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上海市自然科学基金(11ZR1429200)
作品数:
2
被引量:3
H指数:1
相关作者:
王权
唐华美
彭志海
温玉刚
严东旺
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相关机构:
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发文基金:
上海市自然科学基金
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相关领域:
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严东旺
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温玉刚
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唐华美
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王权
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李大卫
传媒
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年份
2篇
2011
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胃癌17号染色体抑癌基因候选区域精细定位分析
被引量:3
2011年
目的对胃癌17号染色体微卫星位点进行杂合缺失精细定位研究,以寻找新胃癌相关杂合缺失区域及可能存在的抑癌基因。方法在17号染色体上筛选出13个微卫星位点,然后与48例胃癌患者的肿瘤组织及正常组织进行多重聚合酶链反应(PcR)。产物在ABIPrism3730自动荧光测序仪进行毛细管电泳,以Genemapper3.2对电泳结果以进行杂合缺失分析。使用Fisher’s精确检验对杂合缺失与临床病例资料进行分析。结果17号染色体具有较高的杂合缺失现象(31%),D17S2196、D17S808和D17S1853位点没有有效数据。其中以D17S796位点杂合缺失率最高为48%(10/21),D17S956位点杂合缺失率最低为20%(6/30);结合临床病例资料发现D17S956、D17S805位点与pTNM分期相关,D17S831、D17S921位点与分化相关;通过杂合缺失研究在17号染色体上发现3个候选抑癌基因可能存在的区域D17S1857-D17S805、D17S930.D17S1877、D17S1857-D17S805。结论通过杂合缺失精细定位分析提示17号染色体上发现3个可能存在胃癌抑癌基因的区域。
王权
温玉刚
唐华美
严东旺
彭志海
关键词:
胃癌
杂合缺失
17号染色体
微卫星位点
MT1F基因过表达重组质粒构建及转染结肠癌RKO细胞的鉴定
2011年
目的构建MT1F基因过表达重组质粒,并转染结肠癌细胞株。方法Real—time聚合酶链反应(PCR)检测和筛选6株结肠癌细胞MT1FmRNA表达。采用全基因合成法合成MT1F编码区序列,分别克隆人pEGFP和pcDNA3.1(+)载体的C1末端,构建重组质粒pEGFP-C1-MT1F和pcDNA3.1-MT1F,DNA测序,以500ul脂质体质粒复合物转染RKO细胞,G418(400mg/L)维持筛选,Westernblot(鼠抗人MT单抗1:500、鼠抗GFP抗体1:1000)等检测目的基因表达效率。结果6株细胞中,RKO细胞MT1FmRNA水平最低。测序表明MT1F重组质粒构建成功。瞬时和稳定转染RKO细胞后,MT1FmRNA分别升高约600和2000倍,并表达15×10^3的MT蛋白。结论成功构建MT1F基因过表达重组质粒.获得外源性MT1F稳定转染的结肠痛RKO细胞株。
严东旺
王权
李大卫
温玉刚
唐华美
彭志海
关键词:
结肠癌
基因转染
质粒
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