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生存素、人类表皮生长因子受体2、巨囊性病液体蛋白15、Yes相关蛋白表达对乳腺癌患者术后复发转移的预测价值
2025年
目的:研究生存素(Survivin)、人类表皮生长因子受体2(HER-2)、巨囊性病液体蛋白15(GCDFP15)、Yes相关蛋白(YAP)表达对乳腺癌患者术后复发转移的预测价值。方法:收集156例经乳腺癌改良根治术治疗的乳腺癌患者乳腺癌病理组织及癌旁正常组织,比较乳腺癌患者癌组织和癌旁正常组织Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白表达情况;所有患者术后均随访2年,根据患者术后随访期间复发转移情况将其分为Ⅰ组(51例)和Ⅱ组(105例),统计两组一般资料,比较两组癌组织Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白表达情况,分析乳腺癌患者术后2年内复发转移的影响因素及癌组织Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白单一及联合检测对乳腺癌患者术后2年复发转移的预测价值。结果:癌组织Survivin、HER-2、GCDFP15阳性表达率高于正常组织,YAP阳性表达率低于正常组织(均P<0.05)。Ⅰ组低分化、临床分期Ⅲ期患者占比高于Ⅱ组(均P<0.05)。Ⅰ组癌组织Survivin、HER-2、GCDFP15阳性表达率高于Ⅱ组,YAP阳性表达率低于Ⅱ组(均P<0.05)。分化程度为低分化、临床分期Ⅲ期及Survivin、HER-2、GCDFP15蛋白阳性表达均为乳腺癌患者术后2年内复发转移的独立危险因素(OR=2.092、1.992、2.059、1.815、1.857,均P<0.05);YAP蛋白阳性表达为乳腺癌患者术后2年内复发转移的保护因素(OR=0.489,P<0.05)。癌组织Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白联合预测乳腺癌患者术后2年复发转移的曲线下面积(AUC)值高于四者单独检测(均P<0.05)。结论:乳腺癌的发生与Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白表达情况有关,且患者术后2年复发转移的发生与其分化程度、临床分期及Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白表达情况有关,同时Survivin、HER-2、GCDFP15、YAP蛋白联合可有效提高对乳腺癌患者术后2年复发转移的预测价值。
卜烨张晨洁
关键词:生存素人类表皮生长因子受体2复发
Yes关联蛋白1在食管鳞状细胞癌中的临床意义
2024年
目的探讨Yes关联蛋白1(Yes-associated protein 1,YAP1)在食管鳞状细胞癌组织中的表达情况及临床意义。方法采用免疫组化技术检测439例食管鳞状细胞癌患者癌组织中YAP1的表达,分析YAP1阳性组与阴性组患者的临床病理参数差异。采用Kaplan-Meier生存曲线分析YAP1对患者生存的影响。结果食管鳞状细胞癌中,YAP1的阳性率为30.52%(134/439)。YAP1阳性组患者肿瘤浸润更深(P<0.001)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,在生存期长于30个月的患者中,YAP1阳性者无瘤生存期(disease-free survival,DFS)和总生存期(overall survival,OS)更长(P<0.05)。Cox多因素回归分析显示,浸润深度是影响患者DFS(HR=1.371,95%CI 0.993~1.894,P=0.035)和OS(HR=1.489,95%CI 1.066~2.080,P=0.020)的独立因素。结论YAP1在部分食管鳞状细胞癌中表达;对于生存期大于30个月的患者,YAP1表达阳性提示预后更好。
刘坤管瑛瑛蒋冬先许惠娟侯英勇侯君
关键词:食管鳞状细胞癌预后
Yes相关蛋白对脂肪移植存活率的影响及其机制研究
2024年
目的探究Yes相关蛋白(YAP)对脂肪移植存活率的影响及其可能的作用机制。方法体外培养3T3-L1细胞,分别用YAP siRNA和带有慢病毒载体的YAP过表达质粒进行处理,分为阴性对照siRNA(NC)组、YAP-si1组、YAPsi2组、YAP-si3组,慢病毒载体(Vector)组、YAP过表达(YAP)组。通过EdU检测细胞增殖活性,然后诱导3T3-L1细胞成脂分化,在细胞分化的早期和晚期,油红O染色观察脂肪细胞内脂滴的积聚并使用Image-pro plus6.0软件进行统计,利用甘油三酯检测试剂盒检测细胞的甘油三酯含量,利用PCR和Western blot检测成脂分化相关基因和蛋白的表达。在体内实验中,构建裸鼠皮下脂肪移植模型,8只小鼠随机分为阴性对照siRNA(NC)组、YAP敲低(si-YAP)组,腺相关病毒(AAV)载体组、YAP过表达(AAV-YAP)组,每组2只。每只小鼠在4个不同部位各注射0.2 mL脂肪,总注射量为0.8 mL。然后在各组的脂肪局部分别注射0.2 mL等体积NC siRNA、YAP siRNA、腺相关病毒载体或腺相关病毒载体介导的YAP过表达质粒。在移植后1、2、4周收集移植脂肪,称量脂肪质量和体积,评估移植后脂肪的存活率,并用HE染色和免疫荧光染色观察脂肪结构、油囊数量、存活脂肪细胞数量。结果细胞实验结果显示,与对照组相比,YAP敲低组的3T3-L1细胞的增殖活性与凋亡比例无明显变化,油红O染色面积增加(P<0.05),甘油三酯含量增加(P<0.05),成脂分化相关基因和蛋白表达增加(P<0.05)。反之,与慢病毒载体组相比,过表达YAP组的3T3-L1细胞的增殖活性增加,凋亡比例无明显变化,油红O染色面积减少(P<0.05),甘油三酯含量降低(P<0.05),成脂分化相关基因和蛋白表达降低(P<0.05)。体内实验结果显示,相比NC组,si-YAP组脂肪的质量和体积增加,脂肪结构更加完整,油囊数量减少,存活脂肪细胞增多。而相比AAV载体组,AAV-YAP组脂肪的质量和体积减少,脂肪结构完整性降低,油囊数量增加,存活脂�
刘雨欣孙佳铭余力
关键词:自体脂肪移植成脂分化
Yes相关蛋白在电离辐射后表皮干细胞分化中的作用
2024年
目的探讨Yes相关蛋白(YAP)在电离辐射(IR)后表皮干细胞(EPSC)分化中的作用。方法①利用打孔器建立小鼠背部皮肤损伤,随后分为IR组(给予^(60)Coγ射线局部照射),对照组(不照射);照射后0,1,3,6,9和12 d收集创面皮肤组织提取RNA和蛋白,Western印迹法检测创面愈合过程中YAP蛋白变化;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测创面愈合过程中Yap及其下游靶基因结缔组织生长因子(Ctgf)和富含半胱氨酸蛋白61(Cyr61)的mRNA变化。②将EPSC给予60Coγ射线照射,细胞对照组不照射;4或8 Gy剂量照射后4,12,24和36 h收集细胞提取RNA,RT-qPCR检测YAP mRNA变化。4或8 Gy剂量照射36 h收集细胞提取蛋白,Western印迹法检测YAP蛋白水平;③短发夹RNA(shRNA)构建稳定的YAP基因敲低细胞,Western印迹法验证shYAP的敲低效率;RT-qPCR检测IR后YAP敲低对K1和K10 mRNA的影响。结果①与对照组相比,IR组小鼠在创面愈合过程中YAP蛋白水平显著降低(P<0.05,P<0.01),Yap及其下游靶基因Ctgf和Cyr61的mRNA水平显著降低(P<0.05,P<0.01)。②与细胞对照组相比,IR组细胞YAP mRNA和蛋白水平显著降低(P<0.01)。③在shYAP稳转细胞中,YAP蛋白水平显著降低(P<0.01);shYAP在IR后EPSC分化标志物K1和K10的mRNA水平明显降低(P<0.01)。结论YAP调控IR后创面愈合过程中EPSC的分化。
王丽彬陈俊飞袁方王景泽刘鹿王学武袁增强
关键词:电离辐射表皮干细胞细胞分化
下调Yes相关蛋白1表达对食管癌细胞增殖与侵袭的影响
2024年
目的探讨下调Yes相关蛋白1(YAP1)表达对食管癌细胞增殖与侵袭的影响。方法实时荧光定量-聚合酶链反应(Real-time PCR)及蛋白质印迹法(Western blot)检测小干扰RNA(siRNA)YAP1-1、2、3的转染效果,将细胞分为control组和siRNA组。噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力,细胞克隆形成实验检测细胞克隆能力,流式细胞术检测细胞凋亡,Tanswell实验检测细胞侵袭能力,Western blot检测B淋巴细胞瘤-2基因(bcl-2)、bcl-2相关蛋白X(bax)、p53、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、c-Fos、c-Jun及p-c-Jun氨基末端激酶(JNK)表达。组间比较采用t检验。结果siRNA-YAP1-1、2、3组中YAP1 mRNA表达量低于control组(0.75±0.04、0.45±0.01、0.31±0.01比1.00±0.08,t=5.621、6.324、6.897,P<0.05)。siRNA-YAP1-1、2、3组中YAP1蛋白表达量低于control组(0.62±0.03、0.34±0.01、0.20±0.01比0.94±0.07,t=5.904、6.561、6.438,P<0.05)。选择siRNA-YAP1-3作为后续实验研究对象。siRNA组细胞活力(0.35±0.01比0.58±0.04,t=5.761,P<0.05)、细胞克隆数目[(35.67±3.54)个比(189.65±12.64)个,t=6.549,P<0.05]、细胞侵袭数目[(34.76±2.45)个比(164.38±10.41)个,t=6.341,P<0.05]、bcl-2(0.89±0.07比0.32±0.02,t=5.967,P<0.05)、MMP-2(0.92±0.07比0.37±0.02,t=6.214,P<0.05)及MMP-9(1.09±0.08比0.38±0.02,t=6.287,P<0.05)蛋白表达量低于control组。siRNA组细胞早期凋亡率[(21.57±1.68)%比(2.47±0.02)%,t=5.689,P<0.05]、晚期凋亡率[(17.42±1.36)%比(3.26±0.02)%,t=6.236,P<0.05)、bax(0.25±0.01比0.94±0.06,t=6.325,P<0.05)、p53(0.33±0.02比0.87±0.07,t=6.761,P<0.05)、c-Jun(0.36±0.02比1.05±0.08,t=6.698,P<0.05)、c-Fos(0.35±0.02比0.62±0.04,t=5.749,P<0.05)及p-JNK(0.26±0.02比1.02±0.08,t=6.325,P<0.05]蛋白表达量高于control组。结论下调YAP1表达可能通过激活JNK信号通路抑制EC109食管癌细胞的增殖与侵袭。
肖华卫张钊刘磊
关键词:食管癌C-JUN氨基末端激酶增殖
Yes相关蛋白调控肺动脉平滑肌细胞增殖的分子机制
2024年
目的研究Yes相关蛋白(YAP)调控肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的分子机制。方法本研究为实验研究。选取健康SD大鼠,体质量70~80 g。培养大鼠PASMCs,根据是否给予S1P刺激将PASMCs分为S1P组和对照组,蛋白质印迹法检测细胞磷酸化YAP(p-YAP)和β-catenin、CyclinD1蛋白水平。按照转染control干扰小RNA(siRNA)或YAP siRNA后再给予S1P刺激的情况不同,将PASMCs分为对照组、S1P组、si+S1P组、si-YAP+S1P组,蛋白质印迹法检测各组细胞中β-catenin和CyclinD1的蛋白水平。按照转染control siRNA或β-catenin siRNA后再给予S1P刺激的情况不同,将PASMCs分为对照组、S1P组、si+S1P组、si-β-catenin+S1P组,蛋白质印迹法检测各组细胞中CyclinD1的蛋白水平。按照转染control siRNA或YAP siRNA或β-catenin siRNA后再给予S1P刺激的情况不同,将PASMCs分为对照组、S1P组、si+S1P组、si-YAP+S1P组和si-β-catenin+S1P组,BrdU掺入法检测各组细胞增殖情况。结果S1P组p-YAP水平低于对照组[(0.61±0.09)比(1.00±0.11),P=0.009],β-catenin和CyclinD1蛋白水平高于对照组[(1.98±0.14)比(1.00±0.10),(1.94±0.15)比(1.00±0.08),均P=0.001]。si-YAP+S1P组β-catenin、CyclinD1水平均低于S1P组[(1.15±0.09)比(1.95±0.12),(1.18±0.16)比(1.96±0.05),均P<0.01]。si-β-catenin+S1P组CyclinD1水平低于S1P组[(1.18±0.24)比(1.95±0.24),P<0.01]。S1P组细胞增殖率高于对照组[(169.69±12.85)%比(100.00±12.52)%,P<0.01],si-YAP+S1P组、si-β-catenin+S1P组细胞增殖率均低于S1P组[(126.33±14.56)%比(169.69±12.85)%,(128.10±15.25)%比(169.69±12.85)%,均P<0.01]。结论YAP/β-catenin/CyclinD1信号通路可以调控PASMCs增殖。
柯蕊和平张伟史文花张永红刘原
关键词:肺动脉高压肺动脉平滑肌细胞细胞增殖Β-CATENIN
基于非靶向代谢组学技术探讨Yes相关蛋白1改善马兜铃酸I诱导小鼠肝损伤的机制
2024年
目的基于非靶向代谢组学技术探讨Yes相关蛋白1(YAP1)改善马兜铃酸I(Aristolochic acid I,AAI)诱导小鼠肝损伤的机制。方法随机选取8只3周龄雄性肝细胞特异性Yap1基因敲除(基因型为Yap1^(Flox/Flox),Albumin-Cre,简称Yap1^(LKO))小鼠作为Yap1^(LKO)+AAI组,8只Yap1Flox对照小鼠作为Yap1^(Flox)+AAI组。2组小鼠均按照2.5 mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量腹腔注射AAI,连续14 d。采用鼠尾PCR法鉴定基因型;微板法测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;HE染色法观察肝脏组织病理变化;免疫组织化学法测定肝组织中YAP1蛋白表达情况。采用非靶向代谢组学方法分析肝脏组织差异代谢物,利用超高效液相色谱-四极杆-静电场轨道阱高分辨质谱联用技术分析样品,通过主成分分析(PCA)、偏最小二乘法判别分析(PLS-DA)和正交偏最小二乘法判别分析(OPLS-DA)筛选差异代谢物,利用HMDB数据库、METLIN数据库对代谢物进行鉴定,通过KEGG数据库对差异代谢物进行通路富集分析。结果(1)AAI诱导14 d,Yap1^(LKO)小鼠的体质量增长低于Yap1^(Flox)小鼠,但差异无统计学意义(P>0.05)。在第14天,与Yap1^(Flox)+AAI组比较,Yap1^(LKO)+AAI组小鼠血清中的ALT、AST酶活性明显升高(P<0.05),肝脏组织病理损伤明显加重。Yap1^(Flox)小鼠肝脏有YAP1蛋白阳性表达,而Yap1^(LKO)小鼠无YAP1蛋白阳性表达。(2)通过代谢组学分析共筛选出139种显著变化(VIP>1且P<0.05)的差异代谢物,与Yap1^(LKO)+AAI组小鼠相比,Yap1Flox+AAI组小鼠的62种肝脏代谢物上调,包括胆碱、牛磺酸、亚牛磺酸、α-亚麻酸、桐油酸、鹅去氧胆酸等;77种代谢物下调,包括甘油磷酸胆碱、L-磷脂酰胆碱、L-谷氨酰胺、L-丝氨酸、L-谷胱甘肽、5-甲硫腺、苯丙氨酸、6-磷酸葡萄糖、乳酸、尿酸苷等。KEGG富集通路主要有胆碱代谢、甘油磷脂代谢、胰岛素抵抗、谷胱甘肽代谢等。结论肝细胞特异性Yap1基�
薛玉李彩格刘一玮杨佳丽张智琴纪敬敏于琨石新丽
关键词:马兜铃酸I药物性肝损伤代谢组学小鼠
姜黄素调控Yes相关蛋白1对子宫内膜癌Warburg效应及生物学行为的影响
2024年
目的:观察姜黄素调控Yes相关蛋白1 (YAP1)对子宫内膜癌糖酵解Warburg效应及生物学行为的影响。方法:将HEC-1B细胞分为对照组、NC-YAP1组、si-YAP1组及低、中、高剂量组。对照组不做任何处理,NC-YAP1组转染NC-YAP1质粒,si-YAP1组转染si-YAP1质粒,低、中、高剂量组细胞分别用20、40、80μmol/L的姜黄素处理。试剂盒检测各组细胞葡萄糖消耗量及乳酸含量;CCK-8法检测各组细胞增殖能力;流式细胞术检测各组细胞周期与凋亡;划痕法检测各组细胞迁移能力;Transwell法检测各组细胞侵袭能力。蛋白质印迹(Western blot)法检测YAP1、乳酸脱氢酶-A (LDH-A)、己糖激酶2 (HK2)、丙酮酸激酶2 (PKM2)蛋白表达。结果:与对照组比较,NC-YAP1组YAP1蛋白相对表达水平、乳酸含量及葡萄糖消耗量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、细胞增殖抑制率、G0/G1期比例及S期比例、细胞凋亡率、划痕愈合率、细胞侵袭抑制率差异均无统计学意义(P>0.05),si-YAP1组及低、中、高剂量组YAP1蛋白相对表达水平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均升高(P<0.05)。与NC-YAP1组比较,siYAP1组及低、中、高剂量组细胞YAP1蛋白相对表达水平、葡萄糖消耗量及乳酸含量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均降低(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率细胞侵袭抑制率均升高(P<0.05),且低、中、高剂量组上述指标均呈剂量依赖性(P<0.05)。与si-YAP1组比较,低、中剂量组细胞中YAP1蛋白相对表达水平均增加(P<0.05),而高剂量组差异无统计学意义(P>0.05);低剂量组葡萄糖消耗量及乳酸分泌量、LDH-A、HK2、PKM2蛋白水平、S期比例、划痕愈合率均增加(P<0.05),细胞增殖抑制率、G0/G1期比例、细胞凋亡率、细胞侵袭抑制率均降低
胡颜霞宋晓霞张喜红
关键词:子宫内膜癌姜黄素
抑制Yes相关蛋白通过抑制上皮间质转化减轻CCl_(4)诱导的小鼠肝纤维化
2024年
目的探索Yes相关蛋白(YAP)可否通过调控上皮间质转化影响肝纤维化的发生发展。方法将8周龄C57BL/6小鼠18只随机分为对照组、肝纤维化模型组和YAP抑制剂维替泊芬干预组,6只/组。肝纤维化模型采用四氯化碳(CCl_(4))溶液腹腔注射8周造模;维替泊芬干预组在CCl_(4)基础上第7~9周采用维替泊芬腹腔注射干预。HE染色、Masson染色、肝脏生化学检测观察小鼠肝脏纤维化程度;转录组、蛋白组学测序及联合生信分析探明肝纤维化过程中上皮间质转化通路是否受YAP调控;免疫组化染色和Western blotting检测YAP及上皮间质转化关键基因E-cadherin、N-cadherin、Twist等表达变化。采集健康体检、慢性乙型肝炎、乙肝肝硬化患者血清各60例,酶联免疫吸附法检测其中YAP、N-cadherin、Vimentin、Twist血清表达水平。C57BL/6小鼠24只随机分为对照组、肝纤维化模型组、Twist抑制剂干预组和Twist抑制剂与YAP激动剂共同干预组,6只/组。HE染色、Masson染色、网状纤维染色观察小鼠肝脏纤维化程度,Western blotting检测各组α-SMA、YAP和Twist表达变化。结果小鼠肝组织病理学结果提示肝纤维化小鼠与对照组相比肝小叶结构破坏、假小叶形成,维替泊芬干预组纤维间隔变性,部分小叶结构恢复。随肝纤维化发生,血浆ALT、AST水平显著升高(P<0.01),维替泊芬干预组肝功能改善(P<0.01)。采用肝组织转录组、蛋白组测序及联合分析找到在肝纤维化形成和维替泊芬干预过程中同时在mRNA和蛋白水平差异表达的基因,发现了N-cadherin和Twist在3组间差异具有统计学意义(P<0.05),并进行PPI分析显示YAP与E-cadherin、N-cadherin存在关联。免疫组化和Western blotting结果提示N-cadherin、Twist、Vimentin随肝纤维化形成升高,E-cadherin在肝纤维化组织中表达下降(P<0.01)。抑制YAP可下调肝组织N-cadherin、Twist蛋白表达(P<0.01)。慢性乙型肝炎患者血清YAP、N-cadhe
赵文阮何静汪思远程羽哲雷淼赵久法刘传苗
关键词:肝纤维化上皮间质转化血清标志物
Yes相关蛋白(YAP)通过激活PI3K/AKT通路促进皮肤鳞状细胞癌细胞侵袭和迁移被引量:1
2024年
目的探讨Yes相关蛋白(YAP)在皮肤鳞状细胞癌(cSCC)中表达及与cSCC侵袭和迁移中的作用。方法通过免疫组织化学染色法检测cSCC、鲍温病(BD)、癌旁正常皮肤组织中YAP的表达水平,并分析与临床病理参数之间的关系;利用慢病毒转染构建YAP基因敲低的A431稳定细胞株,利用四甲基罗丹明标记的鬼笔环肽检测A431细胞微丝分布和数量,Transwell TM实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测A431细胞的迁移能力;免疫荧光细胞化学染色法观察敲低YAP后上皮间质转化(EMT)相关标志物上皮钙黏素(E-cadherin)、锌指转录因子Snail的表达;Western blot法检测E-cadherin、Snail、β-catenin、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化的蛋白激酶B(p-AKT)、核糖体蛋白S6(S6)、磷酸化S6(p-S6)、4E结合蛋白1(4EBP1)、磷酸化的4EBP1(p-4EBP1)的表达。结果YAP在cSCC和BD中表达显著高于癌旁正常皮肤组织;cSCC中YAP高表达与肿瘤大小、分化程度、侵袭程度密切相关,与患者的性别、年龄、发病部位、形态类型、是否神经脉管侵犯不相关;敲低A431细胞中YAP后,肿瘤细胞的侵袭、迁移能力降低,细胞微丝变细、伪足变少;E-cadherin表达增加,Snail和β-catenin蛋白表达降低,p-AKT、p-S6及p-4EBP1蛋白表达降低。结论YAP在cSCC中高表达,YAP激活PI3K/AKT信号通路促进cSCC的侵袭、迁移及EMT过程。
李珍玲杨凡金雪梅王雪妍陈胎琴权春姬
关键词:皮肤鳞状细胞癌

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冯丽君
作品数:43被引量:113H指数:6
供职机构:浙江大学医学院附属邵逸夫医院
研究主题:YES 营养支持 JCI标准 NO 营养风险筛查
刘春平
作品数:120被引量:10H指数:2
供职机构:邹平县第一实验小学
研究主题:PEP 年级 PART 单词 字母组合
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高天文
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