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一种枸杞高效遗传转化体系及应用
本发明涉及植物遗传转化领域,具体涉及一种枸杞高效遗传转化体系及应用。以枸杞无菌苗的根系组织为外植体,可视化植物基因表达载体通过农杆菌GV3101菌株介导侵染,并在共培养,愈伤组织诱导、不定芽及不定根分化和选拔等培养基中加...
刘晓霞安迎瑞唐建宁马利奋禹瑞丽陈任
一种渤丰3号杨叶盘法高效遗传转化体系的建立方法
本发明涉及组织培养及基因编辑技术领域,特别是涉及一种渤丰3号杨叶盘法高效遗传转化体系的建立方法。包括:将渤丰3号杨的叶片进行消毒处理、去掉叶片的边缘部分,在叶片的主脉划刀后进行预培养,得到预培养叶片;将预培养叶片进行农杆...
张伟溪丁昌俊苏晓华张腾倩张冰玉
一种渤丰3号杨经愈伤法高效遗传转化体系的建立方法
本发明涉及组织培养及基因编辑技术领域,特别是涉及一种渤丰3号杨经愈伤法高效遗传转化体系的建立方法。包括:将渤丰3号杨的半木质化茎段进行消毒处理,处理成1.5~2cm的单腋芽段后进行启动培养,得到1~2cm的腋芽;将腋芽进...
张伟溪苏晓华丁昌俊张腾倩张冰玉
一种番木瓜高效遗传转化体系的建立方法
本发明所述番木瓜高效遗传转化体系的建立方法,以番木瓜胚性细胞悬浮系(ECS)为遗传转化受体,利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌介导法进行遗传转化,并通过对抗生素浓度筛选、侵染时间、继代培养、抗性胚的诱导与萌发...
杨敏魏岳荣周陈平邝瑞彬吴夏明
一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法
本发明公开了一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法,包括以下步骤:植物材料预处理、外植体消毒、愈伤组织诱导、侵染液制备、农杆菌侵染、共培养和筛选培养以及GUS染色检测。本发明以中国水仙子房为转化材料,通过农杆菌...
黄佳志缪颖任育军
基于Fast-Tracc方式建立苦瓜高效遗传转化体系的研究
2023年
为了建立基于Fast-Tracc方式的苦瓜再生方法,以2个不同基因型苦瓜(Momordica charantia)的幼苗为研究对象,利用含有发育调节因子DR的双元载体,通过农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导对植株进行侵染,对直接再生的植株,经荧光观察及PCR分子检测确认阳性株。结果表明:农杆菌浓度对植株直接再生率的影响较大,OD600=0.8时再生效率最高,可达33.33%。不同基因型之间再生效率有明显的差异,平均效率分别为26.67%和4.70%。含有AtGRF5和TaGRF4-OsGIF1的两种载体对苦瓜再生均有效。荧光观察及PCR分子检测结果发现,最高阳性率达到10.00%。
刘之洋刘静宁宇戚仁洁徐海陈龙正
关键词:苦瓜
番木瓜胚性细胞悬浮系高效遗传转化体系的建立被引量:2
2023年
【目的】建立番木瓜高效遗传转化体系,为番木瓜基因功能研究和重要农艺性状改良提供新的技术支撑。【方法】以紫晖番木瓜胚性细胞悬浮系(embryogenic cell suspensions,ECS)为遗传转化受体,利用植物表达载体pCAMBIA1301和农杆菌介导法进行遗传转化,对抗生素浓度筛选、侵染时间、继代培养、抗性胚的诱导与萌发以及植株再生整个过程进行探索,最后获得抗性再生植株。【结果】通过设置不同浓度的头孢霉素和潮霉素处理,观察ECS细胞状态,筛选、确定头孢霉素和潮霉素最适处理质量浓度分别为200 mg·L^(-1)和5 mg·L^(-1)。工程菌和ECS共培养侵染2 d后转到含有头孢霉素和潮霉素的液体筛选培养基上进行继代培养,继代周期为14 d。经GUS染色验证,表明继代3次后的ECS几乎全部为转化细胞。将以上ECS转移到液体胚诱导培养基中进行培养,2个月后可获得大量球形体细胞胚,且GUS组织染色为蓝色。将球形体细胞胚转到半固体成熟培养基上培养,2个月后可获得成熟子叶期体细胞胚。子叶期体细胞胚在萌发培养基上光培养30 d后,可获得再生芽。任意选取再生芽进行GUS染色,均可染成蓝色。抗性再生芽经促根培养可成功获得再生植株。利用PCR检测抗性再生植株,可以确定GUS基因已经整合到番木瓜基因组中。【结论】成功建立了一种以番木瓜ECS为转化受体的农杆菌介导的高效遗传转化体系。在该技术体系中,经农杆菌侵染后的ECS继代筛选3次后,几乎全部为转化细胞,这些转化细胞经体胚诱导、成熟、萌发和生根过程可成功获得再生植株,抗性体胚得胚率为43.65%,抗性体胚萌发率为73.26%,植株再生率为80.55%,大大提高了番木瓜遗传转化效率。该体系为番木瓜基因功能研究和分子育种提供了新的途径。
杨敏周陈平李庆萌邝瑞彬吴夏明魏岳荣
关键词:番木瓜根癌农杆菌共培养
一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法
本发明公开了一种建立农杆菌介导中国水仙高效遗传转化体系的方法,包括以下步骤:植物材料预处理、外植体消毒、愈伤组织诱导、侵染液制备、农杆菌侵染、共培养和筛选培养以及GUS染色检测。本发明以中国水仙子房为转化材料,通过农杆菌...
黄佳志缪颖任育军
西瓜‘SM1’高效遗传转化体系的构建被引量:6
2021年
为构建高效的西瓜再生和遗传转化体系,本研究以西瓜‘SM1’材料子叶节为外植体,研究不同激素配比对子叶节再生的影响。在此基础上,通过农杆菌介导法导入外源基因,研究潮霉素浓度、农杆菌侵染时间、共培养时间等因素对遗传转化效率的影响,建立遗传转化体系。结果表明,‘SM1’不定芽分化最佳培养基为MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.1 mg/L,不定芽分化率为91.7%。最优遗传转化组合为农杆菌侵染时间15 min,共培养3 d,之后进行选择培养。外植体不定芽分化潮霉素最适浓度为10 mg/L,最适生根培养基为1/2MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.01 mg/L。通过潮霉素筛选和PCR鉴定,获得12株阳性转化株系,转化率为6.5%。本研究建立了高效西瓜‘SM1’再生及遗传转化体系,为进一步开展基因功能研究及西瓜遗传改良提供了技术支撑。
张曼徐锦华刘广任润生姚协丰徐建娄丽娜羊杏平
关键词:子叶节
一种农杆菌介导的矮牵牛‘梅林’高效遗传转化体系
本发明涉及矮牵牛‘梅林’高效遗传转化体系建立。包括以下步骤:(1)叶片暗培养;(2)侵染液的制备;(3)侵染;(4)共培养;(5)筛选培养;(6)获得抗性植株;(7)获得阳性植株。本发明通过对叶片暗培养和菌液侵染时间、...
张彦妮燕浩黄洪峰王依萍
文献传递

相关作者

王勇
作品数:38被引量:246H指数:10
供职机构:内蒙古农业大学生态环境学院
研究主题:紫花苜蓿 新麦草 苜蓿 转录因子 高效遗传转化体系
徐春波
作品数:52被引量:232H指数:10
供职机构:中国农业科学院草原研究所
研究主题:紫花苜蓿 冰草 新麦草 愈伤组织 牧草
李宏宇
作品数:20被引量:33H指数:4
供职机构:沈阳农业大学
研究主题:百合 细叶百合 体细胞胚 小植株 百合鳞片
丁昌俊
作品数:97被引量:373H指数:12
供职机构:中国林业科学研究院林业研究所
研究主题:杨树 美洲黑杨 欧美杨 转多基因 花枝
张冰玉
作品数:80被引量:507H指数:16
供职机构:中国林业科学研究院林业研究所
研究主题:杨树 美洲黑杨 植物组织培养技术 林木 银