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排序方式：

分泌表达Der p2的重组BCG的构建与鉴定被引量：4: 2006年; 目的构建并鉴定能够分泌表达外源蛋白——屋尘螨抗原(Derp2)的基因重组卡介苗(rBCG)。方法采用PCR技术,从结核分枝杆菌H37Rv基因中扩增信号肽Alpha抗原(α-ss)的穿膜区基因,经测序鉴定后克隆入胞内表达Derp2的rBCG中。通过Westernblot鉴定目标抗原在rBCG中的表达。结果经测序证实,所克隆的α-ss信号肽基因序列正确,构建的Derp2-rBCG能完成在大肠埃希菌(E.coli)和牡牛分枝杆菌细胞之间的穿梭,并介导抗生素抗性基因表达。外源基因Derp2表达于BCG培养上清。结论成功构建了以分泌方式表达外源蛋白的Derp2-rBCG。; 史皆然师长宏吴昌归李元戚好文李别虎范雄林; 关键词：基因重组卡介苗

胞壁型rBCG经口服免疫可以诱导BALB／c小鼠产生抗原特异性TH1应答被引量：3: 2007年; 目的观察胞壁型重组BCG（rBCG）经口服接种后对BALB／c小鼠TH细胞免疫应答的影响。方法以100ml／L甘油为对照，分别将BCG和以膜蛋白形式表达屋尘螨抗原Derp2的rBCG经口服接种于8周龄BALB／c小鼠，109CFU／d，连续5d，用夹心EIASA测定小鼠血清、脾脏T淋巴细胞培养上清（SCS）和肠道相关淋巴细胞培养上清（GGS）中IL-4、IFN-γ水平，用双色荧光标记-流式细胞术测定脾脏淋巴细胞（SLC）和肠道相关淋巴细胞（GLC）中TH细胞亚群。结果免疫4周后，ELISA结果表明：BCG和rBCG两组血清和SCS的IFN-γ水平较对照组升高，IL-4水平降低；但两组小鼠GCS仅见IFN-γ水平升高。流式细胞测定结果表明：在CD4^＋的SLC中，BCG和rBCG免疫小鼠的IDl2R黠细胞比例升高，而CD30^＋细胞比例降低；在CD4^＋的GLC中，BCG和rBCG免疫小鼠的IFN-γ^＋细胞比例升高；至免疫后8周，上述改变进一步明显，但BCG和rBCG两组之间差异无统计学意义。体外给予抗原刺激后，rBCG组小鼠变化更加显著，而BCG组则无明显改变。但GCS的IL-4水平始终无法测得；同时GLC中IL-5^＋细胞比例仍持续较低。结论无论rBCG还是BCG通过口服免疫，均可诱导BALB／c小鼠产生TH1优势免疫应答；而胞壁型Derp2-rBCG诱导产生的TH1优势应答具有Der p2抗原特异（记忆）性。; 史皆然张金山师长宏吴昌归; 关键词：重组卡介苗口服免疫辅助性T淋巴细胞

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国家自然科学基金(30370626)

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