酶含量均逐渐上升;蛋白质含量,碱性蛋白酶(alkaline protease,AKP)活性逐渐下降;琥珀酸脱氢酶(succinate de{7}ydrogenase,SDH)活性先上升后下降。综上表明,肉桂精油对EHEC O157表现出良好的抑菌性,可以破坏菌体细胞膜,改变细胞膜表面特性,导致细胞膜通透性变大,胞内大分子物质流出,最终影响三羧酸循环。希望该研究为精油抑菌机制向分子层面深入拓展提供有效的理论依据。
- 费莹莹张珍陈雪琴李雯
- 关键词：肉桂精油呼吸代谢抑菌
- 2011—2019年东台市肠出血性大肠杆菌O157:H7宿主粪便检测结果被引量：3
- 2021年
- 目的了解东台市动物宿主、腹泻病人粪便中肠出血性大肠杆菌O157:H7检出情况,为制定预防措施提供科学依据。方法2011—2019年,每年5月、7月、9月,采集肠道门诊腹泻病人粪便样本,并于流行前期(5月)和流行后期(9月)采集牛、羊、鸡、猪粪便样本。采用EC肉汤加新生霉素增菌、免疫磁珠富集法浓缩、科马嘉平板分离,经生化反应和血清学鉴定,使用多重引物PCR方法检测毒力因子。结果2011—2019年,共检测宿主粪便样本5244份,检出阳性样本74份,阳性检出率为1.42%。2012年阳性检出率最高,为6.11%(35/573),不同年份检出率差异有统计学意义(χ^(2)=91.21,P<0.05);5月阳性检出率(2.05%)高于9月(1.26%),差异有统计学意义(χ^(2)=4.05,P<0.05);腹泻病人粪便样本中,阳性检出率为0.13%;动物粪便样本中,阳性检出率为2.43%,以牛最高(4.86%),不同类型动物检出率差异有统计学意义(χ^(2)=43.20,P<0.05)。圈养动物阳性检出率(1.21%)低于散养(4.45%),差异有统计学意义(χ^(2)=30.23,P<0.05)。检测菌株74株,stx1、stx2、eaeA、{7}ly基因携带率分别为0、41.89%、97.30%、97.30%,未检出变种基因。结论东台市仍存在肠出血性大肠杆菌流行的潜在危险,应加强动物粪便管理及健康教育干预力度,保护公众健康。
- 金鑫仲慧郎睿朱莹莹吴银华
- 关键词：肠出血性大肠杆菌O157:H7宿主粪便血清学
- 污水处理系统中一株新型肠出血性大肠杆菌O157噬菌体PE-3的分离及鉴定
- 本发明涉及用于污水处理系统中高致病性肠出血性大肠杆菌O157的防控，属生物工程领域。提供了一株裂解污水处理系统中肠出血性大肠杆菌O157的新型噬菌体，命名为PE‑3(基因序列SEQ ID NO.1，GenBank Acc...
- 刘新春易鑫李娟黄京刘红辉
- 文献传递
- 检测牛奶中肠出血性大肠杆菌O157:H7的双抗夹心化学酶联免疫方法的建立被引量：10
- 2020年
- 为了检测牛奶中肠出血性大肠杆菌(enterohemrrhagic Escherichia coil, EHEC)O157:H7污染,采用兔多抗作为捕捉抗体与一株O157:H7单克隆抗体作为检测抗体进行配对,构建了针对EHEC O157:H7的双抗夹心化学发光酶联免疫检测方法。该方法最低检测限可达到2.5×10~4 CFU/mL,优于ELISA检测方法,且特异性良好,与其他大肠杆菌、沙门菌、李斯特菌、阪崎肠杆菌等均无交叉反应。在用于牛奶样本的模拟添加检测中,较ELISA方法可缩短前增菌处理时间。本研究为牛奶中O157:H7污染检测提供了一种准确度高、特异性强的检测手段。
- 辛思培蒋蔚龙梦瑶李思王权孙卫东
- 关键词：大肠杆菌O157:H7单克隆抗体
