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枯草芽孢杆菌YN145的发酵条件优化及活性物质分析: 2025年; [目的]Bacillus subtilis YN145是一株对稻瘟病菌具有显著的拮抗作用的拮抗菌株。为推动该菌株在生产实际中的运用,挖掘其潜在的抑菌活性物质和最适的发酵条件。[方法]以菌株发酵液OD600值和菌株对稻瘟病菌的抑菌率为评价指标,将单因素试验法、正交试验和响应面试验相结合,探寻该菌株的最优发酵条件;并基于antiSMASH注释结果,采用气相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)对菌株YN145的活性物质进行分析。[结果]菌株YN145最佳发酵培养基配方为黄豆粉10 g/L、蔗糖10 g/L、胰蛋白胨3 g/L、CaCl24 g/L、CaCO31 g/L,最佳发酵条件为发酵温度28℃、转速220 r/min、培养时间48 h、接种量3%、瓶装量40 mL/250mL,在此条件下菌株单位体积中的菌体浓度提升,对稻瘟病菌的抑菌率提升12.5%。antiSMASH注释结果显示,菌株YN145基因组含有10个次级代谢产物基因簇,包含5种与抑菌作用相关基因簇,分别是surfactin、bacillibactin、fengycin、bacillaene和bacilysin。通过HPLC-MS定性分析发现菌株含10个表面活性素(surfactin)同系物、2个丰原素(fengycin)同系物、2个环酯类抗生素(plipastatin)同系物以及嗜铁素(bacillibactin)和多烯类抗生素(bacillaene)等16个同抑菌作用相关的化合物。分析结果大致对应antiSMASH注释结果,确定菌株YN145能产生多种与抑菌代谢相关的化合物,推测该菌株能通过这些化合物协同作用来抑制稻瘟病菌的生长,为深入了解生防菌YN145的抑菌活性物质提供了参考,为帮助菌株进一步走向生产实践提供理论依据。; 毛思业周瑚郑昕威梁海迪周佳郑晶晶刘二明任佐华; 关键词：发酵条件优化黑色素

运用分光光度法对枯草芽孢杆菌计数的研究: 2025年; 为了研究枯草芽孢杆菌菌液OD值与活菌数之间的相互关系,建立一种能快速获得菌悬液活菌数量的方法。利用分光光度法分别测定不同稀释度菌液在500、550、580、600、630、650、680 nm处的OD值,确定其最适吸收波长。再结合稀释涂布平板法测得各菌液的活菌数,比较二者之间的相关性,建立线性回归方程。结果表明,600 nm为枯草芽孢杆菌的最适吸收波长,其活菌数量与OD600呈直线线性相关,其回归方程为:y=1.4935x-0.0276,相关系数R2=0.9922。证明在一定的浓度范围内采用分光光度法测定枯草芽孢杆菌活菌数的方法是可行的,且更简便快捷。; 董晶晶; 关键词：枯草芽孢杆菌分光光度法活菌计数

枯草芽孢杆菌对草莓生长及品质的影响: 2025年; 以‘红颜’草莓为试材,采用不同用量(3.0、3.5、4.0、4.5、5.0 g·株-1)枯草芽孢杆菌进行灌根处理,研究枯草芽孢杆菌不同用量对草莓植株的生长、光合作用及果实品质(维生素C、可溶性蛋白质、可溶性糖、可滴定酸、可溶性固形物)的影响;并运用隶属函数法对草莓生长及果实品质进行综合评价,以期筛选出枯草芽孢杆菌对促进草莓生长及品质提升的最佳施用量。结果表明:所有处理的生长和果实指标均优于CK,株高、根茎粗、叶面积均为枯草芽孢杆菌4.5 g用量效果显著;叶绿素和净光合速率均为枯草芽孢杆菌4.0 g用量效果显著。果实中维生素C、可溶性蛋白质和可溶性固形物均随着枯草芽孢杆菌不同用量的增加先升高后略降低,可溶性糖含量一直增加。综上,施用枯草芽孢杆菌不同用量能够促进草莓的生长,提升果实品质,通过隶属函数分析得出,单株以每次施入枯草芽孢杆菌4.0 g,共灌根3次,对草莓生长及提升果实品质效果最佳。; 孔祥馨梁发辉王丽娟; 关键词：草莓枯草芽孢杆菌果实品质

枯草芽孢杆菌对聚丙烯塑料的有效降解: 2025年; 目前聚丙烯塑料生物降解相关研究还处在代谢菌株资源分离阶段,可研究和应用的聚丙烯塑料降解菌株严重缺乏。利用前期从土壤中筛选得到的一株枯草芽孢杆菌进行聚丙烯塑料颗粒降解,发现14 d后聚丙烯塑料表面存在明显被微生物侵蚀的痕迹。探究了聚丙烯塑料对枯草芽孢杆菌生长情况和总蛋白含量的影响,并且聚丙烯的产物对枯草芽孢杆菌出现了抑制作用,同时红外分析检测到短链烃类物质的生成,说明对聚丙烯塑料实现了断链降解。该结论为后续深入分析枯草芽孢杆菌降解聚丙烯塑料的机理、进一步升级改造全细胞降解体系、实现废弃聚丙烯塑料高效绿色降解及回收利用提供科学依据。; 唐静彭圣娟顾卫华白建峰赵静马倩; 关键词：聚丙烯枯草芽孢杆菌生物降解

组合策略提高碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌中的表达: 2025年; 为了促进Shouchella clausii来源的碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB800n宿主中的高效表达,首先选择3个单启动子替换原始启动子P_(43),其中单启动子P_(amyQ)介导的重组菌经发酵后酶活力最高,为1959 U/mL。其次,通过构建双启动子表达系统发现P_(43)-P_(amyQ)使酶活力进一步提升到2215 U/mL。接着对启动子P_(43)-P_(amyQ)的核心区域(-35和-10区)进行优化,其中Mutant-2的酶活力高达2788 U/mL,是原始菌株酶活力(1746 U/mL)的1.60倍。在此基础上,通过枯草芽孢杆菌内源信号肽替换,筛选得到的带有信号肽SPmpr的重组菌的酶活力进一步提高到4007 U/mL,与信号肽优化前相比提高了43.72%,是出发菌株酶活力的2.30倍。研究结果表明,启动子优化和信号肽筛选的组合策略显著提高了碱性蛋白酶在枯草芽孢杆菌中表达量,为后续研究与应用奠定了基础。; 温树森吴昌正侯莎韦晓群; 关键词：碱性蛋白酶枯草芽孢杆菌异源表达启动子信号肽

枯草芽孢杆菌对鲜切山药细菌群落的影响: 2025年; 【目的】预处理山药时,去除表皮和切片会损伤组织,导致微生物侵入和营养流失,加速腐烂。目的是提升鲜切山药的保存质量。【方法】使用枯草芽孢杆菌处理鲜切山药,并以未处理的山药作为对照,研究冷藏下枯草芽孢杆菌对山药菌落总数的影响。同时,利用高通量测序技术分析了贮藏期间山药的微生物群落和多样性。【结果】结果表明枯草芽孢杆菌对鲜切山药储藏过程中的腐败菌具有较好的抑菌作用。【结论】明确了微生物拮抗菌对鲜切山药的贮藏保鲜功效,为鲜切山药的微生物拮抗保鲜提供理论依据。; 周婧; 关键词：山药枯草芽孢杆菌拮抗储藏鲜切

枯草芽孢杆菌发酵蟹壳产蛋白酶的研究: 2025年; 本文通过单因素以及响应面试验优化枯草芽孢杆菌发酵蟹壳产蛋白酶的发酵条件。结果表明,枯草芽孢杆菌发酵蟹壳产蛋白酶的最优发酵条件为接种量18%、发酵温度40℃、培养基初始pH=9.0、发酵时间48 h、装液量120 mL。在此条件下,蛋白酶的酶活力为183.53 U·mL^(-1)。; 陈静颖陶玉贵葛飞谷燕; 关键词：枯草芽孢杆菌蛋白酶发酵蟹壳

menD表达强度对枯草芽孢杆菌中维生素K2产量的影响: 2025年; 维生素K2(Vitamin K2,MK)是一种重要的天然化合物,在治疗多种疾病方面都有着重要的作用。为探究枯草芽孢杆菌甲萘醌途径中关键基因menD表达量的不同对于细菌生长、生物膜形态与MK合成的影响,以枯草芽孢杆菌168(Bacillus subtilis 168,BS168)为出发菌株,构建BS168-ΔmenD、BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株,使用HPLC检测菌株中MK的含量,使用western-blot检测蛋白质的表达强度,以确定menD在枯草芽孢杆菌中对于MK合成的作用。研究发现,BS168-ΔmenD菌株生长缓慢,无法很好的产生生物膜,在培养基中需要添加甲萘醌标准品细胞才能生长;BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD突变菌株的生物膜和MK的含量与原始菌株都有较为显著的差异。静态发酵时,孔板中重组菌株BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD生物膜的形成量和褶皱程度相较于原始菌株得到较大的提升,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD重组菌株的生物膜形成量分别为原始菌株的1.36倍与1.59倍,同时,BS168-P_(43)-menD、BS168-P_(xylA)-menD MK产量分别为原始菌株的1.64倍和1.87倍,BS168-P_(xylA)-menD的最大产量达39.27 mg/L。结果表明,作为枯草芽孢杆菌中MK合成途径的关键酶,menD的表达量是影响枯草芽孢杆菌中生物膜与MK形成的重要因素。; 黄俊宝黄茜琳陈宇高旭丽罗雅妮陶伟郭明雨刘永圆吴晶刘艳; 关键词：枯草芽孢杆菌维生素K2 启动子菌株选育

CRISPRCas系统在枯草芽孢杆菌基因组编辑中的研究进展: 2025年; 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是一种食品安全级微生物,现已广泛应用于工业发酵。CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)介导的基因组编辑技术在以枯草芽孢杆菌为底盘细胞的微生物代谢工程研究中发挥了重要作用。介绍了CRISPR‐Cas系统的免疫应答机制和分类以及枯草芽孢杆菌中CRISPR-Cas9基因组编辑的3种类型,重点总结了最新的CRISPR开发和设计策略,以期为优化现有的枯草芽孢杆菌基因组编辑系统提供参考,从而提高枯草芽孢杆菌的工业化应用潜能。; 孙志康李力群郝捷吴晗吴娜郑超季嫱李选文陈晨; 关键词：枯草芽孢杆菌

枯草芽孢杆菌发酵对花生蛋白抗原性的影响: 2025年; 为了探究枯草芽孢杆菌固态发酵降低花生蛋白抗原性的机理,采用间接竞争ELISA法测定蛋白抗原性、茚三酮比色法测定蛋白水解度、SDS-PAGE测定蛋白分子量,利用红外、紫外、荧光光谱分析花生蛋白结构变化对其抗原性的影响。结果表明:枯草芽孢杆菌固态发酵能够使花生蛋白发生显著降解,抗原性降低了67.61%,花生蛋白中主要过敏原Ara h 3抗原性降低了55.03%;发酵72 h花生蛋白水解度为9.40%,分子量小于15 kDa的蛋白含量显著增加;发酵后花生蛋白二级结构相对含量发生变化,α-螺旋和β-转角含量降低;蛋白结构逐渐展开,发酵48 h后微生物酶解作用减弱且部分蛋白发生聚合。枯草芽孢杆菌固态发酵可以通过改变花生蛋白结构破坏抗原表位,从而降低花生蛋白抗原性。; 陈屹轩布冠好杨趁仙辛颖段晓杰李梦瑶; 关键词：枯草芽孢杆菌发酵花生蛋白抗原性蛋白结构

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