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谷氨酸转运抑制剂诱导脊髓运动神经元选择性损伤被引量：1: 2005年; 目的:观察谷氨酸转运体抑制剂苏羟天冬氨酸(THA)对器官型培养的脊髓片的影响。方法:取出生后8d乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,在培养液中加入THA,免疫组化染色进行神经元计数,测定培养液中谷氨酸的含量,电镜观察超微结构改变。结果:THA组随培养时间的延长谷氨酸含量增高,α运动神经元数目减少,超微结构损伤明显,而脊髓背角的中间神经元的数目无显著变化,超微结构损伤相对较轻。结论:谷氨酸转运异常可以诱导选择性运动神经元损伤。; 王晓娟郭艳苏吴淑玉吴东霞杨程肖向建刘卫刚李春岩; 关键词：脊髓运动神经元运动神经元损伤器官型培养谷氨酸转运体神经元数目腰段脊髓

石杉碱甲对体外培养大鼠脊髓片前角运动神经元损伤的保护作用被引量：11: 2005年; 目的:利用选择性运动神经元死亡的脊髓薄片培养模型,观察石杉碱甲对运动神经元的保护作用。方法:乳大鼠腰段脊髓组织薄片分为正常对照组、模型组和石杉碱甲1,10,100μmol·L-15组。用倒置显微镜观察脊髓片形态变化,SMI32免疫组化染色对腹角α运动神经元记数,透射电镜观察α运动神经元的超微结构并测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果:石杉碱甲100μmol·L-1组脊髓片在体外生长良好,形态与正常对照组相近;石杉碱甲1,10μmol·L-1组脊髓片生长不良,形态与模型组相近。与正常对照组相比,模型组脊髓片前角SMI32阳性α运动神经元数减少(P<0.05),培养液中LDH含量增加(P<0.05)。与模型组相比,石杉碱甲100μmol·L-1组脊髓片前角α运动神经元数增加(P<0.05),胞浆内空泡明显减少,培养液中LDH含量减低(P<0.05)。结论:高浓度石杉碱甲能改善乳大鼠脊髓片前角α运动神经元生长,减少其空泡形成及死亡,并降低LDH的释放。; 刘卫刚肖向建李敏马征李春岩; 关键词：石杉碱甲肌萎缩侧索硬化脊髓谷氨酸

肌萎缩侧索硬化脊髓器官型培养模型的建立被引量：1: 2004年; 利用谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA)制备选择性运动神经元凋亡的肌萎缩侧索硬化(ALS)脊髓器官型培养模型。取出生后8天乳鼠腰段脊髓组织切成脊髓薄片,在培养液中分别加入不同浓度THA,用SMI-32免疫组化染色对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定,calretinin免疫组化染色对背角中间神经元进行鉴定,测定培养液中谷氨酸(Glu)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量,并与对照组比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定;THA引起培养液中剂量依赖性Glu、LDH 含量增高和SMI-32阳性的α运动神经元数目减少,脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻;100 μmol/L THA组在体外培养4周后,细胞外Glu含量增高,SMI-32阳性的α运动神经元数目较对照组明显减少,背角的中间神经元数目无显著变化,可以制成ALS脊髓器官型培养模型。; 刘卫刚王晓娟肖向建马征宋学琴王丽琴李春岩; 关键词：肌萎缩侧索硬化脊髓乳酸脱氢酶神经系统变性疾病运动神经元

谷氨酸转运抑制剂对器官型培养脊髓片的影响被引量：1: 2005年; 观察谷氨酸转运体抑制剂苏-羟天冬氨酸(Threo-hydroxyaspartate,THA)对器官型培养的脊髓片的影响,探讨谷氨酸在运动神经元损伤中的作用。取出生后8天乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养,在培养液中加入不同浓度THA(50μmol/L、100μmol/L、500μmol/L),用神经元的特异性免疫组化染色剂SMI-32,非磷酸化神经丝标记物,对脊髓腹角α运动神经元进行鉴定,用单克隆抗钙网膜蛋白(calretinin)抗体对背角中间神经元进行记数,测定培养液中乳酸脱氨酶(LDH)的含量,并与对照组比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定,THA可以引起剂量依赖性的培养液中LDH含量增高和α运动神经元数目减少,而脊髓背角的中间神经元损伤相对较轻,其中THA100μmol/L组在体外培养4周后出现类似于肌萎缩侧索硬化(ALS)的病理改变:α运动神经元数目较对照组明显减少,而脊髓背角的中间神经元数目无显著变化。细胞外谷氨酸增高主要对运动神经元造成损伤,脊髓运动神经元较感觉神经元对谷氨酸的兴奋毒作用更加敏感。; 肖向建王晓娟王丽琴宋学琴刘卫刚马征李春岩; 关键词：器官脊髓运动神经元谷氨酸转运体感觉神经元 MOL 神经丝

脊髓薄片器官型培养及组织化学鉴定方法研究: 2005年; 目的探讨脊髓薄片器官型培养的方法及其腹角α运动神经元、背角中间神经元的鉴别。方法利用出生8d乳鼠的腰段脊髓组织切片建立脊髓器官型培养模型,并用神经元的特异性SMI蛳32和Calretinin单克隆抗体进行免疫组化染色,对脊髓腹角α运动神经元和背角中间神经元加以鉴定,测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量。结果脊髓片在体外生长良好,形态完整,α运动神经元和背角中间神经元的数目及各时点培养液中LDH含量恒定,脊髓片可存活2个月以上。结论脊髓的器官培养技术为研究脊髓生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法。; 王晓娟宋学琴王丽琴肖向建刘卫刚马征李春岩; 关键词：器官型培养背角中间神经元运动神经元组织化学

大鼠运动区脑片培养及皮层锥体细胞的组化鉴定被引量：2: 2005年; 目的:探讨大鼠运动区脑片器官型培养的方法及其皮层第V层锥体细胞的鉴定。方法:利用出生后1天的乳鼠大脑活组织切片建立脑片的器官型培养模型,并用抗非磷酸化神经丝单克隆抗体SM-32对皮层锥体细胞加以鉴定。结果:脑片体外生长良好,形态完整,皮层锥体细胞数目恒定,并可存活1个月以上。结论:大鼠脑片的器官培养技术为研究大脑生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法。; 肖向建刘卫刚马征李敏李春岩; 关键词：脑片器官型培养锥体细胞

谷氨酸转运抑制剂对大鼠培养脑片皮层锥体细胞的影响被引量：2: 2006年; 目的观察谷氨酸转运抑制剂苏-羟天冬氨酸(THA)对大鼠培养脑片中大锥体细胞的影响,探讨谷氨酸在皮层运动神经元损伤中的作用。方法取出生后1 d SD乳鼠的运动区大脑切片培养,用含有不同浓度THA的培养液进行干预,培养后的脑片用神经元特异性免疫组化染色剂SMI-32(抗非磷酸化神经丝抗体)染色,对皮层大锥体细胞进行鉴定、计数,透射电镜观察超微结构,并测定不同时点培养液中谷氨酸(Glu)的含量。结果对照组脑片大锥体细胞数目稳定,而THA可以引起剂量依赖性培养液中Glu含量的升高及大锥体细胞数目减少,空泡变性。结论细胞外谷氨酸增高对大锥体细胞造成慢性损伤。; 肖向建刘卫刚李敏马征李春岩; 关键词：脑片谷氨酸肌萎缩侧索硬化

二相酶诱导剂D3T对运动神经元的保护作用被引量：5: 2007年; 研究二相酶诱导剂3H-1,2-dithiole-3-thione(D3T)对体外培养的运动神经元的保护作用。选用生后7天的SD乳鼠脊髓腰段切成薄片进行体外培养,正常培养1周后分组干预,对照组只加入正常培养液,THA组于培养液中加入谷氨酸转运体抑制剂threo-hydroxyaspartate(THA),D3T48h+THA组于培养液中加入不同浓度的D3T,48h后同时给予THA和相应浓度的D3T。D3T+THA组于培养液中同时给予THA和不同浓度的D3T。培养4周后观察运动神经元数量和超微结构变化。另外对培养1周后的脊髓薄片给予不同浓度的D3T,观察D3T干预48h后运动神经元数量与相应对照组之间的差异。结果显示D3T对THA引起的运动神经元的丢失有保护作用,且能够减轻THA引起运动神经元超微结构损害。由此认为,二相酶诱导剂D3T有望成为肌萎缩侧索硬化治疗的新切入点。; 刘晓云卜晖李哲李彬孙萌萌李春岩; 关键词：运动神经元脊髓

器官型培养的脊髓与体内脊髓的对比被引量：1: 2004年; 旨在观察体外器官型培养的脊髓薄片是否与同龄大鼠体内生长的脊髓具有相似的形态和恒定的前角a运动神经元数目,建立能模拟体内生长环境的稳定的脊髓器官培养模型。利用出生后8天乳鼠的腰段脊髓组织切片建立脊髓器官型培养模型,用神经元的特异性免疫组化染色SMI-32对脊髓前角a运动神经元加以鉴定并与同龄大鼠体内生长的脊髓做比较。结果发现脊髓体外生长良好,形态完整,a运动神经元数目恒定,与同龄大鼠比较无显著差异,并可长期存活达2个月。脊髓的器官培养技术为研究脊髓生理、病理改变及神经保护提供了有效的方法。; 李春岩王晓娟肖向建宋学琴王丽琴; 关键词：脊髓器官型培养神经元

大鼠选择性运动神经元死亡的脊髓器官型培养模型的建立被引量：9: 2004年; 利用谷氨酸转运体抑制剂苏羟天冬氨酸 (threo hydroxyaspartate ,THA)制备大鼠选择性运动神经元死亡的脊髓器官型培养模型。取出生后 8天乳鼠的腰段脊髓组织切片做脊髓器官型培养 ,在培养液中分别加入不同浓度THA(5 0 μmol/L、10 0 μmol/L、5 0 0 μmol/L) ,用神经元的特异性免疫组化染色SMI 32对脊髓腹角α运动神经元及背角中间神经元计数 ,测定培养液中乳酸脱氢酶 (LDH)的含量 ,并与对照组做比较。结果显示对照组α运动神经元数目恒定 ,THA可以引起剂量依赖性的α运动神经元数目减少和培养液中LDH含量增高 ,其中加用THA 10 0 μmol/L后 3周后即有α运动神经元数目较对照组明显减少 ,而脊髓背角的中间神经元数目无显著差异。利用谷氨酸转运体抑制剂THA 10 0 μmol/L可以制成选择性运动神经元损伤模型 ,为进一步研究肌萎缩侧索硬化 (ALS)的发病机制及探讨神经保护治疗提供了有效的方法。; 肖向建王晓娟刘卫刚李春岩; 关键词：运动神经元器官型培养脊髓中间神经元

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