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异莲心碱通过PI3K/Akt/mTOR信号通路影响结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬: 2024年; 目的:探讨异莲心碱(Iso)通过PI3K/Akt/mTOR信号通路对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡和自噬的影响。方法:用10、20和40μmol/L的Iso处理结肠癌SW480细胞,CCK-8法、流式细胞术和WB法分别检测Iso对细胞增殖活力、凋亡和自噬相关蛋白LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62表达的影响。然后,用20μmol/L的Iso和25μmol/L的PI3K激活剂740 Y-P分别处理SW480细胞,将细胞分为对照组、740 Y-P组、Iso组和Iso+740 Y-P组,流式细胞术、WB法检测Iso和740 Y-P对各组细胞凋亡及细胞中LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、p62、PI3K、p-PI3K、mTOR和p-mTOR蛋白表达的影响。结果:10、20和40μmol/L的Iso处理后,SW480细胞增殖活力均显著下降(均P<0.05),细胞凋亡率均显著升高(均P<0.05),LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著上调(均P<0.05),p26蛋白表达显著下调(P<0.05)。Iso和740 Y-P处理后,与对照组相比,740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达均显著下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05);Iso组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与740 Y-P组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达升高(P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著下降(均P<0.05);与Iso组相比,Iso+740 Y-P组细胞凋亡率、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达下降(均P<0.05),p26、p-PI3K/PI3K和p-mTOR/mTOR表达均显著升高(均P<0.05)。结论:Iso通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导细胞凋亡和自噬。; 王湘宁张金华江娜刘志平徐莹; 关键词：异莲心碱结肠癌 SW480细胞增殖凋亡自噬

贝母素乙通过下调CDK2/CDK4/CDK6和cyclin D1表达抑制人结肠腺癌SW480细胞活力: 2024年; 目的:探究贝母素乙(peiminine)对人结肠腺癌细胞(SW480)活力、迁移和侵袭的抑制作用并探讨其抑制SW480增殖的作用机制。方法:用不同剂量的贝母素乙处理人结肠腺癌细胞SW480和人正常结肠上皮细胞CCD-841CoN,通过CCK-8实验确定贝母素乙抑制SW480活力的最适剂量和最佳作用时间;划痕和Transwell实验检测贝母素乙对SW480迁移与侵袭能力的影响;流式细胞术和Western blot检测贝母素乙对SW480细胞周期及细胞周期相关蛋白表达的影响;构建SW480移植瘤裸鼠模型,在体内分析贝母素乙对SW480活力及细胞周期相关蛋白表达的影响。结果:与对照组相比,当贝母素乙作用浓度为110 mg/L时能够显著抑制SW480细胞活力、迁移和侵袭能力(P<0.01),并诱导SW480细胞周期G1期阻滞,周期相关蛋白细胞周期蛋白依赖性激酶2(CDK2)、CDK4、CDK6、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)、p-Rb/Rb、E2F1、E2F3和E2F4的表达水平受到显著抑制(P<0.05);在体内,贝母素乙抑制SW480移植瘤的活力、延长荷瘤裸鼠的生存周期,影响肿瘤组织中CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达。结论:贝母素乙通过下调CDK2、CDK4、CDK6和cyclin D1的表达,引起SW480细胞的G1期阻滞,进而抑制人结肠腺癌细胞SW480增殖。; 杨霞李雅茹李玥毛泓月白冰李一权韩继成万怡宁谢诗敏朱羿龙金宁一; 关键词：SW480细胞贝母素乙周期蛋白依赖性激酶

银杏叶提取物对结肠癌患者SW480细胞增殖的影响: 2023年; 目的分析银杏叶提取物对结肠癌患者SW480细胞增殖的影响。方法选择2022年1—12月新疆五家渠第六师总医院的10份结肠癌标本为研究对象,并对SW480细胞标本进行体外培养,然后实施100、200、300、400、500 mg/L浓度的银杏叶提取物进行反应,并通过CCK-8对人结肠癌SW480细胞的增殖抑制率进行检测,对比干预不同浓度的干预效果。结果空白对照组的吸光度为(1.125±0.139),100、200、300、400、500 mg/L浓度银杏叶提取物处理后的吸光度分别为(1.145±0.214)、(0.943±0.018)、(0.616±0.017)、(0.571±0.039)、(0.508±0.014),200、300、400、500 mg/L浓度时的吸光度与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=4.106、11.474、12.135、13.966,P<0.05)。空白对照组的抑制率为(0.002±0.001)%,100、200、300、400、500 mg/L浓度银杏叶提取物处理后的抑制率分别为(3.020±0.124)%、(12.500±1.242)%、(40.000±4.252)%、(43.100±4.626)%、(45.200±4.252)%,分别与空白对照组比较,差异有统计学意义(t=76.963、31.821、29.747、29.461、33.614,P<0.05)。100、200、300、400、500 mg/L浓度银杏叶提取物处理后的活性氧(reactive oxygen species,ROS)、X连锁凋亡抑制蛋白(X-linked inhibitor of apoptosis protein, XIAP)mRNA表达水平与空白对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论银杏叶提取物可对结肠癌SW480细胞的增殖表现为浓度依赖性地抑制。; 关毅畅立强; 关键词：银杏叶提取物结肠癌 SW480 细胞增殖

PMS2通过ERK/ERCC1通路对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响: 2023年; 目的:探讨减数分裂后分离蛋白2(PMS2)表达对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响,阐明PMS2与切除修复交叉互补组1(ERCC1)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的关系。方法:将PMS2 siRNA质粒和PMS2过表达质粒分别转染入结肠癌SW480细胞(分别为PMS2敲减组和PMS2过表达组),同时设PMS2敲减对照组(siRNA-NC组)和PMS2过表达对照组(PMS2 control组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中PMS2 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中PMS2蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数,流式细胞术检测顺铂作用后各组细胞凋亡率。通过String数据库,对PMS2、ERCC1和ERK上下游蛋白的关系进行生物信息学分析。SW480细胞分别采用3条siRNA进行PMS2和ERCC1敲减,采用RT-qPCR法验证PMS2与ERCC1的相互作用,采用Western blotting法检测各组细胞中PMS2、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法和Western blotting法检测,PMS2基因敲减和过表达细胞模型构建成功。与siRNA-NC组比较,PMS2敲减组细胞增殖活性和细胞迁移率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01),顺铂作用后细胞凋亡率明显降低(P<0.01);与PMS2 control组比较,PMS2过表达组细胞增殖活性和细胞迁移率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),顺铂作用后细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。蛋白-蛋白互作(PPI)富集P值为2.09e-07,包含ERCC1和ERK1/2等相互作用节点数共有13个,提示PMS2、ERCC1和ERK1/2之间可能存在调控作用。与siRNA-NC组比较,各PMS2敲减组细胞中ERCC1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01);与siERCC1-NC组比较,各ERCC1敲减组细胞中PMS2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与siRNA-NC组比较,PMS2敲减组细胞中PMS2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平均�; 黄雪茹丁绪浩陈素贤谭琦吴月明牛晓敏王亚帝佟青; 关键词：SW480细胞

山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制: 2023年; 目的探讨山慈菇提取物对人结直肠癌SW480细胞迁移和侵袭能力的影响及其分子机制。方法选择人结直肠癌SW480细胞株,分为空白对照组,不同浓度山慈菇组(200 mg·L^(-1)、400 mg·L^(-1)),5-Fu组(10μmol·L^(-1)),分别进行划痕实验、细胞增殖抑制实验、细胞迁移与侵袭实验。同时,通过细胞转染技术沉默SW480细胞中的AEG-1基因,采用Western blotting检测AEG-1基因沉默对SW480细胞AEG-1、E-cadherin、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响,并观察不同浓度山慈菇组各蛋白表达的变化。结果不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞的划痕愈合率、细胞迁移率及侵袭率均较空白对照组明显下降,而细胞生长增殖抑制率较空白对照组明显升高(P<0.05);山慈菇提取物具有与5-Fu相似的抑制结直肠癌细胞增殖和侵袭的效果,且与SW480细胞的迁移与侵袭率呈浓度依赖性,与细胞增殖抑制率呈浓度、时间依赖性;不同浓度山慈菇组和5-Fu组SW480细胞中AEG-1、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平均显著降低,E-cadherin蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。结论山慈菇提取物可能通过抑制AEG-1蛋白表达来上调E-cadherin蛋白表达,下调MMP-2、MMP-9蛋白表达,从而抑制人结直肠癌SW480细胞的迁移与侵袭。; 钟海川杨永强李可珍王彩丽彭亮; 关键词：结直肠癌山慈菇 SW480细胞迁移分子机制

CDK7抑制剂THZ1对人结直肠癌SW480细胞增殖、迁移及凋亡的影响: 2023年; 目的探究细胞周期蛋白依赖性激酶7(Cyclin-Dependent Kinase 7,CDK7)抑制剂THZ1(CDK7共价抑制剂)对人结直肠癌SW480细胞增殖、迁移及凋亡的影响。方法通过体外培养人结直肠癌细胞系SW480细胞,CCK8法测定细胞增殖活力以筛选THZ1对SW480细胞的作用浓度。将SW480细胞分为对照组(加入相应体积的DMSO)、低、中、高浓度组(处理后THZ1药物浓度为20、80、160 nmol/L)。平板克隆实验法检测细胞克隆能力测定THZ1对SW480细胞克隆形成的影响;划痕实验分别测定THZ1对SW480细胞迁移能力的影响,TUNEL法检测细胞凋亡情况;蛋白质印迹法检测CDK-7、p-CDK7、Bax、Bcl-2、Mcl-1、Parp蛋白表达水平。结果SW480细胞增殖抑制率在药物浓度大于80 nmol/L时显著升高(P<0.05),低、中、高浓度组SW480细胞克隆能力低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),低浓度组的划痕愈合率低于对照组,中浓度组的划痕愈合率低于对照组,高浓度组的划痕愈合率低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),低、中、高浓度组的凋亡率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),高浓度组CDK-7、p-CDK7、Bcl-2、Mcl-1蛋白表达水平低于对照组,高浓度组Bax、Parp蛋白表达水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。说明THZ1可促进SW480细胞凋亡,抑制其增殖和迁移。结论CDK7抑制剂THZ1可以抑制人结直肠癌SW480细胞增殖和迁移能力,并诱导细胞凋亡。; 王建哲赵奇于伟光贾信奇赵岩松李敏捷范东姜浩; 关键词：结直肠癌 SW480细胞凋亡增殖

红景天苷调节AMPK/mTOR/ULK1信号通路对结肠癌SW480细胞裸鼠的肝脏损伤的影响被引量：1: 2023年; 目的:探讨红景天苷(Sal)调节单磷酸腺苷活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)/Unc51样激酶1(ULK1)信号通路对结肠癌SW480细胞裸鼠肝脏损伤的影响。方法:通过皮下注射SW480细胞悬浮液建立肝转移裸鼠模型,将造模后的裸鼠随机分为模型组、Sal低剂量(Sal-L,50 mg/kg Sal)组、Sal中剂量(Sal-M,100 mg/kg Sal)组、Sal高剂量(Sal-H,200 mg/kg Sal)组,Sal-H+AMPK抑制剂(Compound C,200 mg/kg Sal+10 mg/kg Compound C)组,以未接种SW480细胞悬液的裸鼠作为对照组。腹部主动脉取血,检测裸鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(AST)、天冬氨酸氨基转移酶(ALT)水平;处死裸鼠,检测肝转移瘤数目及肝脏重量;HE染色观察肝脏组织病理变化;qRT-PCR检测肝脏组织中AMPK、mTOR、ULK1 mRNA表达水平;Western blot检测肝脏组织中自噬(Beclin1、p62)蛋白及通路相关蛋白表达。结果:与对照组相比,模型组裸鼠组织中出现肝转移瘤,肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1mRNA、p62表达显著增加(P<0.05);Beclin1、AMPKmRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05);与模型组相比,Sal-L、Sal-M、Sal-H组肝转移瘤数目、肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1 mRNA、p62表达显著降低(P<0.05);Beclin1、AMPK mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.05);与Sal-H组相比,Sal-H+Compound C组肝转移瘤数目、肝脏重量、AST、ALT水平、mTORmRNA、ULK1mRNA、p62表达显著增加(P<0.05);Beclin1、AMPKmRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论:Sal可通过减少裸鼠肝转移瘤形成,保护裸鼠肝脏,其机制可能与激活AMPK/mTOR/ULK1信号通路,促进肝脏自噬有关。; 王浩刘志毅张斌曹宽王人颢; 关键词：红景天苷裸鼠

Spondin-2基因沉默对人结直肠癌SW480细胞的侵袭及上皮-间充质转化能力的影响: 2023年; 目的探讨Spondin-2(SPON2)基因沉默对人结直肠癌SW480细胞侵袭及上皮-间充质转化(EMT)能力的影响。方法体外培养人结直肠癌SW480细胞, 对细胞进行慢病毒转染, 并将细胞分为对照组、阴性转染组和shSPON2转染组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)法检测各组细胞中Spondin-2 mRNA的表达;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测培养24、48、72 h后各组细胞增殖情况, Transwell法检测培养48 h后各组细胞侵袭情况;蛋白免疫印迹法检测培养48 h后各组细胞中蛋白细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)、pERK1/2、含ETS域蛋白1(ELK-1)、pELK-1及EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)的表达。研究数据采用单因素方差分析进行比较。结果 shSPON2转染组SPON2 mRNA表达水平(0.43±0.04)低于对照组(1.00±0.05, t=21.805, P<0.05), 低于阴性转染组(0.97±0.03, t=26.454, P<0.05)。培养24、48、72 h后, 3组间同一时间吸光度(A)值比较, 差异有统计学意义(F=27.982、31.052、28.484, P<0.05)。同一时间下, 与对照组比较, shSPON2转染组细胞A值降低, 且低于阴性转染组(P<0.05)。shSPON2转染组SW480细胞侵袭数目[(55.93±11.24)个]低于对照组[(118.75±19.61)个, t=6.808, P<0.05], 低于阴性转染组[(105.87±15.36)个, t=6.427, P<0.05]。3组间SW480细胞蛋白pERK1/2、pELK-1表达水平比较, 差异有统计学意义(F=357.899、339.313, P<0.05)。与对照组比较, shSPON2转染组细胞蛋白pERK1/2、pELK-1表达降低, 且低于阴性转染组(P<0.05)。3组间E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达水平比较, 差异有统计学意义(F=316.867、533.522、416.446, P<0.05)。与对照组比较, shSPON2转染组细胞蛋白E-cadherin表达升高, N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低(P<0.05)。结论 SPON2基因沉默能够抑制SW480细胞增殖、侵袭, 抑制EMT过程, 可能与ERK/ELK-1信号通路的抑制有关。; 周全博徐纪中袁维堂; 关键词：基因沉默结直肠癌 SW480 上皮-间充质转化

低密度脂蛋白受体相关蛋白11在结直肠癌组织中的表达及其对SW480细胞增殖与凋亡的影响: 2023年; 目的:探讨低密度脂蛋白受体相关蛋白11(LRP11)在结直肠癌(CRC)组织中的表达及其对结肠癌SW480细胞增殖与凋亡的影响。方法:利用生物信息学方法分析TCGA数据库中LRP11在CRC组织中的表达水平。用慢病毒感染技术分别将sh-LRP11及sh-NC质粒转染至SW480细胞,采用qPCR、WB法检测感染后各组细胞中LRP11的mRNA和蛋白的表达,CCK-8法、流式细胞术分别检测细胞的增殖活力、凋亡率及细胞周期分布情况,WB法检测SW480细胞中cyclin D1、BAX、Bcl-2、β-catenin、活化β-catenin等蛋白的表达水平。结果:TCGA数据库数据分析显示,LRP11 mRNA在CRC组织中的表达水平显著高于正常组织(P<0.05)。与sh-NC组比较,sh-LRP11组SW480细胞的增殖活力明显降低、细胞凋亡率显著升高(均P<0.01),细胞中BAX表达显著升高、Bcl-2表达显著降低(均P<0.01);G0/G1期细胞增多、S期细胞明显减少(均P<0.01),cyclin D1的蛋白表达显著降低(P<0.01);Wnt/β-catenin信号通路中β-catenin和活化β-catenin的蛋白表达均显著下降(均P<0.01)。结论:LRP11 mRNA在CRC组织中呈高表达,干扰LRP11表达可抑制结肠癌SW480细胞增殖并促进其凋亡,为CRC提供了一种潜在的治疗靶点。; 李建凯朱小辉何佳欣杨晨晖贾彭松王嘉毅李咏; 关键词：结直肠癌 SW480细胞增殖凋亡 WNT/Β-CATENIN信号通路

METTL3修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin轴调控结直肠癌SW480细胞的恶性生物学行为: 2023年; 目的:探究甲基转移酶样蛋白3(METTL3)修饰的RNASEH1-AS1通过BUD13/膜联蛋白A2/Wnt/β-连环蛋白(BUD13/ANXA2/Wnt/β-catenin)轴调控结直肠癌细胞SW480恶性生物学行为的分子机制。方法:选取2022年6月至2022年11月间在复旦大学附属中山医院厦门医院手术治疗的24例CRC患者,收集患者的CRC组织和对应的癌旁组织,用qPCR法检测其中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2、β-catenin、GSK-3β mRNA的表达,用Pearson法分析CRC组织中RNASEH1-AS1表达分别与METTL3和BUD13表达的相关性。常规培养结直肠癌细胞SW480,分为sh-NC组、sh-RNASEH1-AS1组、NC组、sh-METTL组、si-NC组、si-BUD13组、sh-RNASEH1-AS1+pc-NC组、sh-RNASEH1-AS1+pc-ANXA2组、sh-METTL+pc-NC组、sh-METTL+pc-ASEH1-AS1组,用Lipofectamine?2000转染试剂将sh-NC、sh-RNASEH1-AS1、sh-NC、sh-METTL、si-NC、si-BUD13、sh-RNASEH1-AS1+pc-NC、sh-RNASEH1-AS1+pc-ANXA2、sh-METTL+pc-NC、sh-METTL+pc-ASEH1-AS1分别转染SW480细胞,用qPCR法检测后SW480细胞中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2的表达,细胞克隆形成实验检测转染后各组SW480细胞的增殖能力,FCM术检测转染后各组SW480细胞的凋亡情况,细胞划痕实验检测转染后各组SW480细胞的迁移能力,WB法检测转染后各组SW480细胞中ANXA2、β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β、c-Myc、cyclinD1蛋白表达,RNA免疫沉淀(RIP)法检测RNASEH1-AS1与BUD1、BUD1与ANXA2的靶向关系。结果:数据库CRC数据分析和中国人CRC组织和癌旁组织的qPCR法检测结果均显示,与癌旁组织相比CRC组织中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2、β-catenin、GSK-3β均呈明显高表达(均P<0.01),且RNASEH1-AS1表达与METTL3(r=0.698,P<0.01)、BUD13(r=0.784,P<0.01)的表达呈正相关。在结直肠癌各细胞中METTL3、RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2 mRNA均呈高表达(均P<0.05);敲减RNASEH1-AS1或METTL3后SW480细胞中RNASEH1-AS1、BUD13、ANXA2表达显著降低(均P<0.05),而过表达RNASEH1-AS1后上述分子表达明显上调(均P<0; 庄盛威吴志荣张秀萍黄哲昆张勇; 关键词：结直肠癌 SW480细胞膜联蛋白A2

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