湖南省教育厅科研基金(09C835)
- 作品数：3 被引量：12H指数：2
- 相关作者：顾洪丰蒋剑红杨永宗唐朝克覃丽更多>>
- 相关机构：南华大学湖南中医药大学更多>>
- 发文基金：湖南省教育厅科研基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 姜黄素下调脊髓Toll样受体4及下游细胞因子减弱大鼠神经病理性痛被引量：2
- 2012年
- 观察鞘内注射姜黄素对坐骨神经慢性压迫性损伤(CCI)大鼠痛阈和脊髓组织Toll样受体4(TLR4)及TNF-α、IL-1β和IL-10表达的影响.鞘内置管的120只大鼠随机均分为4组:假手术组(Sham),CCI组,溶剂对照组(SC),姜黄素治疗组(Cur,100μg/天),建立CCI大鼠疼痛模型,术后第1、3、7、10和14天鞘内给药并测定痛阈,第3、7天取腰段脊髓第4～6节段(L4～L6)以Real-time PCR与Western blotting方法检测TLR4、HMGB1 mRNA和蛋白质的表达,ELISA法观察脊髓组织中TNF-α、IL-1β及IL-10表达变化.与Sham组相比,CCI组大鼠机械性痛阈与热痛阈显著降低(均P<0.05),同时脊髓组织TLR4、HMGB1 mRNA和蛋白质的表达明显增加(均P<0.05),TNF-α、IL-1β与IL-10的含量也明显升高(均P<0.05);鞘内注射姜黄素明显降低脊髓TLR4、高迁移率族蛋白1(HMGB1),TNF-α和IL-1β的表达,显著升高脊髓IL-10的表达,同时明显改善CCI大鼠疼痛行为(P<0.05).姜黄素减轻神经病理性疼痛可能与下调TLR4途径促炎症因子表达有关,抑制TLR4途径有望成为治疗神经病理性疼痛的新策略.
- 顾洪丰廖端芳唐小卿旷昕
- 关键词：姜黄素TOLL样受体4神经病理性疼痛
- 虚拟实验在医学机能实验教学改革中的应用探索被引量：7
- 2013年
- 机能实验学教学改革是目前医学教育改革的热点问题。机能实验学虚拟实验教学的探讨与研究,既可克服传统机能实验教学的局限性;又可提升学生的基本素质与创新能力,实现高校培养高素质医学人才的办学目标。
- 顾洪丰蒋剑红
- 关键词：虚拟实验机能实验学教学改革
- 小干扰RNA沉默Toll样受体4表达对慢性温和应激ApoE^(-/-)小鼠腹腔巨噬细胞TLR 4/NF-κB途径基因表达的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探讨小干扰RNA(siRNA)沉默Toll样受体4(TLR4)基因对慢性温和应激ApoE-/-小鼠腹腔巨噬细胞促炎症细胞因子表达的影响。方法针对小鼠TLR4基因设计2条siRNA和一条无关序列,再据每一序列合成两条互补并含siRNA正反义链的DNA,退火后与含GFP的载体pRNAT-H1.1/Adeno相连,转染293A细胞,实时荧光PCR筛选有效的一条siRNA,经腺病毒颗粒包装与病毒扩增并感染293A细胞,G418筛选后,挑取单个阳性克隆放大培养,检测病毒滴度。120只雄性ApoE-/-小鼠随机分为三组:(1)慢性温和应激组;(2)慢性温和应激+siRNA组(10μL/只,尾静脉注射,每5日一次);(3)慢性温和应激+腺病毒空载体组。每组ApoE-/-小鼠40只,实验动物都以高脂、高胆固醇饲料喂养,分别在接受慢性温和应激0、4、12周后3个时间点处死动物,收集小鼠腹腔单核巨噬细胞,以W estern B lotting方法检测其TLR4和核因子κB(NF-κB)蛋白表达,ELISA法检测腹腔单核巨噬细胞培养上清液白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α表达。结果转染siRNA1和siRNA2后的292A细胞中TLR4 mRNA表达水平较空白对照组分别下降56%和67%,逐孔稀释滴度测定法测定的病毒滴度为3.4×1014TU/L;遭受4、12周慢性温和应激后,ApoE-/-小鼠血浆中皮质醇激素显著升高,但在同一时间点内,各组ApoE-/-小鼠血浆皮质酮激素浓度相比,差异没有统计学意义(P>0.05);与同一时期慢性温和应激组相比,siRNA组腹腔巨噬细胞TLR4和核因子κB蛋白表达水平明显降低(均P<0.05),其培养细胞上清液中的白细胞介素1β和肿瘤坏死因子α含量显著减少(P<0.01)。结论 siRNA沉默TLR4基因能有效抑制TLR4/NF-κB-IL-1β和肿瘤坏死因子α的表达,提示TLR4/NF-κB途径在慢性温和应激诱导的慢性炎症应答中可能有着重要作用。
- 顾洪丰唐朝克唐雅玲覃丽杨永宗
- 关键词：TOLL样受体4
