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安云庆
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- 所属机构:首都医科大学
- 所在地区:北京市
- 研究方向:医药卫生
- 发文基金:国家自然科学基金
相关作者
- 吕喆
- 作品数：42被引量：118H指数：7
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- 孔庆利
- 作品数：28被引量：81H指数：6
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- 研究主题：FCΓ 医学免疫学 BPI 小鼠 内毒素
- 王炜
- 作品数：82被引量：261H指数：8
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- 研究主题：哮喘 医学免疫学 小鼠 慢性阻塞性肺疾病 免疫学
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- 研究主题：BPI FCΓ 大肠杆菌 RT-PCR 抗体
- 龙军
- 作品数：18被引量：78H指数：6
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- 抗p185单抗5E12Fab段基因的克隆及表达被引量：1
- 2005年
- 目的克隆抗p185单抗5E12的Fab段基因并在原核细胞进行表达。方法用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR),以可变区第一骨架区的通用引物从分泌抗p185单抗的杂交瘤细胞系5E12中克隆Fd段和κ链的基因,重组到Fab表达载体中,在大肠杆菌中表达噬菌体抗体和可溶性Fab;根据前导肽序列设计引物,通过PCR介导的定点突变将V区基因氨基端序列恢复为5E12的原始序列;以NIH3T3/erbB-2细胞ELISA法、免疫组化法等进行特异性鉴定。结果以第一骨架区的通用引物从小鼠杂交瘤细胞5E12中克隆到Fd段和κ链的基因,在大肠杆菌中表达出Fab段抗体但无特异性抗原结合活性,分别将Fd段和κ链V区基因的氨基端序列矫正为亲本单抗的原始序列后,恢复了Fab段的抗原结合活性。单独恢复Fd段可变区氨基端序列可恢复抗原结合活性。但同时恢复κ链后活性却有所下降。结论成功构建了抗p185小分子抗体Fab并进行功能性表达,为进一步构建抗p185鼠单抗其他小分子抗体及其人源化改造打下基础;进一步证实抗体氨基端序列对抗体活性的重要性,为今后以PCR方法构建小分子抗体的工作提供了有益的借鉴。
- 张国民陈宇萍王琰乔媛媛安云庆
- 关键词：FAB可变区基因
- BPI抗菌作用及其临床应用的展望
- 2000年
- 柯岩安云庆杨贵贞
- 关键词：BPI抗菌作用
- 用生物发光技术对结核杆菌H_(37)Ra株进行快速药物敏感试验的研究
- 1990年
- 用生物发光技术对结核杆菌H_(37)Ra株进行快速药物敏感试验的研究。该法系将在改良罗氏培养基中培养3周的结核杆菌H_(37)Ra株经适当稀释后,移种于0.1％吐温80-综合苏通液体培养基中(加与未加抗生素),37℃培养4～5d,然后测定细菌ATP提取物BL(305)值。通过计算细菌生长抑制率,了解细菌对药物的敏感性.本法快速(4～5d),易于操作。
- 沈海中安云庆李玉兰程松高单菊生莫家秀郭均
- 关键词：结核杆菌生物发光药物敏感试验
- 西罗莫司与未成熟树突状细胞延长小鼠皮肤移植存活时间的协同作用被引量：2
- 2006年
- 目的研究西罗莫司(SRL)对小鼠骨髓源树突状细胞(DC)分化及成熟的影响,观察西罗莫司与未成熟树突状细胞在延长小鼠皮肤移植存活时间中的协同作用。方法(1)在诱导C57BL/6小鼠骨髓细胞定向分化为DC时加入SRL,通过流式细胞仪检测CD11c、CD86及MHCⅡ类分子表达情况,经脂多糖(LPS)刺激后,再检测各分子表达的变化。(2)通过单向混合淋巴细胞反应(MLR)观察经SRL处理的DC刺激同种异基因小鼠T细胞增殖情况。(3)以C57BL/6小鼠为供者,BALB/c小鼠为受者建立皮肤移植模型。观察皮肤移植前7d经尾静脉注射供者未成熟DC及经胃管连续灌注SRL7d的受者移植皮片存活情况及组织学变化。结果(1)经SRL处理的DC表面CD11c表达仅有轻度降低,但CD86和MHCⅡ类分子表达明显减少。(2)MLR显示经SRL处理的DC刺激同种异基因小鼠T细胞增殖的能力降低。(3)受者皮肤移植术前联合应用供者未成熟DC和SRL,可减轻移植皮片炎症反应并延长其存活时间。结论SRL对DC分化的影响不明显,但可抑制DC发育成熟。受者术前应用SRL和未成熟DC可延长皮肤移植的存活时间。
- 李冬妹邱勇何秀娟胡永秀杜雨周冬燕安云庆
- 关键词：西罗莫司树突细胞皮肤移植小鼠
- rAAV2-BF增强两品系小鼠抗致死剂量细菌感染
- 2010年
- 目的通过观测rAAV2-BPI1-199-Fcγ1重组病毒(rAAV-BF)感染对不同品系小鼠的抗细菌感染保护作用。方法采用dot blot、Western blot、免疫组化、改良ELISA方法和内毒素检测试剂盒,检测重组BPI1-199-Fcγ1(rBF)蛋白在CHO细胞和小鼠骨骼肌细胞中的表达及血清中内毒素含量的变化;建立最小致死量(MLD)E.coli致死模型,检测rBF基因转染小鼠对MLDE.coli感染的抵抗作用。结果(1)rBF蛋白在CHO细胞和两品系小鼠骨骼肌细胞中成功表达,血清中rBF蛋白具有中和内毒素和杀伤E.coli的作用;(2)在MLDE.coli腹腔感染后,两品系小鼠rAAV-BF感染组存活率均显著高于空载体对照组小鼠;基因转染组小鼠血清内毒素含量明显低于空载体对照组;rAAV-BF感染与头孢呋辛钠联合应用具有协同抗菌作用,两品系小鼠存活率明显高于单纯rAAV-BF感染组。结论rAAV-BF感染组小鼠对致死性E.coli感染具有抵抗作用。
- 关翔宇刘振龙吕喆孔庆利王炜安云庆
- 关键词：革兰阴性菌
- 基于PCR技术的蛋白质改造策略被引量：2
- 2006年
- 基于PCR的突变方法以其简单、快速的优势,逐渐成为DNA体外修饰产生新型蛋白质的最常用方法。现综述其中较为常用的方法,重点介绍易错PCR与DNA改组及其在蛋白质改造中的联合应用。
- 李晶琴李慎涛安云庆
- 关键词：聚合酶链反应DNA改组蛋白质工程突变
- 抗人rBPI<Sub>23</Sub>的单克隆抗体及其应用
- 本发明提供了抗人rBPI<Sub>23</Sub>单克隆抗体，其是以rBPI<Sub>23</Sub>作为免疫原制备获得的既能与rBPI<Sub>23</Sub>特异结合、也能与人天然BPI(即nBPI<Sub>55</...
- 龙军安云庆胡智颖
- 文献传递
- 自然杀伤细胞活化信号的转导和效应被引量：5
- 2005年
- 新近研究发现,NK细胞活化受体与靶细胞表面相应配体交联结合后,可通过以SLP-76和WASP为核心的信号传递复合体及PI3K途径发挥作用。SLP-76活化后,通过募集结合PLC-γ、Itk和Vav,形成SLP-76信号转导复合体;WASP活化后,通过募集结合Grb2、Vav、WIP、Arp2/3和Cdc42-GTP等,形成WASP信号转导复合体。上述2种信号转导复合体经Nck相连后,与浆膜上的LAT作用,进而活化其中的PLC-γ和Arp2/3复合体,最终导致转录因子NFAT活化、细胞因子(GM-CSF、IFN-γ等)分泌和肌动蛋白聚合。PI3K介导Rac/PAK/MEK/ERK途径,导致NK细胞脱颗粒,释放穿孔素和颗粒酶,诱导靶细胞凋亡。
- 陈庆华安云庆
- 关键词：自然杀伤细胞活化信号肌动蛋白聚合PLC-ΓERK途径活化受体
- rBPI_(23)基因克隆与鉴定
- 2000年
- 目的 :rBPI2 3基因 (BPI60 0bp)克隆与鉴定。方法 :采用RT PCR技术 ,从HL 6 0细胞mRNA中扩增编码BPIN端 199个氨基酸 (rBPI2 3)的基因片段 (BPI60 0bp) ,经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体 ,测序鉴定。结果 :RT PCR获得预期的扩增产物—BPI60 0bp基因片段。成功构建PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体 ,酶切、酶谱分析与预期结果相符。DNA测序结果与文献报道一致。结论 :PUC18 BPI180 、PUC18 BPI4 2 0 重组克隆载体构建成功 ;BPI60
- 柯岩安云庆杨贵贞
- 关键词：RT-PCR
- BPI N端优势抗原表位的模拟合成及其人源抗体的筛选
- 2007年
- 杀菌／渗透增强蛋白（bactericidal／permeability increasing protein，BPI）是存在于人及哺乳动物多形核白细胞中的一种阳离子抗菌蛋白。研究证实BPI功能性氨基端片段（rBPl2。／rBPl23）具有与天然BPI55，相同的生物学活性，它们不仅能广谱杀伤G^-菌还能有效中和内毒素。
- 张国民陈宇萍乔媛媛王琰赵晓航安云庆
- 关键词：BPI人源抗体抗原表位PROTEINN端多形核白细胞
