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国家自然科学基金(3047197)

作品数：4 被引量：16H指数：2
相关作者：陈杰马怡晖卢朝辉王凯李磊更多>>
相关机构：北京协和医院郑州大学第一附属医院更多>>
发文基金：卫生部卫生公益性行业科研专项国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 4篇中文期刊文章

领域

  • 3篇医药卫生
  • 1篇生物学

主题

  • 3篇肿瘤
  • 2篇蛋白
  • 1篇蛋白类
  • 1篇蛋白酶
  • 1篇蛋白酶体
  • 1篇调控基因
  • 1篇调控基因表达
  • 1篇融合型
  • 1篇乳腺
  • 1篇乳腺肿
  • 1篇乳腺肿瘤
  • 1篇糖蛋白
  • 1篇糖蛋白类
  • 1篇染色
  • 1篇染色体
  • 1篇染色体脆性位...
  • 1篇肿瘤转移
  • 1篇转录
  • 1篇转录因子
  • 1篇黏蛋白

机构

  • 4篇北京协和医院
  • 1篇郑州大学第一...

作者

  • 4篇陈杰
  • 3篇卢朝辉
  • 3篇马怡晖
  • 1篇李磊
  • 1篇于双妮
  • 1篇朱玥璐
  • 1篇王凯
  • 1篇谷雨妹
  • 1篇张强

传媒

  • 3篇中华病理学杂...
  • 1篇中国医学科学...

年份

  • 2篇2012
  • 2篇2010
共 4 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
miR-23a-27a表达载体构建及功能初探
2012年
目的构建miR-23a-27a簇真核表达载体并初步探讨该簇的靶基因及其功能。方法应用分子克隆的方法构建联合表达pre—miR-23a-27a簇及单独表达pre—miR-23a、pre—miR-27a的真核载体，应用双荧光素酶报告基因试验和real—timePCR验证该载体表达的有效性，应用microRNA靶基因预测软件和双荧光素酶报告基因试验寻找及鉴定pre—miR-23a．27a的靶基因，应用Westernblot和real．timePCR的方法在乳腺癌细胞MCF-7中初步探讨miR-27a的功能。结果（1）pre-miR-23a-27a—pcDNA3．1、pre-miR-23a-pcDNA3．1、pre—miR-27a—pcDNA3．1重组质粒能够在真核细胞HEK293T中有效转录加工出相应的miR-23a和miR-27a；（2）miR-23a和miR-27a能够同连有Sprouty2基因MRE序列的pRL—TK重组质粒作用，但是只有miR-27a能够同连有Sprouty2基因3’-非翻译区（UTR）全长序列的pRL—TK重组质粒作用，而将Sprouty2基因3’-UTR中同miR-27a结合位点定点突变后，miR-27a无法同其作用；（3）在人乳腺癌细胞MCF-7中转染pre—miR-27a—pcDNA3．1真核表达载体，能够在蛋白水平显著影响Sprouty2基因的表达，但是对其RNA水平没有显著影响。结论Sprouty2可能是miR-27a的功能靶基因，pre—miR-23a-27a—pcDNA3．1、pre—miR-23a—pcDNA3．1、pre-miR-27a-pcDNA3．1载体的构建为下-步深入研究miR-23a和miR-27a的功能奠定了基础。
马怡晖于双妮卢朝辉陈杰
关键词：微RNAS细胞系肿瘤
Twist转录因子、E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白在乳腺癌中的表达及意义被引量：14
2010年
目的观察上皮间质转化因子Twist转录因子（简称Twist）和相关蛋白E-和N-钙黏蛋白（cadherin）在乳腺癌中的表达及其与患者临床病理指标的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测56例浸润性导管癌、38例浸润性小叶癌和41例导管内癌以及10例正常乳腺组织中Twist、E-和N—eadherin的表达。结果（1）三种病理类型乳腺癌组织中，Twist阳性率分别为46．4％（26／56）、79．0％（30／38）和26．8％（11／41），其中浸润性小叶癌中Twist阳性率显著高于浸润性导管癌和导管内癌（分别P=0．002、0．000）；E—cadherin阳性率分别为78．6％（44／56）、29．0％（11／38）和80．5％（33／41），其中浸润性导管癌和导管内癌中E—cadherin阳性率显著高于浸润性小叶癌（均P=0．000）；N—eadherin阳性率分别为53．6％（30／56）、68．4％（30／56）和31．7％（13／41），其中在浸润性导管癌和浸润性小叶癌中的阳性表达显著高于导管内癌（分别P=0．033、0．001）。（2）135例乳腺癌组织中Twist和E—eadherin表达呈显著负相关性（P=0．005，Spearman相关系数-0．239）；Twist和N—cadherin表达呈显著正相关性（P=0．000，Spearman相关系数0．319）。（3）乳腺浸润性导管癌差分化组中N．cadherin阳性率显著高于中分化和高分化组（P=0．004）。（4）乳腺浸润性小叶癌淋巴结转移组中Twist阳性率显著高于淋巴结未转移组（P=0．037）。结论三种蛋白在三种乳腺癌组织中的表达差异较大。Twist阳性表达与乳腺浸润性小叶癌淋巴结转移相关。N—cadherin阳性率与乳腺浸润性导管癌组织学分级相关。检测这三个指标可为研究乳腺癌的进展和转移机制及评判其生物学行为提供有价值的参考。
马怡晖王凯李磊卢朝辉陈杰
关键词：乳腺肿瘤肿瘤转移TWIST转录因子钙黏着糖蛋白类
消化系统恶性肿瘤miRNA研究的新进展被引量：2
2010年
microRNA（miRNA）是一类存在于真核生物中长度约22bp的非编码小RNA分子。miRNA通过与靶基因mRNA的3’端非编码区（3’UTR）结合，在转录后水平调控基因表达，来参与机体不同时期不同组织生长发育的重要过程。已知有一些miRNA基因定位在染色体脆性位点，还有部分miRNA基因存在于一些与肿瘤相关的基因组序列中，
朱玥璐陈杰
关键词：消化系统恶性肿瘤染色体脆性位点基因MRNA调控基因表达RNA分子
靶向敲减Ras癌蛋白融合型泛素连接酶E3的构建
2012年
目的应用蛋白质敲减技术原理,构建理论上能够靶向敲减Ras癌蛋白的融合型泛素连接酶E3的真核表达载体。方法选取Raf-1、PI3K、RalGDS中能够与Ras蛋白相互作用的结合结构域和具有泛素连接酶活性的F-Box及U-Box作为功能结构域,采用分子克隆技术依次将其连入pcDNA3.1中构建融合蛋白表达载体,双酶切、PCR和测序技术检测连入核苷酸片段的正确性,Western blot检测融合蛋白表达载体在真核细胞内表达的正确性和作用有效性。结果成功获得6个融合蛋白E3表达载体,5个能够在真核细胞内有效表达,其中(RBD+CRD)Raf-1-U-Box-pcDNA3.1能够敲减人胰腺癌细胞系PANC-1细胞中Ras蛋白。结论成功构建能够靶向敲减Ras癌蛋白的融合蛋白表达载体,为下一步应用蛋白质敲减技术奠定了实验基础。
马怡晖张强谷雨妹卢朝辉陈杰
关键词：泛素蛋白酶体泛素连接酶
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