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小鼠肺炎链球菌psaA核酸疫苗的制备及其初免-蛋白加强免疫策略的研究被引量：1: 2009年; 目的制备肺炎链球菌核酸疫苗，初步探讨初免一蛋白加强免疫策略能否增强疫苗在动物体内的免疫原性。方法从肺炎链球菌基因组中克隆出肺炎球菌表面黏附素A（pneumococcalsurfaceadhesinA，PsaA）基因，将其分别插入到真核表达载体pVAX1和原核表达载体pET28a中，分别构建出表达PsaA的核酸疫苗及其基因工程表达菌株。pVAX1-psaA核酸疫苗体外转染293T细胞，并通过反转录-聚合酶链反应（RT—PCR）加以鉴定。实验组5只BALB／c小鼠经核酸疫苗免疫3次后，PsaA纯化蛋白加强免疫1次，对照组5只小鼠经pVAXl空载体免疫3次后，生理盐水加强免疫1次，分别采集血清测定两组抗PsaA抗体水平。结果成功克隆出psaA基因并实现其亚克隆；所构建的psaA核酸疫苗序列正确，同时实现了PsaA蛋白的一步亲和纯化；psaA核酸疫苗可在293T真核细胞中成功表达；核酸疫苗初免后蛋白加强组的抗PsaA抗体滴度高于对照组（t=87．518，P〈0．05）。结论成功构建出psaA核酸疫苗，采用核酸疫苗初免一蛋白加强免疫策略能增强肺炎链球菌psaA核酸疫苗的免疫原性。; 章德广王正敏徐江红陈兵戴文佳范小勇; 关键词：中耳炎链球菌疫苗

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上海市科学技术委员会资助项目(06JC14014)