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王锐
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- 所属机构:云南农业职业技术学院
- 所在地区:云南省 昆明市
- 研究方向:农业科学
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 霍海龙
- 作品数：81被引量：102H指数：5
- 供职机构：云南农业职业技术学院
- 研究主题：基因克隆 生物信息学分析 微卫星标记 生物信息学 亚细胞定位
- 刘丽仙
- 作品数：173被引量：483H指数：12
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- 研究主题：武定鸡 地方鸡 肉品质 生化标记 屠宰性能
- 赵跃
- 作品数：26被引量：22H指数：2
- 供职机构：云南农业职业技术学院
- 研究主题：基因克隆 实时荧光定量 TNF-Α 克隆 原核表达
- 霍金龙
- 作品数：243被引量：530H指数：13
- 供职机构：云南农业大学动物科学技术学院
- 研究主题：生物信息学分析 生物信息学 基因克隆 近交系 微卫星标记
- 徐英
- 作品数：51被引量：154H指数：7
- 供职机构：云南农业职业技术学院
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- 2013年云南省禽流感病毒H9N2亚型监测及其血凝素基因序列分析被引量：4
- 2015年
- 为了解H9N2亚型禽流感病毒（AⅣ）的变异情况,本研究对2013年云南省16个地区的3 622份家禽临床样品进行AⅣ的鸡胚分离和RT-PCR检测,其中分离鉴定到97份H9N2亚型AⅣ分离株,并选取21个分离株进行HA基因测序及系统进化分析,结果表明：21份H9N2亚型AⅣ分离株的HA基因核苷酸序列同源性为86.0 ％～99.4％,均属于欧亚分支的类A/Chicken/BeiJing/1/1994亚分支,而且又进一步划分为Ⅲ-1、Ⅲ-2两个小分支.其中Ⅲ-2分支为云南地区新出现的进化分支.氨基酸比对分析显示,测序的21个HA基因编码蛋白的裂解位点基序均具有低致病性病毒分子特征;与现用疫苗株相比,HA推导氨基酸序列中存在多个氨基酸位点差异;其中,Ⅲ-1与Ⅲ-2分支的AⅣ的HA氨基酸序列多个位点存在各自特有的点突变（氨基酸替换）,这种变异具有一定的进化（亚）分支特异性.此外,HA基因多个受体结合位点氨基酸存在变异,其中234位氨基酸全部变为L,呈现了人流感受体结合特性;部分糖基化位点、抗原表位关键性氨基酸也存在变异.
- 胡媛媛张文东宋建领刘庆亮曾伟王锐郑锦玲彭洁保志鹏张应国范泉水赵焕云张富强
- 关键词：禽流感监测H9N2亚型血凝素
- 巍山县畜牧业发展现状及建议被引量：1
- 2013年
- 巍山县是全国畜牧业先进县之一，畜牧业是当地的传统产业，人们的生活和生产也都离不开畜牧业。特别是自20世纪70年代后期开始开展肉牛改良至今，全县的牛群整体性表现较好，加之当地群众非常重视养牛业，对巍山畜牧业（特别是肉牛业）的快速发展起到了促进作用。
- 徐兴祥赫绍军徐英王锐郑锦玲
- 关键词：畜牧业牧业发展肉牛改良养牛业肉牛业牛群
- 猪新基因PFN3电子克隆、RT-PCR验证和组织表达分析被引量：1
- 2014年
- 通过NCBI下载猪近缘物种的PFN3基因序列,在线BLAST比对获得猪EST序列,利用Lasergene软件电子克隆猪PFN3基因编码区序列及部分侧翼序列。针对编码区设计特异引物并以滇南小耳猪为研究材料进行实验验证,同时应用半定量RT-PCR技术对30个组织进行了表达分析。研究获得了猪PFN3 414 bp的编码区序列(GenBank登录号:JX457348,对应的氨基酸登录号:AFU74013)。生物信息学分析表明,该基因编码137个氨基酸,预测的蛋白质分子量(Mw)为14.73 ku,等电点(pI)为9.30。蛋白质结构分析显示,PFN3存在1个保守域,无信号肽;疏水性分析表明其N端和C端均具有亲水性;亚细胞定位显示,该蛋白位于细胞质的概率是94.1%。系统进化分析表明,猪与牛亲缘关系最近。组织表达分析表明,PFN3基因在30个被检组织中均有表达,在睾丸、肝、肾、结肠、盲肠、直肠及食管中高表达,在胸腺、甲状腺、附睾、淋巴结、十二指肠、空肠、回肠、胃、皮肤、大脑、小脑、垂体及下丘脑中中度表达,在颌下腺、肺、心、脾、肾上腺、肌肉、胰脏、脑干、舌下腺及脊髓中低表达。研究结果将为该基因在猪中的进一步功能研究奠定基础。
- 张永云赵跃王锐秦彩艳王配王淑燕李福泉刘丽仙霍海龙李卫真卢健霍金龙
- 关键词：电子克隆
- 绿色荧光蛋白基因原核表达质粒pET32a-AcGFP1的构建及其在大肠杆菌中的高效表达被引量：2
- 2012年
- 为了构建绿色荧光蛋白AcGFP1基因的原核表达载体pET32a-AcGFP1,并诱导使其在大肠杆菌中高效表达,本研究以pIRES-AcGFP1质粒为模板,采用PCR技术特异性扩增绿色荧光蛋白AcGFP1基因,通过酶切和连接使其与原核表达载体pET32a(+)构成重组子,经PCR、酶切和测序鉴定后,重组质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3),用不同浓度的异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达绿色荧光蛋白,经15%SDS-PAGE鉴定,结果显示:重组质粒pET32a-AcGFP1中的AcGFP1序列与Clontech公司的pIRES-AcGFP1质粒的AcGFP1序列完全一致,表明本实验已成功构建了含有绿色荧光蛋白基因AcGFP1的原核表达质粒。此外,pET32a-AcGFP1转化Rosetta(DE3),经不同浓度的IPTG诱导,SDS-PAGE检测均获得高效表达,为今后构建pET32a(+)-TAT-AcGFP1融合表达载体以及深入研究TAT的细胞膜穿透作用的机制奠定基础。
- 霍海龙赵跃王锐侯慧芳李卫真张永云刘丽仙王配霍金龙
- 关键词：绿色荧光蛋白基因克隆报告基因原核表达
- 不同杂交组合牛的生长性能测定被引量：2
- 2013年
- 试验对巍山境内680头各种杂交组合牛进行了生产性能测定。结果显示:平均初生重,三元杂交牛海西本31.36kg、婆西本30.50kg、安西本29.85kg、BMY西本29.32kg,二元杂交母牛西本30.21kg、西西本32.24kg,本地黄牛13.06kg;12月龄平均体重,三元杂交牛海西本199.80kg、婆西本195.50kg、安西本230.00kg、BMY西本219.60kg,二元杂交母牛西本151.00kg、西西本158.00kg,本地黄牛56.21kg;平均成年体重,三元杂交牛海西本416.99kg、婆西本406.26kg、安西本415.68kg、BMY西本424.32kg,二元杂交母牛西本405.36kg、西西本411.23kg,本地黄牛236.70kg。表明把巍山肉牛改良方向定为引进温带牛、瘤牛冻精与本地牛及其杂交牛进行杂交,可兼顾适应性和生产性能的发挥。
- 徐兴祥李天平何永富徐英王锐赵跃李乔仙赵刚杨国荣
- 关键词：肉牛改良
- 一种隔离防疫兔舍
- 本实用新型涉及一种隔离防疫兔舍，包括兔舍本体、兔笼架、兔笼、接粪板、刮粪板、电动推杆、控制器，所述兔舍本体内设有两列兔笼架，所述兔笼通过挂钩和支撑槽安装在兔笼架上，有利于病兔的隔离和肉兔出售时的装车运输；兔笼下方倾斜设有...
- 霍海龙赵筱子明高刘丽仙王世雄王锐
- 文献传递
- 全株甘蔗+全株大麦混合青贮技术研究被引量：3
- 2014年
- 为探讨全株甘蔗+全株大麦青贮技术,将由于旱灾不能成熟作为榨糖原料的全株甘蔗和全株大麦铡细混合青贮后饲喂肉牛,青贮成熟45 d后取样分析养分。结果表明:①全株甘蔗+全株大麦铡细混合青贮制成率67.58%(393.3/582),制成可饲用率99.69%;②全株玉米青贮的DM 95.27%、CP 4.42%、EE 1.74%、Ash 4.73%、Ca 0.060%、P 0.050%、NDF 55.77%和ADF 32.96%,而全株甘蔗+全株大麦青贮后的各营养成分分别为94.16%、9.37%、2.82%、6.98%、0.289%、0.166%、34.62%和24.14%;③2012年榨季不能达标榨糖的全株甘蔗收购价250元/t,按照平均产量60 t/hm2,产值达15 000元/hm2。全株甘蔗+全株大麦青贮技术获得成功,为今后甘蔗及其副产物利用提供了技术参考。
- 郑锦玲王锐李天平徐英李乔仙段正山高月娥何永珍杨国荣
- 关键词：青贮技术
- 版纳微型猪近交系VEGF基因克隆及其组织中转录水平的检测
- 2012年
- 为克隆版纳微型猪近交系血管内皮生长因子(VEGF)基因并检测该基因在各组织中的转录水平,本研究提取版纳微型猪近交系18种组织RNA,利用RT-PCR方法扩增VEGF基因编码区全长序列,进行克隆测序。利用VEGF基因序列的推导氨基酸序列与牛等8个物种的VEGF氨基酸序列构建物种系统进化树,同时采用半定量RT-PCR方法分析VEGF基因在版纳微型猪近交系18种组织中的转录水平。结果显示,版纳微型猪近交系VEGF基因编码区全长573 bp,编码190个氨基酸。氨基酸序列同源性分析表明,与牛等8个物种具有90%以上的相似性,分子系统进化表明其序列与人的关系最近,其次为牛、羊和兔。多组织半定量RT-PCR研究表明VEGF mRNA在版纳微型猪近交系的18个组织中均有转录水平的表达,其中在卵巢、脾脏、心脏、肺脏及皮肤中表达量较高,其他组织中表达量略低。
- 赵跃王锐霍金龙刘丽仙霍海龙杨成海曾养志
- 农业高等职业教育学校的功能异化与价值回归
- 科学建制的学校组织是社会的有机组成,功能主义要求对学校功能进行合理定位和判断。论述了由功能主义到功利主义异化的若干问题和农业高职职业教育价值回归的思考与认识。
- 王锐赵跃
- 文献传递
- 猪胰岛素样生长因子-Ⅰ的克隆及生物信息学分析被引量：4
- 2014年
- 为了克隆猪胰岛素样生长因子-Ⅰ(IGF-I)以及检测该因子在各组织中的转录水平,分别提取猪13种组织RNA并反转录为cDNA,利用RT-PCR方法扩增IGF-I编码区全长序列,将纯化的片段与pMD18-T载体连接,转化大肠杆菌DH 5α,筛选阳性克隆并测定其序列,利用生物信息学方法分析其序列特征,并与牛等5个物种构建系统进化树。同时采用半定量RT-PCR方法分析IGF-I在猪13种组织中的表达情况。结果显示,猪IGF-I编码区全长462 bp(GenBank登录号:JX827417),编码153个氨基酸。氨基酸二级结构预测表明无规卷曲占的比例最大,为57.52%。氨基酸序列同源性分析表明,与牛、马、羊、鹿、鸡等5个物种的相似性分别为98.0%、97.4%、96.1%、96.1%、83%,多组织半定量RT-PCR研究表明IGF-I mRNA在猪的13个组织中均有表达,其中在肌肉、肝脏、脾脏、卵巢、大肠中表达量较高,其他组织略低。
- 王锐赵跃张永云李卫真王淑燕霍海龙刘丽仙苗永旺霍金龙
- 关键词：胰岛素样生长因子基因克隆生物信息学分析
