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活化激酶C受体1、四个半LIM结构域蛋白1在食管鳞状细胞癌中的表达及与患者预后的关系: 2023年; 目的探讨活化激酶C受体1(RACK1)、四个半LIM结构域蛋白1(FHL1)在食管鳞状细胞癌(ESCC)中的表达及与患者预后的关系。方法选取122例局部晚期ESCC患者,取其ESCC组织及癌旁组织,免疫组化法检测RACK1、FHL1的表达情况,并比较不同临床疗效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1表达情况。局部晚期ESCC患者预后的影响因素采用多元Logistic回归分析。结果ESCC组织中RACK1、FHL1蛋白阳性表达率均明显低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。依据实体瘤疗效评价标准,有效87例,无效35例,有效ESCC患者ESCC组织中RACK1、FHL1阳性表达率均高于无效患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。多因素Logistic分析结果显示,淋巴结转移、分化程度为低分化、肿瘤直径≥5 cm、RACK1阴性表达、FHL1阴性表达均是局部晚期ESCC患者预后死亡的独立危险因素(P﹤0.01)。结论RACK1、FHL1在局部晚期ESCC组织中阳性表达率较低,可作为评估紫杉醇联合顺铂化疗疗效、患者预后的可靠指标。; 乔滨刘孝民肖中岳孙佳春; 关键词：食管鳞状细胞癌化疗预后

蝗绿僵菌LIM结构域结合蛋白MaPtaB的功能研究: 真菌杀虫剂具有寄主范围广泛、安全可持续性等优点，但在实际生产应用中由于其杀虫速度慢和防效不稳定等不足限制了其广泛使用。分生孢子是昆虫病原真菌侵染的主要单元，也是杀虫真菌农药的主要有效成分，孢子的质量及产量对减少杀虫真菌农...; 胡美雯; 关键词：抗逆力基因调控

LIM结构域蛋白4对胃癌细胞转移及增殖能力的作用及机制: 2022年; 目的探讨LIM结构域蛋白4(Lmo4)在胃癌和癌旁组织、不同胃癌细胞株中的表达差异,阐明Lmo4在胃癌发生发展中的作用及机制。方法应用qRT-PCR和免疫组织化学技术,检测2019年4月至2020年6月浦口区中心医院90例胃癌患者的癌组织及对应癌旁组织中Lmo4 mRNA的表达差异,分析Lmo4表达与胃癌临床病理因素的相关性。采用western blot方法比较不同人胃癌细胞株中Lmo4的表达,筛选高表达和低表达细胞。通过RNA干扰技术抑制BGC-823胃癌细胞中Lmo4的表达,应用平板克隆形成实验、Transwell迁移实验、划痕试验、CCK-8实验及western blot等方法检测Lmo4沉默对胃癌细胞生长迁移能力及细胞通路的影响。构建Lmo4过表达质粒Lmo4-pcDNA,并通过western blot检测其对胃癌细胞增殖、迁移及上皮细胞间质转化(EMT)相关蛋白的影响,运用细胞周期试验评价Lmo4过表达后细胞增殖情况的改变。结果qRT-PCR和免疫组织化学结果均显示胃癌组织中Lmo4相对表达量明显高于对应的癌旁组织(P<0.01),且Lmo4在胃癌组织中的表达与肿瘤的分型、浸润程度有关(P<0.01),而与年龄、性别、肿瘤大小无关(P>0.05)。沉默Lmo4后的胃癌细胞迁移能力显著减弱,细胞克隆形成数量减少,抑制EMT发生;Lmo4过表达促进胃癌细胞生长和迁移,促进EMT的发生,调节TGF-β信号通路(P<0.05)。结论Lmo4在胃癌的发生及进展中具有重要作用,可能通过诱导胃癌细胞发生EMT而促进胃癌的转移。; 梁怀盼许珈豪陈璐; 关键词：胃癌上皮细胞间质转化 TGF-Β信号通路

LIM结构域结合蛋白1在脑胶质瘤患者中的表达研究被引量：4: 2016年; 目的观察LIM结构域结合蛋白1(LIM-domain-binding 1,Ldb1)在脑胶质瘤患者中的表达。方法采用Real-time PCR方法检测46例脑胶质瘤手术患者脑组织、18例正常对照和16例良性脑肿瘤对照脑组织标本中Ldb1 mRNA的表达水平;采用免疫组化En Vision二步法观察Ldb1在高级别胶质瘤中的蛋白表达定位。结果脑胶质瘤患者脑组织Ldb1的mRNA表达高于正常对照组和良性脑肿瘤对照组。Ldb1在不同分级的胶质瘤中表达并不相同,在III、IV级中的相对表达量明显高于Ⅰ、Ⅱ级(P<0.001)。在高级别胶质瘤中,Ldb1蛋白主要表达在肿瘤细胞核和胞浆内。结论脑胶质瘤患者肿瘤组织中Ldb1表达增高,可能参与了胶质瘤的发生、发展过程。; 董成亚曹敬丽李昊文康熙雄王雅杰; 关键词：脑胶质瘤

LIM结构域蛋白FHL1C与GNB2不存在相互作用: 2015年; 目的通过哺乳动物双杂交及免疫共沉淀技术验证经质谱技术获得的LIM结构域蛋白FHL1C相互作用候选分子GNB2与FHL1C之间是否存在相互作用,从而丰富FHL1C调控Notch信号通路的机制。方法分别构建融合质粒p CMVGAL4-DBD-FHL1C和p CMV-VP16-GNB2,并将其共转染He La细胞,通过哺乳动物双杂交实验验证两者在细胞内是否具有相互作用;构建带Flag标签的GNB2融合蛋白的重组载体p CMV-Flag-GNB2,酶切鉴定正确后,与带myc标签的FHL1C融合蛋白的重组真核表达载体p CMV-myc-FHL1C共转染He La细胞,利用免疫共沉淀技术检测GNB2与FHL1C之间是否存在生理上的相互作用。结果哺乳动物双杂交实验和免疫共沉淀实验均显示:FHL1C与GNB2之间不存在生理上的相互作用。结论成功构建了实验所需的GNB2的融合蛋白真核表达重组载体,利用哺乳动物双杂交实验及免疫共沉淀技术证实FHL1C与GNB2之间不存在相互作用。; 刘娟赵俊龙王媛媛韩骅秦鸿雁张丙芳; 关键词：LIM结构域免疫共沉淀

玉米LIM结构域蛋白基因家族分析被引量：7: 2013年; 采用生物信息学的方法,在玉米全基因组水平鉴定并分析玉米LIM蛋白基因,鉴定出11个ZmLIM基因,分别分布于玉米的8条染色体上。结构域分析表明,多数LIM蛋白包括2个典型的LIM结构域。系统发育分析表明,LIM家族可以分为3个亚家族。假定调控元件分析发现,所有LIM基因启动子都具有大量花粉特异表达元件,相对来说其他组织器官特异表达,激素和逆境调控元件数量很少。EST基因表达数据分析表明,该家族成员具有明显的时空表达特性。; 张海燕李佐同赵长江杨克军王玉凤胡雪微赵莹; 关键词：玉米 LIM结构域生物信息学

人FHL1各LIM结构域融合蛋白的原核表达、纯化及活性检测被引量：1: 2013年; 目的构建人FHL1各LIM结构域的原核表达载体,获得纯化的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4融合蛋白,并对其活性进行检测。方法用PCR法从FHL1真核表达载体中扩增FHL1的LIM1/2、LIM1、LIM2、LIM3和LIM4基因编码序列,将其正确插入pGEX-KG载体,重组质粒转化大肠杆菌Rossate表达后,用GST-Sepharose 4B珠子纯化融合蛋白,并用Western blot法检测融合蛋白表达,通过GST pull-down技术检测纯化蛋白与已知结合蛋白雌激素受体α(ERα)的相互作用。结果构建得到FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因的原核表达载体,双酶切鉴定得到与预期片段大小相符的外源基因插入片段,经测序与目的序列完全一致;在Rossate菌中诱导表达出与预期大小相符的目的蛋白,经Western blot法检测,融合蛋白成功表达;纯化得到GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4五个融合蛋白,GST pull-down证明FHL1全长以及FHL1-LIM1/2、-LIM2蛋白可以和ERα相互作用。结论成功克隆FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4基因,并获得了活性良好的GST-FHL1-LIM1/2、-LIM1、-LIM2、-LIM3和-LIM4蛋白,为研究FHL1在乳腺癌中的作用奠定了实验基础。; 符静徐小洁刘家宏范忠义王涛宋金洁吕朝晖朱建华叶棋浓陆菊明; 关键词：原核表达纯化 ERΑ

LIM结构域蛋白FHL1C抑制Notch信号途径的转录激活研究被引量：1: 2011年; 目的:克隆人表达FHL1C基因以及建立真核表达载体和慢病毒载体。方法:从人的骨骼肌细胞来源的cDNA中扩增并克隆人FHL1C基因的编码区,连接至pMD-18T载体酶切鉴定后测序。序列测定确认后,双酶切pMD18T-FHL1C回收片段,插入真核表达载体,构建真核表达载体pCMV-Myc-FHL1C酶切鉴定正确后,转染Hela细胞及Cos7细胞,用Western Blot检测其在转染细胞中的表达,用双荧光素报告基因系统检测其对Notch信号作用。构建FHL1C-IRES-GFP表达单元,建立慢病毒表达载体plen-ti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒后感染培养的细胞,用免疫荧光显微镜、Western Blot检测分析其在被感染的细胞中的表达。结果:通过PCR方法成功扩增了人FHL1C基因的编码区。通过转染Hela及Cos7细胞,使用Western Blot检测其蛋白水平表达,双荧光报告基因系统分析均能够下调激活的Notch信号。成功构建了FHL1C慢病毒表达载体pLenti6/V5-FHL1C-IRES-GFP,包装慢病毒,把获取的慢病毒感染细胞后通过荧光显微镜证实被感染的细胞绿色荧光蛋白正确表达,Western Blot检测证实其表达。结论:成功建立起FHL1C真核表达载体及慢病毒表达系统,为研究急性T淋巴细胞白血病与Notch信号转导通路之间的关系奠定了基础。; 付伟秦鸿雁严学倩于恒超韩骅梁英民; 关键词：急性T淋巴细胞白血病慢病毒 NOTCH信号途径

巴西橡胶树LIM结构域基因克隆与生物信息学分析被引量：5: 2010年; 根据乙烯利刺激巴西橡胶树(Hevea brasiliensis)胶乳差异表达cDNA文库的EST序列信息,利用RACE技术从胶乳中成功克隆了1个含有LIM结构域的未知功能新基因HbLIM的全长cDNA。生物信息学分析表明,该基因全长cDNA由1016bp的碱基组成,拥有1个570bp的开放阅读框编码189个氨基酸残基;推测氨基酸序列富含Lys,Ser,Ala和Leu,含有2个LIM结构域和2个N-豆蔻酰化位置。序列相似性分析表明,HbLIM编码的氨基酸序列与蓖麻、杨毛、葡萄相应的LIM基因的相似性高达98%,95%和92%。这些研究结果为深入探讨LIM结构域蛋白在巴西橡胶树乳管发育及乳管代谢中的功能奠定了基础。; 吴瑞朱家红张全琪张治礼; 关键词：巴西橡胶树基因克隆生物信息学

hhLIM与actin相互作用依赖其C端LIM结构域被引量：1: 2007年; hhLIM是LIM蛋白家族成员之一,该蛋白质含有两个LIM结构域,在基因表达调节、细胞骨架组构及细胞肥大过程中发挥重要作用.构建hhLIM不同LIM结构域的突变体,探讨其两个LIM结构域在与actin相互结合中的作用及其可能机制.GST-pull down和hhLIM及其突变体与actin细胞定位关系的免疫荧光分析结果表明,C端的LIM结构域2是hhLIM与actin结合所必需的,该结构域中的两个Cys置换为Ser后可使hhLIM结合actin的功能完全丧失,N端的LIM结构域1突变使hhLIM结合actin的能力下降.F-actin交联实验结果显示,hhLIM通过LIM结构域2与actin直接结合并起到交联F-actin的作用.结果表明,LIM结构域2在hhLIM与actin相互作用及调节actin细胞骨架组构中起决定性作用.; 郑斌温进坤韩梅史建红; 关键词：HHLIM LIM结构域细胞定位

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