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FHL2 deficiency aggravates Candida albicans infection through decreased myelopoiesis
2025年
Hematopoiesis is a finely tuned process that generates all blood cell types through self-renewal and differentiation,which is crucial for maintaining homeostasis.Acute infections can prompt a hematopoietic response known as emergency myelopoiesis.In this study,using a Candida albicans(C.albicans)infection model,we demonstrated for the first time that disruption of Fhl2 led to increased fungal burden,heightened inflammatory response and reduced survival rates.Impaired myeloid hematopoiesis and immune cell production were evident,as proved by the decreased numbers of hematopoietic stem and progenitor cells(HSPCs)and granulocytes in the bone marrow of Fhl2-deficient mice.In conclusion,FHL2 regulated emergency myelopoiesis in response to C.albicans,affecting the host’s defense against pathogens.
Rongmei GaoKanchao ChenYimin WangRongxia GuoXiaoyu ZhangPeng WuWeili WangQingxiang HuangXuemei XieShangda YangYanling LvQian RenFei LiuSong ChenFengxia MaTao ChengHui Cheng
关键词:FHL2
FHL2与LDHA相互作用促进胶质瘤细胞的增殖
2024年
目的:探讨四个半LIM结构域2(FHL2)蛋白对胶质瘤细胞增殖的影响及其分子机制。方法:利用TCGA和CGGA数据库分析胶质瘤组织中FHL2 mRNA表达水平与患者预后的关系。通过WB法检测人胶质瘤组织标本及人胶质瘤细胞U87、T98G、U251、SNB19、GSC23、A172、LN229、G267和星形胶质细胞NHA中的FHL2蛋白表达水平。利用慢病毒载体构建稳定敲低FHL2的U87细胞和过表达FHL2的SNB19细胞,即U87-shGFP、U87-shFHL2-1#、U87-shFHL2-4#和SNB19-3flag、SNB19-3flag-FHL2组。通过CCK-8法、克隆形成实验检测敲低和过表达FHL2对细胞增殖的影响,免疫共沉淀(Co-IP)和液相色谱-串联质谱(LC/MS)法筛选FHL2在胶质瘤细胞中的相互作用蛋白,并用Co-IP和免疫荧光法验证它们的结合作用和共定位情况。使用酶标仪检测敲低和过表达FHL2细胞内乳酸产量和乳酸脱氢酶(LDH)活性的变化,WB法分析FHL2、LDHA及p-LDHA在正常脑组织和胶质瘤组织中的蛋白表达差异及其相互关系。在过表达FHL2的SNB19细胞中使用LDHA的小分子抑制剂AT-101,通过CCK-8实验和酶标仪比色法验证FHL2在胶质瘤乳酸代谢中的作用,验证AT-101在胶质瘤中潜在的治疗效果。结果:Co-IP和LC/MS检测发现,FHL2与LDHA在胶质瘤细胞中存在相互作用。FHL2过表达可提高LDHA活性和乳酸生成(均P<0.001),进而促进胶质瘤细胞增殖(P<0.001)。相反,敲低FHL2会降低LDHA活性和乳酸产量(P<0.001或P<0.05)并抑制细胞增殖(P<0.001)。AT101能抑制LDHA活性,并显著抑制FHL2促进胶质瘤细胞的增殖,同时恢复磷酸化LDHA(Y10)水平(P<0.01或P<0.001)。结论:FHL2与LDHA蛋白相互作用,FHL2通过激活p-LDHA(Y10)的表达促进LDHA活性和乳酸产生,进而促进胶质瘤细胞的增殖,靶向这种相互作用可能成为治疗胶质瘤的潜在策略。
吴国庆张婷宋小锋朱婷李娜李明
关键词:胶质瘤U87细胞
FHL2通过NF-κB信号通路调节THP-1巨噬细胞泡沫化
2024年
目的 明确4个半LIM结构域蛋白(FHL2)是否能够通过调节核因子κB(NF-κB)信号通路影响巨噬细胞泡沫化。方法 构建FHL2过表达质粒及合成FHL2小干扰RNA(si-FHL2),分别转染至人单核/巨噬细胞系THP-1中,Western blot检测FHL2表达;使用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)刺激细胞,ELISA检测细胞IL-6、IL-1β、TNF-α等细胞因子的表达;油红O染色检测细胞泡沫化程度;Western blot检测NF-κB信号通路相关蛋白表达。结果 转染过表达FHL2质粒的细胞中FHL2表达量升高(P<0.01),而转染si-FHL2的细胞表达量降低(P<0.05);敲低FHL2能够下调炎性细胞因子的分泌(P<0.01);FHL2下调能够缓解THP-1巨噬细胞泡沫化;同时,FHL2下调抑制NF-κB信号通路的活化(P<0.05),而在过表达FHL2组中结果呈相反趋势。结论 下调FHL2的表达可通过抑制NF-κB信号通路活化,降低炎性细胞因子的分泌,缓解巨噬细胞的泡沫化。
陈卫卫廖煌史振鸿罗颖
关键词:NF-ΚB信号通路THP-1巨噬细胞泡沫化
FHL2对冠状病毒感染和猪肠上皮细胞氧化应激的影响及其机制研究
FHL2(Four and a half LIM domains 2)是一种具有多种生物学功能蛋白。该蛋白由四个半LIM结构域组成。LIM结构域由两个锌指组成,由于LIM结构的存在,该蛋白能和多种蛋白相结合,在不同的组织...
许智强
关键词:FHL2冠状病毒氧化应激
NRP1、FHL2在结直肠癌组织中的表达与微血管密度及临床病理特征的相关性研究
目的:探讨细胞膜受体神经纤毛蛋白1(neuropilin 1,NRP1)、四个半LIM结构域蛋白2(four and a half LIM domain protein 2,FHL2)在结直肠癌组织中的表达情况与微血管密...
王嘉玥
关键词:结直肠癌微血管密度
FHL2在腹主动脉瘤预防或治疗中的医药用途
本发明涉及生物医药领域,具体涉及四个半LIM结构域蛋白2(Four and a half LIM domains 2FHL2)的医药用途,更进一步涉及干预FHL2基因表达或其活性片段在制备用于预防或治疗腹主动脉瘤中(a...
韩雅玲刘丹王静闫承慧宋海旭
FHL2调控P-gP和MRP1表达促进胃肠道间质瘤甲磺酸伊马替尼耐药的研究
胡武
牦牛FHL2基因的克隆、组织表达与蛋白定位分析被引量:1
2023年
旨在获得牦牛FHL2基因序列,阐明该基因序列、蛋白质结构与性质、mRNA的组织表达模式、在雌性生殖器官及颗粒细胞的蛋白表达特性。本研究以5头健康空怀成年母牦牛的心、肝、脾、肺、肾、卵巢、子宫、输卵管组织及5头妊娠2个月左右母牦牛的子宫、输卵管和卵巢为研究材料,利用逆转录PCR(RT-PCR)技术克隆FHL2基因,并使用在线分子生物学软件分析其生物信息学特性;利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术分析FHL2基因的组织表达特性;应用免疫组化(IHC)和免疫荧光(IF)技术检测FHL2蛋白在雌性生殖器官的分布和颗粒细胞上的亚细胞定位。结果发现,FHL2基因CDS区全长840 bp (ON456866),编码279个氨基酸,FHL2蛋白属于弱碱性亲水不稳定蛋白,没有跨膜结构。不同物种的FHL2氨基酸序列比对和进化树分析表明,FHL2基因编码区在物种进化中比较保守。RT-qPCR结果显示,FHL2基因在检测的组织都有表达,在心的表达量极显著高于其他检测组织(P<0.01);在肺、卵巢、输卵管和子宫中的表达量极显著高于肝、脾和肾(P<0.01)。FHL2基因在妊娠期子宫中的表达量极显著高于空怀期(P<0.01),在卵巢中妊娠期的表达量极显著低于空怀期(P<0.01)。IHC结果表明,在生殖器官中FHL2蛋白主要在卵泡颗粒细胞、子宫内膜和输卵管黏膜表达;IF定位结果显示,FHL2蛋白主要分布在卵泡颗粒细胞的细胞核中。综上所述,牦牛FHL2基因在动物进化过程中比较保守,在心、肺、卵巢、输卵管和子宫中表达量高,可能在参与牦牛低氧适应性、卵泡发育和妊娠维持等生理功能的调控中发挥重要作用。
龚三你蒋旭东马瑶卢建远字向东
关键词:牦牛实时荧光定量PCR免疫组化
FHL2基因变异致扩张型心肌病1例并文献回顾被引量:1
2023年
目的探讨1例扩张型心肌病(DCM)患儿的临床表型及遗传学特征。方法收集2020年4月28日就诊于郑州儿童医院的1例患儿的临床资料,并对其进行家系全外显子组测序(trio-WES),对候选变异进行Sanger测序验证。以"FHL2"作为关键词,检索1997年1月1日至2021年10月31日PubMed数据库收录的文献,同时在ClinVar数据库中检索FHL2变异作为补充支持,分析基因变异与临床特征的对应关系。结果患儿为女性,就诊时为5月龄,临床特征为左心室增大、收缩功能减低。基因测序发现其FHL2基因存在杂合错义变异c.391C>T(p.Arg131Cys),其父母未携带相同的变异。根据美国医学遗传学与基因组学学会(ACMG)变异相关指南,c.391C>T(p.Arg131Cys)被升级为可能致病性变异(PS2+PM2_Supporting+PP3+PP5)。通过文献检索,共发现10例FHL2基因变异的患者,其中6例表现为DCM,2例表现为肥厚型心肌病(HCM),2例表现为不明原因猝死(SUD)。变异位于FHL2蛋白LIM 3结构域的患者均表现为HCM,位于LIM 0~2、LIM 4结构域者则主要表现为DCM。结论FHL2基因杂合错义变异c.391C>T(p.Arg131Cys)可能是患儿DCM的原因。上述发现强调了trio-WES在疾病诊断和遗传咨询中的重要性。
于春蕊贾丽娟郝婵娟左汴京李巍李巍郭俊
关键词:扩张型心肌病
FHL2通过MGMT影响胶质母细胞瘤U87细胞对替莫唑胺的耐药性被引量:1
2023年
目的:探讨干扰四个半LIM结构域蛋白2(FHL2)的表达对胶质母细胞瘤U87细胞中O6-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)表达的影响,以及对U87细胞替莫唑胺(TMZ)耐药性的影响。方法:利用慢病毒感染技术分别将携带不同FHL2干扰序列的慢病毒(shFHL2-1#、shFHL2-4#)及其阴性对照(shN)感染U87细胞,分别命名为shFHL2-1#、shFHL2-4#和shN组;采用siRNA转染技术将siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN转染至U87细胞,为siMGMT-1#、siMGMT-4#和siN组,qPCR和WB法验证FHL2或MGMT的敲低效果。用TMZ处理上述各组细胞(以DMSO处理组为对照),随后以CCK-8法和细胞克隆形成实验检测TMZ处理前后FHL2或MGMT敲低组细胞的增殖情况,FCM检测TMZ处理前后FHL2敲低组细胞的凋亡情况,WB法和免疫荧光法检测敲低FHL2对U87细胞中MGMT表达的影响,WB法检测TMZ处理对各组细胞中FHL2和MGMT表达水平的影响。结果:成功构建敲低FHL2或MGMT表达的U87细胞。与shN组相比,shFHL2-1#、shFHL2-4#组U87细胞的增殖能力减弱、凋亡水平升高(均P<0.01),MGMT表达水平明显降低(均P<0.01)。经TMZ处理后,与相应的DMSO处理组相比,shN组细胞中FHL2和MGMT的表达水平显著升高(均P<0.05),而细胞的增殖和凋亡均无显著变化(均P>0.05);shFHL2-1#、shFHL2-4#组细胞中FHL2和MGMT的表达水平无显著改变(均P>0.05),但细胞增殖能力进一步显著降低、凋亡水平进一步显著升高(均P<0.01)。敲低MGMT使U87细胞增殖减慢(P<0.01),而siMGMT-1#、siMGMT-4#组细胞经TMZ处理后增殖能力进一步降低(均P<0.01)。结论:干扰FHL2表达使得U87细胞增殖减慢而凋亡加剧、MGMT表达下调,提示FHL2可能通过影响MGMT的表达调控U87细胞对TMZ的耐药性。
陈丽莉代晶郑彦文李明
关键词:胶质母细胞瘤U87细胞替莫唑胺耐药性

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叶棋浓
作品数:318被引量:603H指数:10
供职机构:军事医学科学院生物工程研究所
研究主题:真核表达 克隆 乳腺癌 转录活性 纯化
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作品数:102被引量:129H指数:6
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研究主题:连接蛋白43 HERG钾通道 酵母双杂交 心脏 HERG
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作品数:297被引量:1,375H指数:18
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研究主题:幽门螺杆菌 幽门螺杆菌感染 过氧化氢酶 遗传密码 克隆
韩为东
作品数:284被引量:601H指数:19
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研究主题:LRP16 LRP16基因 信号结构 基因 NKT细胞