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内脏高敏感大鼠结肠特异背根神经节神经元TRPV1表达和电生理特征变化被引量：3: 2015年; 背景:内脏高敏感被认为是肠易激综合征的主要病理生理机制之一。目的:探讨内脏高敏感大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元上的TRPV1表达及其电生理特征。方法:20只10 d龄大鼠随机分为模型组和对照组,模型组以结直肠内灌注乙酸诱导内脏高敏感模型,对照组灌注等量0.9%NaC l溶液。以结肠壁注射DiI荧光染料逆行标记DRG神经元(即结肠特异DRG神经元),免疫荧光法检测DRG神经元上的TRPV1表达,膜片钳技术记录神经元电生理特征。结果:模型组结肠特异DRG神经元上的TRPV1表达阳性率明显高于对照组(46.1%对36.6%,P<0.01),平均阈电流值明显低于对照组[(57.80±1.32)pA对(73.45±4.51)pA,P<0.05],2倍阈电流刺激下动作电位频率明显高于对照组[(8.20±1.10)Hz对(4.54±0.66)Hz,P<0.05],差异均有统计学意义。模型组60 mm Hg结直肠扩张压力下的腹壁回撤反射(AWR)评分与TRPV1表达阳性率、2倍阈电流刺激下动作电位频率呈正相关(r=0.87和r=0.73,P<0.01),与阈电流值呈负相关(r=-0.81,P<0.01)。结论:结肠特异DRG神经元TRPV1表达上调、细胞兴奋性增加,可能是内脏高敏感形成的重要环节。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民王烈成; 关键词：内脏高敏感背根神经节瞬时受体电位通道 TRPV1 膜片钳术

内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究被引量：4: 2013年; 目的探讨内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节神经元的形态学和兴奋性研究。方法取出生10d的大鼠，结肠内给予0．5％乙酸溶液制备内脏高敏感大鼠模型（AA组），对照组（NS组）给予等量0．9％生理盐水。对成年后的大鼠进行结直肠扩张（CRD），用腹部回撤反射（AWR）值来评估内脏敏感性。在结肠壁上注射1，1’-二（十八烷基）-3，3，3’，3’-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐（DiI）逆行标记的背根神经节（DRG）神经元为结肠特异DRG神经元，酶解分离神经节成单细胞后，荧光显微镜下观察细胞形态并计数。采用全细胞膜片钳技术记录神经元的阈电位和动作电位频率。结果与NS组比较，AA组大鼠在相同结直肠扩张压力（5．332、7．998、10．664kPa）下AWR值明显增高（P〈O．05）；AA组结肠特异DRG神经元细胞直径为35～45在μm，Ns组为25～35μm；AA组神经元阈电流低于NS组（P〈0．05），2倍阈电流刺激下，引发出的AA组动作电位频率高于NS组（P〈0．05）。结论大鼠结肠特异背根神经节神经元在内脏高敏感后细胞增大且兴奋性增加，这有利于今后更深层次地研究内脏敏感性增高的神经机制。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民王烈成; 关键词：内脏高敏感背根神经节形态学膜片钳

半夏泻心汤对糖尿病大鼠小肠运动的影响及其作用机制研究被引量：3: 2013年; 目的初步研究半夏泻心汤对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠小肠运动的影响及其作用机制。方法将SD大鼠分为对照组、DM组、DM+半夏泻心汤组(DM+BX组)、DM+多潘立酮组(DM+Dom组)。半固体营养糊灌胃测定小肠推进率,免疫组化和图像分析对突触素(Syn)、蛋白基因产物9.5(PGP9.5)和c-kit的表达进行比较。结果 DM+BX组、DM+Dom组的小肠推进率较DM组明显提高(P<0.05),但仍低于对照组(P<0.05)。DM+BX组、DM+Dom组的Syn、PGP9.5、c-Kit阳性产物面积和平均光密度值与DM模型组相比均有提升。结论半夏泻心汤可能对受损的DM大鼠小肠肌间神经丛及ICCs有部分恢复作用从而改善糖尿病大鼠的小肠动力障碍。; 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民; 关键词：半夏泻心汤突触素 CAJAL间质细胞

氯化苄烷氨处理后大鼠十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的变化被引量：2: 2011年; 目的探讨0.5%氯化苄烷氨(BAC)对大鼠十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的去神经作用和意义。方法将40只SD大鼠随机分为5组(正常对照组、假手术组和模型1、2、4周组),每组8只。应用免疫组化SP法观察大鼠在BAC作用后不同时间点十二指肠肌间神经丛和黏膜下神经丛的形态和数量的变化。结果模型1、2、4周组的黏膜下神经丛的神经元与正常对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。肌间神经丛的神经元比较,模型1、2、4周组均较正常对照组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 0.5%BAC对大鼠十二指肠的肌间神经丛有明显的去神经作用,而对黏膜下神经丛无明显作用。; 薛丹余跃杨琰陈军; 关键词：肠肌丛肠神经系统去神经支配

半夏泻心汤对糖尿病大鼠胃窦Cajal间质细胞及干细胞因子的影响被引量：8: 2013年; 目的观察半夏泻心汤对糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠胃窦Cajal间质细胞(interstitial cells of Cajal,ICCs)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的影响。方法将60只健康雄性DM大鼠随机分成对照组、模型组、半夏泻心汤组(中药组)和多潘立酮组(西药组)。一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ,55 mg/kg)制作糖尿病大鼠模型。中药组给予半夏泻心汤[5.4 g/(kg·d)]灌胃,西药组给予多潘立酮[5 mg/(kg·d)]灌胃,模型组及对照组每天给予等体积蒸馏水,持续灌胃8周后,检测各组大鼠体重及血糖,给予半固体营养糊灌胃测定胃残留率,利用免疫组化和图像分析观察胃窦c-kit阳性ICCs及SCF表达。结果与对照组比较,模型组体重减轻,血糖及胃残留率升高,c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值显著降低(P<0.05)。与模型组比较,两个用药组多饮、多食及多尿症状减轻,精神状态好转,体重、c-kit阳性ICCs及SCF平均光密度值明显增加(P<0.05),胃残留率降低(P<0.05);中药组血糖降低(P<0.05),且中药组c-kit阳性ICCs平均光密度高于西药组(P<0.05)。结论半夏泻心汤可以促进糖尿病大鼠胃窦肌间神经丛c-kit ICCs及SCF的表达,对受损的DM大鼠胃窦ICCs、SCF有部分恢复作用,可改善糖尿病大鼠的胃动力障碍。; 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民; 关键词：糖尿病半夏泻心汤 CAJAL间质细胞干细胞因子

激活素A对去神经大鼠十二指肠Cajal间质细胞及平滑肌慢波的影响: 2013年; Cajal间质细胞（ interstitial cells of Cajal, ICC）是胃肠道起搏细胞．能引起平滑肌收缩。氯化苄烷氨（benzalkonium chloride。RAC）对肠道神经组织有损伤作用。激活素A在离体情况下具有神经保护作用和抗炎作用．且有助于间质细胞的修复。本研究观察激活素A对去神经大鼠ICC及平滑肌慢波的影响。; 薛丹余跃杨琰陈军王巧民江勤; 关键词：CAJAL间质细胞平滑肌收缩激活素A 去神经十二指肠慢波

糖尿病大鼠小肠Cajal间质细胞及干细胞因子的变化及半夏泻心汤的干预作用被引量：1: 2013年; [目的]观察糖尿病(diabetes mellitus,DM)大鼠小肠Cajal间质细胞(ICC)及干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达的变化及半夏泻心汤的干预作用。[方法]除10只大鼠作为正常组外,其他大鼠采用腹腔注射STZ复制DM模型后随机分为DM组、半夏泻心汤组及西药组。半固体营养糊灌胃测定各组大鼠小肠推进率,免疫组化检测c-Kit及SCF在小肠组织中的表达;Western blot检测小肠组织c-Kit蛋白、SCF蛋白表达。[结果]半夏泻心汤组与西药组大鼠的体质量、小肠推进率、c-Kit及SCF阳性细胞数、c-Kit蛋白及SCF蛋白的表达均较DM组明显增加(均P<0.05);半夏泻心汤组与西药组大鼠的血糖值较DM组明显降低(P<0.05)。半夏泻心汤组与西药组之间差异无统计学意义(均P>0.05)。[结论]半夏泻心汤可以促进DM大鼠小肠肌间神经丛c-Kit、SCF的表达,提示对受损的DM大鼠小肠ICC、SCF有部分恢复作用,从而对DM大鼠的小肠动力障碍有一定的改善作用。; 蒋楠余跃陈凤琴袁莉莉王巧民; 关键词：糖尿病半夏泻心汤 CAJAL间质细胞干细胞因子

结肠特异背根神经节神经元P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用被引量：3: 2015年; [目的]通过观察内脏高敏感模型大鼠结肠特异背根神经节(DRG)神经元P_2X_3受体表达和电生理特征,探讨P_2X_3受体在大鼠内脏高敏感性中的作用。[方法]10只幼鼠分为2组,经结直肠分别灌注乙酸诱导内脏高敏感模型(内脏高敏感组)、0.9%氯化钠溶液作对照(对照组);在结肠壁上注射1,1'-二(十八烷基)-3,3,3',3'-四甲基吲哚羰基花青高氯酸盐(DiI)逆行神经标记的DRG神经元为结肠特异DRG神经元,用免疫荧光技术观察其P_2X_3受体表达变化和膜片钳技术进行电生理记录。[结果]内脏高敏感组与对照组大鼠比较,结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体免疫阳性率明显增加(45.47%∶32.15%,P<0.01)、结肠特异DRG神经元静息电位和阈电流降低(P<0.05)、动作电位频率增高(P<0.05)。AWR评分值与结肠特异DRG神经元上P_2X_3受体阳性率(r=0.86,P<0.01)、2倍阈电流刺激下动作电位频率(r=0.82,P<0.01)呈正相关,与阈电流值(r=-0.77,P<0.01)呈负相关。[结论]P_2X_3受体在结肠特异DRG神经元上表达上调且DRG神经元兴奋性增加与内脏高敏感的形成有密切关系。; 袁莉莉余跃蒋楠陈凤琴王巧民; 关键词：内脏高敏感背根神经节膜片钳

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安徽省高校省级自然科学研究项目(KJ2010A192)

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