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- 一种变性聚丙烯酰胺凝胶的制作装置和方法
- 本发明公开一种变性聚丙烯酰胺凝胶的制作装置和方法,涉及变性聚丙烯酰胺凝胶制作技术领域,本发明在制作聚丙烯酰胺凝胶时,通过推动机构的设置,可以使短玻璃板保持匀速滑动,避免气泡产生;通过在短玻璃板与长玻璃板之间设置密封件,利...
- 武晓晓刘萍吴仕蔓邓崇岭娄兵海唐艳
- 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测新疆特种乳中掺加的牛乳被引量:1
- 2023年
- 新疆特种乳资源丰富,具有重要的商业价值。近年来乳制品掺假问题时有发生,准确鉴别特种乳中乳源动物成分,防止牛乳掺假具有重要的意义。本研究采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(native-PAGE)对驼乳、马乳、驴乳、山羊乳与牛乳等特种乳的乳清蛋白及酪蛋白进行乳间差异性分析,建立基于牛乳特征蛋白质多态性的检测方法,并研究不同热处理工艺对检测方法稳定性、灵敏度的影响。结果表明,牛β-乳球蛋白可作为特种乳中掺加牛乳的检测靶标,热处理会使样品中蛋白质发生变性,导致掺加牛乳检出限的升高。基于牛β-乳球蛋白的条带强度与牛乳掺加百分比建立回归方程,相关系数为0.9779~0.9998,定量范围在5%~100%之间。本研究为新疆特种乳中掺加牛乳的检测,提供了一种准确、灵敏和经济的方法。
- 孙国栋李爱丽赵仲凯杨洁
- 关键词:牛乳掺假
- 香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的应用及正交优化被引量:2
- 2021年
- 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳是一种高效鉴定微卫星分子标记的方法,广泛应用于种质鉴定、遗传连锁图谱构建及分子标记辅助育种等研究中。该方法由于操作繁琐,目前在食用菌领域的应用尚不广泛。以香菇为研究对象,建立变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的检测流程,并利用正交试验对检测流程中涉及的加样缓冲液与PCR反应液的体积比、95℃变性时间、置于冰上冷却时间、银染时间、银染后胶板去离子水洗时间等5个操作节点进行优化。结果表明,加样缓冲液与PCR反应液体积比为1∶2,95℃变性2~5min,置于冰上冷却15~20min,银染7min,银染后胶板用去离子水洗5~10s是正交试验的较优处理组合。试验建立了香菇微卫星标记变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测操作规程,该操作规程具有成本低、效率高、易批量化操作等优点,对其他食用菌微卫星标记的应用具有重要的参考价值。
- 张丹颜梦秋张美彦谭琦宋春艳尚晓冬
- 关键词:香菇微卫星标记正交试验设计
- 一种非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法
- 本发明公开了一种非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法,包括:将丙烯酰胺、亚甲基双丙烯酰胺、凝胶缓冲液、聚乙烯醇、硼砂、纯净水混合,得到丙烯酰胺的质量浓度低于3%的混合溶液;将引发剂和加速剂添加到所述混合溶液中,并将其混合均匀,...
- 黄晓星宋凯郁聪朱平
- 文献传递
- 基于非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的菜心SCoT分析被引量:3
- 2020年
- 以菜心(Brassica rapa var.parachinensis)抗小菜蛾品种Caixin65和感小菜蛾品种Caixin69及6份F2株系为材料,利用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测菜心抗虫株系的SCoT多态性,同时进行SCoT多态性的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳检测效率、遗传多样性分析和差异条带克隆分析。结果表明,非变性聚丙烯酰胺凝胶能检测出亲本与子代间的SCoT多态性和遗传多样性变化,条带数量较多且清晰,提高了SCoT标记检测效率。选取亲本的10条非变性聚丙烯酰胺凝胶差异片段克隆测序,获得感虫序列4条、抗虫序列6条,GENSCAN预测其中8条具有启动子、终止子、阅读框等基因结构序列。同源性检索分析表明,感虫序列分别与泛素羧基末端水解酶mRNA序列、大白菜克隆序列、白菜线粒体丙酮酸载体蛋白序列、甘蓝基因组编码未知蛋白的HDEM序列同源,抗虫序列分别与白菜RNA假尿苷合酶4线粒体mRNA序列、京水菜线粒体DNA序列、白菜未知蛋白mRNA序列、白菜4-香豆酸:辅酶A连接酶mRNA序列、大白菜克隆序列、哈茨木霉mRNA序列同源。本研究提高了SCoT标记清晰度、遗传多样性检测水平和差异片段克隆的精准性,使得SCoT成为批量克隆差异片段的高效工具,有助于挖掘SCoT功能性标记信息,开展初步的功能基因组学研究,提高优异株系筛选鉴定效率,加快育种进程,为菜心抗虫性机制的进一步研究提供理论基础。
- 史卫东罗海玲康红卫琚茜茜张力
- 关键词:菜心抗虫性
- 一种非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法
- 本发明公开了一种非变性聚丙烯酰胺凝胶的制备方法,包括:将丙烯酰胺、亚甲基双丙烯酰胺、凝胶缓冲液、聚乙烯醇、硼砂、纯净水混合,得到丙烯酰胺的质量浓度低于3%的混合溶液;将引发剂和加速剂添加到所述混合溶液中,并将其混合均匀,...
- 黄晓星宋凯郁聪朱平
- 文献传递
- 一种SSR扩增产物非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法及装置
- 本发明公开了一种SSR扩增产物非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法及装置,本装置用三块玻璃板采用3夹2的夹心式组合方式,将分离胶同时倒入三块玻璃板之间形成的两个夹层之间,一次灌胶可以制成两块分离胶版。由于两块带有方形缺口的玻璃板...
- 王霖李兴峰鲍印广李君丁安明
- 文献传递
- 刺梨SSR标记多态性检测的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法
- 本发明公开了一种刺梨SSR标记多态性检测的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法。本发明针对刺梨SSR标记多态性检测优化出合适的凝胶及电泳参数,按照本发明的具体流程操作可以稳定的得到分辨率高、条带清晰的电泳图胶片。且本发明操作简单...
- 安华明张怀山鲁敏鄢秀芹廖安红
- 文献传递
- 大白菜非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)技术影响因素研究被引量:1
- 2019年
- 电泳技术是分子标记辅助育种技术的关键步骤,建立一套高效的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳技术体系可提高分子标记辅助育种技术的工作效率。以根肿病抗感大白菜作为试材,以凝胶聚合速度及凝胶条带的清晰度作为衡量标准,分别对电泳中的凝胶浓度、温度、促凝剂配比3个重要因素进行研究。结果发现凝胶浓度、温度、促凝剂配比均与凝胶聚合时间呈现负相关,但4种常用凝胶浓度制胶时间差异不明显,可主要根据目的产物的大小选择浓度。在凝胶质量方面,温度、促凝剂配比与凝胶的脆性呈负相关。综合分析,操作中环境温度为25~35℃,促凝剂配比为1∶10的条件,聚合速度适中,条带清晰,检测效果最佳。
- 张红徐莹莉黄志银李梅范伟强王超楠
- 关键词:温度大白菜
- 一种快速有效检测SSR标记的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法被引量:15
- 2016年
- 聚丙烯酰胺凝胶银染法是一种具有高分辨率检测SSR标记的有效方法,然而传统的银染方法存在操作步骤较多、所需时间较长及试剂种类与用量较多等不足.本研究利用菜心和烟草SSR标记为研究对象,建立一种能快速有效检测其PCR扩增产物的非变性聚丙烯酰胺凝胶的银染方法.该方法包括染色和显影2个主要操作步骤,整个银染流程耗时6~7min,只需要AgNO3、NaOH和甲醛3种试剂,所检测SSR标记的DNA条带清晰、易辨.与其他银染法相比,本研究建立的银染法具有易于操作、耗时少、所需试剂种类和用量少及检测效果好的优势.
- 郭培国刘文杰李海洋王直亮夏岩石李荣华
- 关键词:SSR标记非变性聚丙烯酰胺凝胶银染