郑海红
所属机构: 中国农业科学院上海兽医研究所 所在地区: 上海市 研究方向: 农业科学 发文基金: 国家自然科学基金
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高飞 作品数:182 被引量:244 H指数:8 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所 研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征 非翻译区 非洲猪瘟病毒 袁世山 作品数:116 被引量:370 H指数:12 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所 研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 猪繁殖与呼吸综合征 非翻译区 反向遗传操作 孙志 作品数:42 被引量:62 H指数:4 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所 研究主题:PRRSV 反向遗传操作 非翻译区 感染性克隆 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 童光志 作品数:893 被引量:3,849 H指数:30 供职机构:中国农业科学院上海兽医研究所 研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 传染性喉气管炎病毒 重组鸡痘病毒 单克隆抗体 韦祖樟 作品数:191 被引量:390 H指数:10 供职机构:广西大学动物科学技术学院 研究主题:猪繁殖与呼吸综合征病毒 PRRSV 病毒 原核表达 多克隆抗体
猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析 殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚.本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序列(... 郑海红 孙志 朱兴全 袁世山关键词:猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 TRS PRRSV 感染性克隆 弱毒株 碱基突变 文献传递 PRRSV-PCV重组病毒的构建及PRRSV转录调控机制研究 本研究旨在探讨猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染性 cDNA 克隆作为外源基因表达载体的可行性,以及利用重组病毒对 PRRSV 复制转录过程进行解剖。以北美株 PRRSV 感染性克隆 pAPRRS 为平台进行反向遗... 郑海红 孙志 朱兴全 袁世山文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒强弱毒株嵌合感染性克隆的构建及鉴定 2012年 查明猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)致病性大幅增高的机制,进而研制用于防治流行PRRSV变异株的高效疫苗无疑是兽医工作者的当务之急。在弱毒株APRRS的全长感染性克隆pAPRRS以及我室构建的高致病性HP PRRSV感染性克隆pJX143的基础上,构建了nsp2替换的强弱毒PRRSV嵌合感染性克隆。将构建的嵌合克隆转染MA104,4d后观察到典型的CPE。通过RT-PCR和免疫荧光证明获得了一系列强弱毒株之间的嵌合病毒。这些嵌合病毒的构建成功和相应反向遗传操作平台的建立及应用,为研发预防HP PRRSV的高效嵌合疫苗奠定了基础。该类嵌合感染性cDNA克隆也为解析目前流行的HP PRRSV毒力因子和高致病力机制奠定了基础。 吕健 韦祖樟 高飞 郑海红 童光志 袁世山关键词:猪繁殖与呼吸障碍综合征 NSP2 感染性克隆 嵌合病毒 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒转录调控序列TRS鉴定及其功能解析 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)mRNA的合成采用独特的非连续性转录方式进行,对其发生及调控机制尚不清楚。本文利用RT-PCR技术确定了北美弱毒株PRRSV各个亚基因组mRNA的转录调控因子(TRS-B)的核心序... 郑海红 孙志 朱兴全 袁世山关键词:TRS 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒 PRRSV 感染性克隆 文献传递 猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒M蛋白/N蛋白间与N蛋白/3'UTR引入重复序列的反向遗传操作 2019年 为获得一种经全长cDNA突变体拯救出的、随着传代次数的增多而最终致死的突变病毒,以嵌合感染性克隆p7AX12为骨架,分别在猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)M蛋白与N蛋白间或(和)N蛋白/3'UTR之间插入32 nt,依次构建4个嵌合突变体pBJ327、pBJ732、pBJD32和pBJD32R,经DNA转染Marc-145细胞后4个嵌合突变体均能拯救出病毒,且拯救病毒中的突变或插入的碱基具有遗传稳定性。突变病毒传代5次,没有最终致死的原因还有待于进一步研究分析。获得的4个突变病毒也为研制PRRSV基因标识疫苗及PRRSV复制转录机制研究奠定了基础。 郑海红 孙竹筠 丛雁方 张可煜 高飞 童光志关键词:RESPIRATORY 反向遗传操作 非洲猪瘟病毒CP312R基因编码蛋白的原核表达及多克隆抗体的制备与应用 被引量:1 2024年 为制备ASFV CP312R基因编码蛋白的多克隆抗体,利用PCR方法从非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV)的灭活样品中扩增出924 bp的CP312R基因全长序列,利用同源重组法构建出原核表达质粒pCold-Ⅰ-ASFV-CP312R,将其转化至原核表达感受态细胞BL21中,经1 mmol/L的IPTG低温条件下诱导表达CP312R编码蛋白并经过镍柱亲和层析纯化后,利用SDS-PAGE对重组蛋白进行表达鉴定和反应原性分析,表达蛋白的相对分子质量约为34 kDa,通过Western blot分析,该蛋白能被ASFV抗体特异性识别。将所得的蛋白经处理纯化后免疫小鼠3次,得到含多克隆抗体的血清。利用该抗体检测实验室构建并拯救的表达ASFV CP312R基因编码蛋白的重组猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV),结果显示该多抗具有良好的反应原性和特异性,并且证明了ASFV CP312R基因编码蛋白可在PRRSV活载体中稳定表达。 刘佳晨 郭子强 陈金霞 曹云雷 童武 乔思娜 刘长龙 刘长龙 郑海红 童光志 郑海红 童光志关键词:非洲猪瘟病毒 原核表达 多克隆抗体 3-甲基喹噁啉-2-羧酸的制备及其细胞毒性研究 3-甲基喹噁啉-2-羧酸是喹烯酮和喹乙醇在机体内的主要代谢物之一,了解3-甲基喹噁啉-2-羧酸的安全性对喹烯酮和喹乙醇的安全性评价具有重要意义。本文通过贝鲁特反应和还原、脱羧反应在体外合成制备3-甲基喹噁啉-2-羧酸,并... 张可煜 郑海红 郑文丽 李涛 费陈忠 薛飞群关键词:DNA损伤 细胞周期 动物性食品中兽药残留的快速筛选方法 在人类消费的可食性动物组织或产品中出现兽药和其代谢物残留可能将对消费者造成不同程度的毒害,这迫切要求开发具有快速、简易、敏感性好等特征的检测方法。本文对动物源食品中兽药和其代谢物残留的快速筛选检测原理、现状及研究进展作一... 张可煜 郑海红 张丽芳 薛飞群关键词:兽药残留 动物性食品 文献传递 猪繁殖与呼吸综合征病毒基因表达调控序列的初步解析 2011年 猪繁殖与呼吸综合征(porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS)是世界养猪业的一个巨大的威胁。近年来,此病给各国养猪业造成了巨大的经济损失。本文立足于反向遗传操作技术,介绍了调控PRRS病毒粒子的感染性、基因组RNA复制、亚基因组mRNA转录以及翻译等重要过程的顺式调控元件的一级序列和高级结构的最新研究进展。 高飞 孙志 郑海红 袁海峰 刘长龙 陆嘉琦 刘萍 尹扬 袁世山 童光志关键词:非翻译区 茎环结构 RNA病毒的重组机制及其研究进展 被引量:4 2011年 RNA重组是RNA病毒普遍存在的变异方式之一,但仍有很多关键性问题尚未阐释清楚。目前认为重组机制主要有两种,复制型重组机制即模板转换(template-switch),又称为copy-choice机制;另一种为非复制型重组机制,即断裂连接机制(breakage-religation)和类似于剪接的反酯作用(splicing-like transesterification)机制。由于重组在病毒进化变异过程中发挥着不同的作用,阐明重组机制有助于研究病毒进化变异和复制转录等生命周期过程。本文拟就RNA重组类型、重组机制、对RNA病毒重组的研究、重组的生物学意义及应用4个方面,综述RNA病毒重组机制及其研究进展。 周艳 郑海红 袁世山关键词:RNA病毒