国家自然科学基金(30871283)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
- 相关作者：刘力徐玉萍陈启民李健乔文涛更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院南开大学中国疾病预防控制中心更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- Hax1基因及其特异性小干扰RNA对人胚肾293细胞凋亡的影响
- 2011年
- 目的构建Hax1基因特异性小干扰RNA(sihax),检测sihax对Hax1基因的表达抑制,在293细胞中研究Hax1和Hax1siRNAs对细胞凋亡的影响。方法设计Hax1siRNA序列构建真核表达载体并转染到293细胞,倒置荧光显微镜下观察、流式细胞仪、AnnexinV-EGFP/PI双染法及RT-PCR检测靶基因Hax1的表达,以及293细胞的凋亡。结果成功构建了Hax1siRNA干扰质粒pBS/U6-sihaxA和pBS/U6-sihaxB,并且sihaxB对Hax1抑制效应明显强于sihaxA。过量表达Hax1可显著抑制293细胞的早期凋亡比例。用sihaxA和sihaxB抑制内源性Hax1表达,可使晚期细胞凋亡比例从对照的9.03%±0.473%分别增加到10.8%±0.513%(P<0.05)和16.6%±0.858%(P<0.01)。与此同时,sihaxB还可使早期细胞凋亡比例由37.3%±0.5%降低到32%±1.77%(P<0.01)。结论 Hax1siRNA对靶基因Hax1的抑制作用与靶序列的保守性有一定相关性。Hax1基因在细胞中参与凋亡相关的多种调节过程。本研究为进一步探讨Hax1功能奠定了基础。
- 龙琳刘力
- 关键词：小干扰RNA293细胞凋亡
- miRNA-467b在痛性糖尿病神经病变中对TNF-α的调节作用被引量：1
- 2018年
- 目的探讨miRNA-467b在痛性糖尿病神经病变中对TNF-α的调节作用。方法 SD大鼠腹腔内注射链脲佐菌素建立痛性糖尿病神经病变(模型组,n=20),空白组(n=20)注射生理盐水;模型组在建模完成后1周分为两组-实验组与对照组,每组10只大鼠,实验组注射人工合成的miRNA-467b,对照组注射等量的生理盐水,检测所有大鼠神经痛性状况与miRNA-467b、TNF-α表达水平。结果模型组大鼠的机械痛和热痛的反应潜伏期相比空白组都减少(P <0. 05),并且实验组的机械痛和热痛的反应潜伏期也高于对照组(P <0. 05)。模型组大鼠的miRNA-467b表达量相比空白组减少,TNF-α表达量上升,差异有统计学意义(P <0. 05);并且实验组的miRNA-467b、TNF-αmRNA表达水平与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05)。实验组大鼠的TNF-α蛋白表达量下降,与对照组比较差异有统计学意义(P <0. 05);同时模型组的TNF-α蛋白表达量高于空白组(P <0. 05)。结论痛性糖尿病神经病变中miRNA-467b呈现下调表达状况,可导致TNF-α表达上升,从而引起机械痛和热痛的产生。
- 夏志强郝利军吴斌
- 关键词：热痛糖尿病神经病变TNF-Α
- RNA沉默抑制子p19调控细胞周期相关蛋白表达(英文)被引量：2
- 2009年
- 番茄丛矮病毒的P19蛋白不仅是一个重要的病毒致病因子,而且还可作为RNA干扰(RNAi)的抑制子.这种作用是通过限制细胞内的小RNA,比如小干扰RNA(siRNAs)和微RNA(miRNAs)来实现.但是目前对P19蛋白在哺乳动物细胞上的作用还未见报道.构建了一株p19稳定表达的293细胞系,即293-p19.流式细胞仪分析发现在293细胞中过量表达P19蛋白可显著引发细胞周期的G2/M阻滞.细胞增殖实验显示,293-p19细胞的DNA复制及细胞生长均受到显著的抑制.此外,研究还发现p19可使人胚肾293细胞内的细胞周期调控子的表达谱发生改变.其中包括上调cyclinA1,CDK2,CDK4,CDK6,p18,cyclinD2,p19INK4d和E2F1,及下调p15,cyclinA,cyclinB1和cyclinE1的表达.上述研究结果提示,p19有可能靶向多个G2/M调控蛋白从而引发细胞的G2/M阻滞.
- 刘力李健徐玉萍乔文涛陈启民耿运琪
- 关键词：RNAIP19
