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闻晓波
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- 所属机构:黑龙江八一农垦大学
- 所在地区:黑龙江省 大庆市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
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- 闻晓波李冬野李树东冉旭华李晓娟邵磊王密朴范泽杨焕民侯喜林倪宏波
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2
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- 仝晓丹闻晓波
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- 本研究扩增肝片吸虫(Fasciola hepatica,Fh)谷胱甘肽硫转移酶(GST)基因,并进行同源性分析。根据GenBank发表的部分Fh GST基因序列设计并合成一对特异性引物,利用RT-PCR方法扩增出Fh GST基因完整的开放阅读框(openreading frame,ORF),测定序列,使用分子生物学软件进行同源性分析。获得Fh GST基因全长682bp,编码218个氨基酸,与澳大利亚分离的肝片吸虫GST同源性较高,与大片吸虫和卫氏并殖吸虫的GST也有较高的同源性。不同虫株GST基因具有较高的同源性,因此Fh GST蛋白不适合用作诊断抗原,但由于其存在交叉反应,GST基因作为分子疫苗的候选基因具有重要意义。肝片吸虫GST基因的克隆,为进一步研究GST蛋白的功能和作用奠定了基础。
- 冉旭华闻晓波王春仁刘娣刘娣孙中武李晓娟
- 关键词：肝片吸虫GST基因
- 牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)免疫逃逸机制研究进展被引量：2
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- 牛疱疹病毒Ⅰ型(BHV-1)为α疱疹病毒亚科成员,是引起牛多种疾病的重要病原之一。BHV-1面对牛免疫系统的不断进化,产生出多种机制以逃逸宿主的免疫防御,其主要包括诱导外周血单个核细胞凋亡、感染淋巴细胞和抑制淋巴细胞反应、抑制干扰素-β表达和建立潜伏感染等多种免疫逃逸机制。BHV-1的免疫逃逸给治疗和预防BHV-1所导致的相关疾病造成了极大的困难。尤其以潜伏感染最为严重,它能使患病动物终身带毒并能实现病毒的再激活。故主要阐述BHV-1的上述免疫逃逸机制,以期对相关疾病的防制和疫苗创制提供一定的帮助。
- 杨志元闻晓波冉旭华
- 关键词：免疫逃逸
- 新城疫病毒F_(48)E_9株M NP F和HN基因的真核表达被引量：15
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- 将新城疫病毒(NDV)F48E9株的M、NP、F和HN基因克隆到真核细胞表达载体 pCAGG上,经酶切、PCR鉴定和序列分析,分别筛选出了含有M、NP、F和HN基因的重组质粒, 命名为pCAGG-M、pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN。纯化后的重组质粒通过脂质体单独转染HeLa细胞,经间接免疫荧光试验检测到了M、NP、F和HN蛋白的表达。pCAGG-M、 pCAGG-NP、pCAGG-F和pCAGG-HN重组质粒组合共转染HeLa细胞48 h后,可以观察到明显的细胞融合现象。试验结果表明,NDV F48E9株的M、NP、F和HN蛋白均在HeLa细胞内得到了成功表达,同时证明在该表达系统中F蛋白不足以诱导细胞融合。
- 闻晓波闫丽辉曹殿军刘培欣刘春国步志高
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- 本实用新型提供了一种96孔板防错加样架，该加样架包括横滑板（1）和与横滑板（1）相互垂直的竖滑板（2），横滑板（1）与竖滑板（2）的两端分别置于96孔板（3）的板面上。本实用新型通过设置横滑板和竖滑板，在加样过程中，起到...
- 冉旭华闻晓波宋佰芬计红李冬野苗艳魏晓曼
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- 牛轮状病毒VP6蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备被引量：4
- 2016年
- 目的原核表达牛轮状病毒(rotavirus,RV)VP6蛋白,并制备其多克隆抗体。方法根据Gen Bank中登录的牛RV UK株VP6基因序列(X53667.1)设计一对特异性引物,RT-PCR扩增牛RV UK株VP6全长编码区片段,克隆至载体p ET-28a,构建重组表达质粒p ET-28a-Bo-RV-VP6,转染至E.coli Rosetta(DE3),IPTG诱导表达,重组蛋白进行SDS-PAGE和Western blot分析。将重组蛋白与弗氏佐剂混合后免疫豚鼠,共免疫3次,每次间隔2周,末次免疫后2周,经心脏采血,分离血清,制备VP6多克隆抗体,Western blot法检测其与牛RV的反应原性。结果经双酶切和测序鉴定,重组表达质粒p ET-28a-Bo-RV-VP6构建正确。重组蛋白以包涵体的形式表达,表达产物分别为43 000、34 000、27 000和15 000 4种不同相对分子质量的重组蛋白,纯化后纯度可达95%以上,可与牛RV阳性血清发生特异性反应。制备的VP6蛋白多克隆抗体效价>1∶7 000,且可识别RV天然VP6蛋白。结论原核表达了牛RV VP6蛋白,并制备了抗VP6多克隆抗体,为后续RV疫苗效力评价及RV侵入机理等方面的研究奠定了基础。
- 冉旭华曹思刘阳阳张玲玲张峣倪宏波闻晓波
- 关键词：牛轮状病毒VP6基因原核细胞基因表达多克隆抗体
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- 轮状病毒(Rotavirus,RV)是全世界范围内引发多种幼龄动物及婴幼儿病毒性腹泻的最主要病原之一,给畜牧业发展和人类健康造成严重危害。通过RT-PCR对来自宁夏犊牛腹泻粪样进行检测,选取阳性样品经MA104细胞进行病毒分离。细胞盲传4代后出现CPE,至7代后细胞CPE现象明显,获得1株牛轮状病毒,扩增VP7、VP4基因并测序分析,结果表明该分离株属于G6P[5]型轮状病毒,命名为NX28。研究明确了G6P[5]型在国内牛群中的存在及流行,并为下一步的牛轮状病毒的分子流行病学研究奠定基础。
- 闻晓波张玲玲倪宏波刘阳阳曹思冉旭华
- 关键词：轮状病毒基因型
- 一种人轮状病毒△VP8*亚单位重组蛋白及其应用
- 本发明涉及一种人轮状病毒△VP8*亚单位重组蛋白及其应用。该人轮状病毒△VP8*亚单位重组蛋白包括破伤风毒素中T细胞表位P2和轮状病毒△VP8*亚单位。本发明重组蛋白可以大大提高△VP8*亚单位疫苗的免疫效力，可以诱导更...
- 闻晓波孔凡志冉旭华张峣曹殿军朱战波张春山
- 文献传递
- 基于轮状病毒VP6蛋白新型候选疫苗的研发进展被引量：1
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- 轮状病毒(rotavirus,RV)是一种人畜共患病原体,给畜牧业和人类健康带来巨大威胁。对RV感染的治疗,目前尚无有效药物,接种疫苗是有效防控RV性胃肠炎暴发的重要措施。目前人商品化RV疫苗均为口服减毒活疫苗,存在散毒风险及潜在安全性等问题,且该疫苗在不发达国家的免疫效力较低,因此,非复制型疫苗很可能成为主要的候选疫苗。本文以RV结构蛋白VP6为基础,对该蛋白在RV免疫应答中的作用及其在RV非复制型疫苗的研发及防治中的应用作一综述。
- 陈肖宏闻晓波冉旭华
- 关键词：轮状病毒
