搜索到106篇“ R-SPONDIN“的相关文章
人源R-spondin 2蛋白的生物信息学分析、表达、纯化及活性检测
2024年
目的构建人源R-spondin 2(roof plate-specific spondin 2,RSPO2)的真核表达载体,表达、纯化融合蛋白RSPO2-Fu-Fc,用3C蛋白酶切除Fc结构域后,检测RSPO2-Fu的生物学活性。方法基于生物信息学方法分析人源RSPO2蛋白的理化性质和结构,筛选获得可在溶液中稳定存在的RSPO2截短蛋白RSPO2-Fu。将编码RSPO2-Fu蛋白的基因亚克隆至pCMV-Fc载体后,将质粒pCMV-RSPO2-Fu-Fc瞬时转染入HEK293F细胞中表达72 h,通过Protein A层析柱纯化融合蛋白RSPO2-Fu-Fc,用3C蛋白酶切去Fc结构域,分子筛进一步提纯获得RSPO2-Fu蛋白。最后,通过M50Super 8×TOPFlash检测RSPO2-Fu蛋白的生物学活性。结果生物信息学分析结果显示,RSPO2全长有243个氨基酸,相对分子质量为28300,等电点为9.42,为亲水性不稳定蛋白,RSPO2-Fu截短蛋白在溶液中的稳定性得到了极大提高;重组表达质粒pCMV-RSPO2-Fu-Fc经菌落PCR及测序证明构建正确;获得了纯度达95%的RSPO2-Fu蛋白;生物学活性检测结果显示,RSPO2-Fu的EC50值为1.5×10^(-12)mol/L。结论对RSPO2蛋白适当截短后,可获得稳定表达的RSPO2-Fu蛋白,其对Wnt信号通路有明显激活作用,为Wnt信号通路中RSPO2相关生物学研究提供了更好的参考。
耿腾洁许剑锋
关键词:荧光素酶报告基因WNT信号通路
R-spondin2调控Wnt/β-catenin信号通路的机制及其对骨骼系统的影响
2024年
R-spondin2(Rspo2)是蛋白质家族RSPOs成员之一,其可以通过富含亮氨酸重复序列的G蛋白偶联受体4/5(leucine-rich repeat-containing G protein-coupled receptor 4/5,LGR4/5)、细胞表面跨膜E3泛素连接酶ZNRF3/RNF43(zinc and ring finger 3/ring finger protein 43)、硫酸乙酰肝素蛋白聚糖(heparan sulfate proteoglycans,HSPGs)和含GTP酶激活蛋白质1的IQ基序(IQ motif-containing GTPase-activating protein 1,IQGAP1)来调控Wnt/β连环蛋白(catenin)信号通路,Wnt/β-catenin信号通路是目前研究最广泛且与基础骨生物学直接相关的信号通路,该通路中任何一环节出现问题都可能对骨的调控产生影响。近年来研究发现,Rspo2可以通过Wnt/β-catenin对成骨细胞(osteoblast,OB)、破骨细胞(osteoclast,OC)和软骨细胞产生作用,并参与一些骨骼疾病如脊柱后纵韧带骨化(ossification of the posterior longitudinal ligament,OPLL)、骨关节炎(osteoarthritis,OA)和类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)的发生发展,因此对Rspo2的研究可能会成为骨相关疾病新的治疗方向。本文结合最新研究进展,就Rspo2的结构和主要功能、Rspo2调控Wnt/β-catenin信号通路的相关机制及其对骨骼系统的影响作一综述,以期为骨相关疾病的防治提供新的思路和途径。
晋俊杰李晶胡广璇吴若萌衣雪洁
关键词:WNT/Β-CATENIN信号通路成骨细胞破骨细胞软骨细胞
外源激素对中华鳖R-Spondin 2(Rspo2)和R-Spondin 3(Rspo3)基因表达和胚胎发育的影响
中华鳖(Pelodiscus sinensis)是中国重要的水产养殖品种,具有显著的性别二态性,雄性个体比雌性个体具有更高的经济价值。在脊椎动物中,已有多个R-Spondin家族蛋白与性别分化机制密切相关;然而,它们在中...
曹继增周同陈国彬邹桂伟梁宏伟
关键词:中华鳖性逆转胚胎发育
R-spondin蛋白家族调控WNT信号通路机制及其对肿瘤进展的影响
2024年
R-spondin蛋白家族由4种分泌糖蛋白R-spondin1~4组成,是包含凝血酶敏感蛋白1型重复序列(TSR)-1结构域家族。R-spondins通过富含亮氨酸的G蛋白耦联受体LGR 4/5/6、细胞表面跨膜E3泛素连接酶(ZNRF3/RNF43)、硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPGs)、包含GTPase激活蛋白(IQGAP)1来增强WNT信号通路在胚胎发育、器官稳定、干细胞自我更新发挥作用。
陈明洲李朝旭贵鹏王胜涛陈东旭彭伟
关键词:WNT信号通路肿瘤
R-spondin 1对食管鳞癌类器官培养的影响和传代消化酶的选择
2024年
目的优化食管鳞癌类器官的培养方法。方法收集郑州大学第二附属医院胸外科2023年5月至2024年3月食管鳞癌手术标本20例,用含/不含R-spondin 1的培养基培养类器官,观察二者对类器官生长的影响,同时比较市售的0.25%Trypsin-EDTA、1×Tryple和自配的组织消化液对类器官的消化效果。结果用含/不含R-spondin 1培养基培养食管鳞癌类器官时,两者的类器官大小、生长速率无明显差别(P>0.05)。0.25%Trypsin-EDTA消化细胞球时,细胞分散状态好,所生成的细胞球的数量均多于组织消化液和1×Tryple,1×Tryple消化细胞球的效率和所生成的细胞球的数量均大于组织消化液。结论R-spondin 1对食管鳞癌类器官的形成无明显影响;类器官传代扩增时,用0.25%Trypsin-EDTA有较好的消化效果。
邹锋银潇迪张澳华赵家辉郑玮涵马军
关键词:食管鳞癌
脊椎蛋白2对BMSCs成骨分化及卵巢去势小鼠骨代谢的作用研究
2024年
目的探讨脊椎蛋白2(R-spondin 2,Rspo2)对BMSCs成骨分化及卵巢去势(ovariectomy,OVX)小鼠骨密度和骨矿含量的影响。方法取7只4周龄雌性C57BL/6小鼠长骨骨髓,采用全骨髓培养法分离培养BMSCs并传代,经流式细胞仪鉴定细胞表型后,取第3代细胞与10、20、40、80和100 nmol/L Rspo2共培养,采用细胞计数试剂盒8(cell counting kit 8,CCK-8)检测细胞增殖,评价Rspo2对BMSCs活性影响并筛选不影响细胞活性的Rspo2干预浓度;与不同筛选浓度Rspo2培养后更换为成骨诱导培养基诱导培养,行ALP及实时荧光定量PCR(real time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测RUNX家族转录因子2(RUNX family transcription factor 2,Runx2)、Ⅰ型胶原(collagen typeⅠalpha 1,Col1)、骨钙素(osteocalcin,OCN)基因表达,评价Rspo2对BMSCs成骨能力的影响;以上检测均以正常培养BMSCs作为对照。另取18只10周龄雌性C57BL/6小鼠,随机分为假手术组、OVX组和OVX+Rspo2组,每组6只。假手术组仅行双侧背部切开缝合,其余两组通过双侧OVX建立骨质疏松模型;术后OVX+Rspo2组每周腹腔注射Rspo2(1 mg/kg),其余两组接受相同剂量生理盐水。干预12周后,3组称重小鼠体质量及子宫质量,评估OVX模型制备是否成功;取胫骨行HE染色观察骨量变化、免疫组织化学染色观察骨组织中Runx2蛋白表达水平;ELISA法检测血清中骨代谢标记物[ALP、OCN、Ⅰ型前胶原氨基端肽(typeⅠprocollagen amino-terminal peptide,PINP)]和骨吸收标记物[β胶原降解产物(β-isomerized C-telopeptide,β-CTX)]表达水平;Micro-CT检测胫骨微结构变化,并对骨小梁厚度(trabeculae thickness,Tb.Th)、骨小梁数量(trabeculae number,Tb.N)、骨小梁分离度(trabeculae separation,Tb.Sp)和骨体积分数(bone volume fraction,BV/TV)进行三维组织形态计量分析。结果CCK-8检测示80 nmol/L以下浓度的Rspo2不会产生细胞毒性(P>0.05),且20 nmol/L Rspo2组细胞活力明显高于对照组(P<0.05)。基于上述结果,�
柳鑫石博文蔡成阔王昊天贾鹏
关键词:BMSCS骨形成小鼠
R-spondin蛋白的重组变体及其用途
本发明涉及Rspondin蛋白的重组变体及其作为药物的用途,特别是用于治疗糖尿病。
P·科隆巴P·博蒂
一种Wnt-3a和R-spondin1共表达细胞株的构建方法和应用
本发明公开了一种Wnt‑3a和Rspondin1共表达细胞株的构建方法和应用,属于分子生物技术技术领域。通过构建同时搭载有人Wnt‑3a和Rspondin1两个基因的多顺反子表达质粒pCDH‑puromycin‑Wn...
郭燕张慧王晨杨铁林安珂
Let-7i-5p maintains the stemness via R-spondin2/Wnt pathway in hepatocellular carcinoma
2024年
Cancer stem cells(CSCs)are related to tumorigenesis,recurrence,metastasis,and drug resistance in hepatocellular carcinoma(HCC).1 Let-7i is a noncoding small RNA,belonging to the famous miRNA let-7 family.Recently,let-7i has been revealed as a tumor suppressor on CsCs in ovarian cancer.
Qinghua WeiXueshan DaiJiahui WeiWenwei SunXiaoqian YangYuxin ZhangXin GuoYi Chen
关键词:HEPATOCELLULARMETASTASIS
一种类器官培养关键因子R-spondin 1及其制备方法和应用
本发明涉及生物技术领域,公开一种类器官培养关键因子Rspondin 1及其制备方法和应用,该方法包括:构建用于制备关键因子Rspondin 1的核酸,对核酸进行优化,然后与质粒通过酶切连接,获得重组质粒转化至大肠杆菌...
孙益军 张玥 张峰 杨文骏 李利云 王琪玉

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王德寿
作品数:102被引量:468H指数:15
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周林燕
作品数:20被引量:1H指数:1
供职机构:西南大学生命科学学院
研究主题:尼罗罗非鱼 硬骨鱼类 性别决定 雌性 Β-CATENIN信号通路
杜冰
作品数:74被引量:125H指数:6
供职机构:华东师范大学
研究主题:肝癌 肝癌组织 分子药理学 UDP 及其受体
马德寿
作品数:37被引量:118H指数:5
供职机构:青海大学附属医院
研究主题:乳腺癌 基因多态性 甲状腺癌 回族 趋化因子受体
陈晓丹
作品数:15被引量:4H指数:2
供职机构:中山大学
研究主题:骨髓间充质干细胞 成骨细胞 血管 介导 细胞骨架