四川省教育厅科学研究项目(08ZA053) 作品数:18 被引量:89 H指数:7 相关作者: 黄乾明 杨洲平 胡容 陈华萍 程子彰 更多>> 相关机构: 四川农业大学 中国科学院 凉山州中泽新技术开发有限责任公司 更多>> 发文基金: 四川省教育厅科学研究项目 更多>> 相关领域: 生物学 理学 环境科学与工程 轻工技术与工程 更多>>
禾本红酵母M124产脂能力及其油脂脂肪酸组成分析 被引量:2 2011年 采用索氏提取法提取禾本红酵母M124(Rhodotorula graminis M124)的菌体油脂,测定了其产脂能力,并采用气相色谱-质谱联用法(GC-MS)测定了其脂肪酸组成。结果表明,禾本红酵母M124的产脂能力较强,油脂含量达菌体干重的53.64%,脂肪酸组成较为特殊,10-十八碳烯酸占脂肪酸总量的80.08%。 徐振杰 杨洲平 黄乾明关键词:油脂 脂肪酸 红酵母Y-5产类胡萝卜素培养基无机盐组分的优化 被引量:8 2011年 为提高红酵母菌株Y-5发酵产类胡萝卜素的产量,对培养基中无机盐组分进行优化。采用Plackett-Burman试验设计从8种无机盐中筛选出对提高类胡萝卜素产量具有显著效应的无机盐组分KH2PO4、MgSO4和NaCl。通过Box-Behnken设计及响应面分析确定其质量浓度为KH2PO40.58g/L、MgSO40.49g/L、NaCl0.28g/L时,菌株的类胡萝卜素产量达到14.51mg/L,与未添加无机盐组分培养基相比,类胡萝卜素产量提高了25.09%。 唐棠 黄乾明 杨群峰关键词:类胡萝卜素 无机盐 PLACKETT-BURMAN设计 固定化金属亲和磁性纳米粒子在蛋白质分离纯化中的应用 2013年 固定化金属亲和色谱(immobilized metal affinity chromatography,IMAC)在蛋白质分离纯化方面已得到广泛应用。将IMAC的固体基质部分用磁性纳米粒子(magnetic nanoparticles,MNPs)取代,可得到固定化金属亲和磁性纳米粒子(immobilized metal affinity magnetic nanoparticles,IMAN)。IMAN中MNPs的引入使其比IMAC具有更广泛的应用价值,近年来已广泛应用于蛋白质的分离纯化。文章重点总结了IMAN的组成、分离纯化蛋白质的原理、在蛋白质分离纯化中的应用,以及影响分离纯化蛋白质的因素,并简要评述和展望了IMAN的发展方向和应用前景。 张凤英 姜友军 胡容 单志 陈华萍 黄乾明关键词:磁性纳米粒子 蛋白质 分离纯化 果胶裂解酶产生真菌的选育及酶学性质研究 被引量:1 2016年 果胶裂解酶(pectin lyase)具有降解果胶物质的能力,在工业、医药等领域有着重要作用,目前主要由果胶裂解酶功能菌株进行工业发酵生产,但现已开发的能用于工业生产的菌株资源十分有限。本实验采用刚果红染色法从雅安果园富含果胶土壤中筛选果胶裂解酶产生菌株,旨在为果胶裂解酶工业生产开发新的菌株资源。实验最终筛选出一株果胶裂解酶产生真菌菌株,经形态学和分子生物学鉴定为丛梗孢目曲霉属(Aspergillus monilia)的黄曲霉(Aspergillus flavus)。发酵条件研究表明,其最佳培养基的组成为(g/L):桔皮粉3,麸皮5,K_2HPO_4 0.05,Mg SO40.05,在此组合下酶活可达1.48 U/m L;最适培养条件为:初始p H 8.0,接种量8%,温度30℃,摇床转速200 r/min,培养时间48 h。酶学性质研究表明:该酶的最适p H为8.0,在p H 7.0~9.0范围内稳定性良好;最适温度为50℃,在40~50℃范围内稳定性较好;Ca^(2+)、Mg^(2+)对酶有较明显的激活作用,Mn^(2+)、Cu^(2+)、Zn^(2+)等对酶有不同程度的抑制作用。本研究成功对筛选菌株进行了发酵条件优化、酶学性质的研究,为果胶裂解酶工业生产菌株的选育以及实际应用提供实验依据。 周力 陈华萍 李哲 黄乾明关键词:果胶裂解酶 黄曲霉 酶学性质 发酵条件 禾本红酵母Y-5对结晶紫、孔雀石绿的吸附 被引量:1 2011年 研究了培养时间、初始pH、温度对禾本红酵母Y-5吸附结晶紫、孔雀石绿的影响,并对吸附剂的解吸和循环利用等进行考察.结果表明:在染料浓度为50mg.L-1、pH7.0、摇床转速150r.min-1、30℃、吸附10h时,红酵母对结晶紫、孔雀石绿的吸附率分别达峰值,为93.8%和87.7%;解吸后的菌体对结晶紫、孔雀石绿的吸附率分别为85.5%和78.5%,说明菌体对染料的吸附是可逆的,循环利用效果良好,菌体可再生和循环利用;禾本红酵母Y-5对结晶紫、孔雀石绿的脱色机理为吸附作用,染料多被吸附在红酵母表面的羟基(-OH)上,其吸附染料快速、高效、可逆,在染料废水处理上具有潜在的应用价值. 胡容 黄剑波 杨洲平 程子彰 靖德军 黄乾明关键词:结晶紫 孔雀石绿 粗毛栓菌漆酶的诱导及其对中性染料和有机磷农药的降解 被引量:5 2011年 研究了不同初始培养pH和培养时间下,不同诱导剂对粗毛栓菌产漆酶诱导特性的影响及漆酶对中性染料、有机磷农药的降解.结果表明:RB-亮蓝、ABTS和邻联甲苯胺对粗毛栓菌产漆酶均有不同程度的诱导作用,其中ABTS的诱导作用最好,其诱导的最适初始pH为4.0,最佳时间为13d;所产漆酶的适宜反应温度为38℃,酶在40℃保温20min仍可保留78.6%的酶活力,稳定性较好;在ABTS介导下,漆酶降解6种中性染料的最佳温度分别为30℃(中性黑、中性枣红、中性桃红、甲基橙)和60℃(中性深黄、甲酚红),最适pH分别为6.0(中性黑)、2.0(中性枣红、中性桃红)和4.0(甲基橙、中性深黄、甲酚红),最佳降解时间分别为6h(甲基橙、中性深黄和甲酚红)、12h(中性桃红)和24h(中性枣红).而漆酶降解乐果、毒死蜱、敌百虫、哒嗪硫磷4种有机磷农药的最佳温度均为25℃,最佳降解时间为9h,最佳pH分别为10.0(乐果、毒死蜱、哒嗪硫磷)和8.0(敌百虫). 靖德军 黄剑波 杨洲平 胡容 程子彰 黄乾明关键词:粗毛栓菌 漆酶 降解作用 产脂肪酶真菌的选育及酶学性质研究 被引量:9 2011年 从富含油脂土壤中筛选出一株产碱性脂肪酶酶活达6.40U/mL的真菌菌株,经显微形态及ITS序列分析鉴定为产黄青霉Penicillium chrysogenum,该菌株命名为Penicillium chrysogenum J23。该菌的最佳产酶培养条件为:蔗糖1.0%、蛋白胨2.0%、橄榄油1.0%、MgSO4·7H2O0.05%、接种量1.0%、初始pH9.0、摇床转速200r/min、30℃培养48h。其所产脂肪酶的最适反应温度与pH分别为33℃和7.5,在pH6.0-10.0酶具有良好的稳定性,在50℃处理2h仍可保持30%以上的酶活力,50mmol/L的Ca2+、Mg2+、K+分别对酶有较强激活作用,而50mmol/L的Fe2+、Mn2+、Cu2+、Pb2+、Li2+对酶则有不同程度的抑制作用。 李珍 程子彰 徐振杰 胡容 杨洲平 黄乾明关键词:真菌 脂肪酶 酶学性质 产黄青霉 利用汽爆玉米芯酶解液发酵生产类胡萝卜素的研究 被引量:1 2011年 研究了汽爆玉米芯酶水解及酶解液发酵生产类胡萝卜素。对影响酶解各因素考察表明:在最适酶解条件下,即温度50℃、pH值4.8、底物质量浓度50 g/L、加酶量48 FPU/g、酶解时间60 h,还原糖质量浓度达34.85 g/L。利用均匀设计对发酵条件进行了优化,最优发酵条件为:装液量23.91 mL,pH值4.85,接种量9.46%(体积分数),摇床转速190 r/min,核黄素2 mg/L,在此条件下类胡萝卜素产量可达11.24 mg/L。 唐棠 杨洲平 黄乾明关键词:玉米芯 酶解 红酵母 类胡萝卜素 量子点在生物分析及医学诊断中的研究与应用 被引量:11 2010年 量子点(quantum dots,QDs)是近年来发展起来的一种优异的新型荧光纳米材料,在生物分析及医学诊断研究中得到了广泛应用,并取得了一系列重要研究成果。本文简介了过去10年中量子点的合成和表面功能性修饰的发展,并重点介绍其在病原体检测、生物芯片、生物分子相互作用、生物传感器、基因沉默、细胞成像、靶向药物传输、光动力学治疗和植物学研究等领域的研究现状。同时,对量子点的应用前景及研究方向进行了评述和展望。 刘建云 黄乾明 王显祥 杨群峰 陈华萍关键词:生物分析 油橄榄HMGR基因家族的克隆表达及功能验证 2018年 3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR),催化3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)生成甲羟戊酸(MVA),是MVA途径中第一个关键酶。油橄榄是一种重要的经济油料作物,其含有的萜类物质具有重要营养价值,但关于调控萜类物质代谢途径的关键基因研究较少。为研究萜类合成途径关键酶基因HMGR,本研究采用RT-PCR法克隆油橄榄HMGR基因,进行生物信息学分析及构建原核表达载体,对表达蛋白生物活性进行功能验证,并采用荧光定量PCR分析HMGR在油橄榄不同生长阶段的表达量。结果表明:克隆出油橄榄HMGR基因家族的三个基因,分别命名为Oe HMGR1、Oe HMGR2、Oe HMGR3,m RNA ORF的长度分别为1 713 bp、1 773 bp、1 737 bp,编码570、590、578个氨基酸;基因编码蛋白均有2个跨膜区及HMGR催化活性的结构域,不含信号肽;构建了原核表达载体p ET30b(+)-Oe HMGR,转入到大肠杆菌BL21中成功表达,3个重组酶蛋白分子量大小均在66.2~68.0 k D之间,分离纯化重组蛋白进行功能验证,GC-MS检测表明该蛋白具有HMGR催化活性功能;荧光定量PCR分析表明该家族基因在果实和叶片中表达量较高,而在根、茎、花中表达量较低,在开花后45 d、90 d、120 d表达量较低,但在花后165 d表达量上升至较高水平。该研究为进一步鉴定Oe HMGR的功能及油橄榄萜类物质的合成生物学研究奠定基础。 梅抗抗 蒲祥 朱庆平 谢琴鼎 陈华萍 杨泽身 黄乾明关键词:油橄榄