国家自然科学基金(31060239)
- 作品数：13 被引量：31H指数：4
- 相关作者：蔡红陈海如王连春杨子祥黄丹更多>>
- 相关机构：云南农业大学云南省农业科学院玉溪师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金内蒙古自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 萝卜花变叶病病原鉴定及赤霉素合成与代谢途径中关键酶基因的表达被引量：1
- 2020年
- 【目的】明确云南元谋地区发生的萝卜花变叶病病原以及赤霉素合成途径中关键酶基因表达量的变化。【方法】对自然表现花变叶、丛枝和节间缩短的萝卜感病植株总DNA进行植原体16S rRNA基因扩增、克隆、测序及系统进化树构建,并采用实时荧光定量PCR技术分析赤霉素合成及代谢途径中关键酶基因(GA20ox1、GA3ox1和GA2ox1)表达量的变化。【结果】该植原体株系与16SrⅡ-A亚组相似性最高(0.98),并与16SrⅡ-A亚组中的其他植原体株系明显形成一个进化支。【结论】萝卜花变叶植原体(Raphanus sativus phyllody,RsPh-YNym)为植原体16SrⅡ-A亚组成员,且与候选种Candidatus Phytoplasma aurantifolia相关,明确了该株系的分类地位;感病植株茎中3种关键酶基因GA20ox1、GA3ox1和GA2ox1表达水平发生了变化,表达量均下调,说明植原体的侵染造成了植株赤霉素稳态被破坏,从而导致植株表型改变。
- 刘俊男王柱华万琼莲许杏萍苏帆蔡银枫蔡红
- 关键词：萝卜植原体赤霉素关键酶基因
- 云南花生丛枝植原体16S rRNA和核糖体蛋白基因序列分析被引量：6
- 2014年
- 利用植原体16S rRNA基因及核糖体蛋白基因(ribosomal protein,rp)通用引物对发生在云南元谋的花生丛枝病病株DNA进行PCR扩增,并对扩增片段进行序列测定。扩增获得的云南元谋花生丛枝植原体(PnWB-YNym)16S rDNA、16S-23S rDNA和23S DNA片段总长1 806 bp,rp基因扩增片段长1 171 bp。云南株系与来源于台湾和海南的花生丛枝植原体均有较高同源性。比较16S rDNA片段,发现云南株系在5个位点上与来自台湾或海南的株系存在碱基差异,其中有1个位点的差异是云南元谋株系特异的;再分别比较核糖体蛋白rplV-rpsC 2个基因所编码的氨基酸序列,发现云南株系rpsC编码的第194位氨基酸与台湾和海南的株系存在差异。经16S rDNA片段系统进化及iPhyClassifier在线分析,表明PnWBYNym在分类上属于16SrII-A亚组成员,与候选种‘Cand/datus Phytoplasma australasiae'相关;基于rp基因构建的系统进化树表明,PnWB-YNym与16SrII-A亚组各成员聚为同一亚进化支(iii)。
- 万琼莲杨子祥王连春蔡红陈海如
- 关键词：植原体RDNA核糖体蛋白基因
- 莴苣丛枝植原体胶体金免疫层析试纸条的初步研制
- 2015年
- 采用柠檬酸三钠还原法制备25 nm粒径胶体金颗粒,在pH 8.5的条件下与21μg/m L兔抗莴苣丛枝植原体(Le WB)免疫膜蛋白(Imp)多克隆抗体形成稳定的胶体金蛋白复合物,将兔抗莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白IgG与羊抗兔IgG分别点在硝酸纤维素膜上作为检测线(T)和质控线(C),组装成胶体金免疫层析试纸条。结果表明:该试纸条除可以检测莴苣丛枝植原体外,还能检测与其具有相同免疫膜蛋白特性且隶属16SrⅡ-A亚组的其他植原体株系,如菊苣丛枝植原体(Ch WB)、扁豆花变绿植原体(Le VP)、蕹菜丛枝植原体(WSWB)、银胶菊花变绿植原体(Pa VP)等。试纸条可特异检测16SrⅡ-A亚组植原体株系,对莴苣丛枝植原体阳性材料的检测灵敏度为稀释100倍。
- 薛正姚琪曾丛芳施美辰文建斌蔡红陈海如
- 关键词：植原体胶体金免疫层析
- CO_2加富下空气湿度调控对亚高温大棚嫁接黄瓜逆境生理的影响
- 2012年
- 本试验在CO2加富,气温为30℃～35℃条件下,将空气湿度设置为95%±5%(L1),75%±5%(L2),55%±5%(L3)3个处理,研究了空气湿度调控对大棚嫁接黄瓜逆境生理的影响。结果表明:随着处理时间的延长,3个处理叶片中的渗透调节物质、丙二醛含量和保护酶活性均呈增加趋势,细胞质膜透性L2处理和L3处理增加,L1处理降低;随着处理空气湿度的降低,黄瓜叶片中的渗透调节物质、丙二醛含量、保护酶活性和细胞质膜透性均呈降低趋势。在处理第24d时,L1比L2、L3的可溶性蛋白含量降低了4.84%、8.18%,脯氨酸含量降低了31.83%、36.77%,可溶性糖含量降低了27.74%、32.52%、丙二醛含量降低了30.34%、32.38%,超氧化物歧化酶(SOD)活性降低了29.45%、37.75%,过氧化氢酶(CAT)活性降低了17.41%、17.41%,过氧化物酶(POD)活性降低了9.14%、44.87%;细胞质膜透性降低了80.75%和80.76%。说明大棚内在CO2加富条件下,在较高的空气湿度环境中,嫁接黄瓜遭受的逆境胁迫较小。进一步证明了亚高温管理大棚可提高嫁接黄瓜抵御逆境胁迫的能力,降低逆境胁迫的程度,缓解逆境对植株的伤害。
- 刘杰才崔世茂杨文秀马立国付崇毅刘维彬杨正荣白东升
- 关键词：CO2亚高温黄瓜逆境生理
- 云南花生丛枝植原体secY基因序列分析及结构预测被引量：7
- 2013年
- 对采自云南元谋的花生丛枝植株总DNA进行secY基因的巢式PCR扩增,得到约1 700 bp的特异扩增片段,将该扩增产物克隆后进行序列测定,表明该片段长1 709 bp,该序列包括部分rpl15基因、全部secY基因序列以及部分的map基因,为植原体部分spc核糖体蛋白操纵子,其中secY基因编码的蛋白包括420个氨基酸,为含有10个明显跨膜区的整合性跨膜蛋白。通过同源性比对及构建的系统进化树,表明该株系与来源于台湾、海南的花生丛枝植原体亲缘关系最近,确定了该株系属于16SrII-A亚组成员。该分类结果与基于16SrDNA及rp基因的分析结果一致。
- 万琼莲蔡红杨子祥王连春陈海如
- 植原体病害及其相关植物激素研究进展被引量：4
- 2018年
- 植原体(phytoplasma)是一类重要的植物细菌性病原,在世界范围内广泛分布,给林业、果树、经济作物等造成了巨大的危害。由于植原体不能体外培养,给研究带来了很多困难。目前,国内外通过对激素的检测研究其致病机理、生理生化特性等,对目前国内外感染植原体的植株内源激素(生长素、分裂素、赤霉素和脱落酸)的研究进展进行了综述。
- 刘俊男王柱华赵宇蔡红郭乔优
- 关键词：植原体植物激素
- 苦楝丛枝植原体相关膜蛋白基因分析及结构预测
- 2013年
- 根据植原体编码蛋白转运系统SecY亚基以及抗原膜蛋白amp基因的保守序列分别设计引物,并采用PCR对采自云南文山的苦楝丛枝感病植株总DNA进行扩增、产物克隆及序列测定。结果显示扩增的SecY亚基DNA片段长1 354 bp,编码一个包含414个氨基酸的SecY蛋白,序列同源性显示该片段与"Ca.Phytoplas-ma asteris"(16SrI组)中的株系最高,达94%～99%;构建16SrI组内基于secY序列的系统进化树,认为该株系为secY(I)-O亚组。扩增的免疫膜蛋白DNA片段长1 176 bp,编码1个包含233个氨基酸的免疫膜蛋白(Amp)。蛋白结构预测显示secY亚基蛋白是一个有9个跨膜区的整合跨膜蛋白,而Amp蛋白是一类两端具有明显跨膜区,且N-端有多肽切割位点的Ⅲ型膜蛋白。
- 吴德喜袁恩平王连春蔡红陈海如
- 关键词：膜蛋白SECYAMP
- 不同药剂浸种对燕麦种子α-淀粉酶活力的影响被引量：2
- 2014年
- 以牧民自留燕麦种子为材料,研究不同药剂浸种对其萌发时α-淀粉酶活力的影响。试验采用不同浓度赤霉素、抗坏血酸、水杨酸、硫酸铜对燕麦种子进行24 h浸种处理。测定燕麦种子发芽的第1、3、5、7天α-淀粉酶活力。结果表明:0.1 mmol/L水杨酸处理对燕麦α-淀粉酶活力的提高效果最佳,高浓度水杨酸(>0.2 mmol/L)对燕麦α-淀粉酶活力有抑制作用;0.3 mmol/L赤霉素对燕麦α-淀粉酶活力提高效果次之;抗坏血酸溶液对燕麦α-淀粉酶活力提高作用不明显;在一定浓度范围内Cu SO4对燕麦α-淀粉酶活性提高作用随浓度增大而增强。
- 黄丹蔡红
- 关键词：燕麦种子浸种Α-淀粉酶活力
- 组培法保存花椰菜丛枝植原体的初步研究被引量：2
- 2016年
- 对采自云南省元谋县的花椰菜丛枝病植原体感病植株进行组织培养。将带菌组培苗分别置于冰箱（4～8 ℃）低温保藏和光照培养箱中常温保藏,经定期观察和继代培养,结果表明：以感病植株的茎段作为组培材料,经丛生芽诱导培养可得到长势较好的花椰菜潜带植原体组培苗;同时,采用低温保藏可延长继代培养的间隔时间（每2～3月进行1次）,期间每月在培养箱中补光3～7 d,在12个月后经PCR检测表明组培苗中仍含有植原体,达到植原体株系长期保存的目的。
- 万琼莲木万福张茹岚王连春蔡红陈海如
- 关键词：植原体
- 莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白(Imp)的抗原表位预测及Imp基因原核表达被引量：1
- 2015年
- 采用PCR方法,从采自云南元谋地区的莴苣丛枝植株总DNA中扩增到植原体免疫膜蛋白Imp基因,并进行抗原表位分析和原核表达.结果表明,莴苣丛枝植原体免疫膜蛋白Imp基因长519 bp,编码一个包括172个氨基酸的蛋白.蛋白分子量为19 ku,理论等电点为8.61,在N-末端有一个明显的跨膜区,不存在信号肽切割位点.抗原表位分析认为,该蛋白氨基酸的第62～ 83,95～113,133～145区段为该蛋白最可能的蛋白表位区.通过构建原核表达载体pET30a-lmp,转入宿主菌BL21（DE3）-plysS中,经IPTG诱导表达出约25 ku的融合蛋白.
- 施美辰木万福万琼莲王连春蔡红陈海如
- 关键词：抗原表位原核表达
