河北省科学技术研究与发展计划项目(09276199D) 作品数:10 被引量:51 H指数:4 相关作者: 王献华 高路杨 唐军栋 马小兵 赵静 更多>> 相关机构: 河北联合大学 华北煤炭医学院 唐山市丰润区人民医院 更多>> 发文基金: 河北省自然科学基金 河北省科学技术研究与发展计划项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
二氧化硅对人肺泡巨噬细胞和肺成纤维细胞IL-1β表达意义 被引量:2 2011年 目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)条件培养上清对人胚肺成纤维细胞(FB)白细胞介素(IL)-1β表达的影响。方法用酶联免疫吸附法检测离体经或不经SiO2刺激的矽肺患者AM在3、6、12、18、24、36 h上清中IL-1β的表达,取IL-1β表达高峰点的AM上清作为条件培养上清。采用免疫细胞化学法检测AM条件培养上清刺激FB于不同时间点(3、6、12、18、24、36、48 h)其细胞内IL-1β的表达。结果经SiO2刺激的矽肺患者AM上清中IL-1β的表达量明显升高(P<0.01),12 h达高峰;活化的矽肺患者12 h AM条件上清可以促进FB表达IL-1β增高(P<0.05);18 h表达最高,以后逐渐下降。结论在本实验条件下,经离体细胞培养,提示SiO2可通过上调AM和FB中IL-1β的表达,参与矽肺纤维化的形成过程。 王献华 蒋建姝关键词:二氧化硅 白细胞介素-1Β 肺泡巨噬细胞 成纤维细胞 趋化因子与矽肺 被引量:4 2013年 矽肺是我国发病率高,对劳动者危害严重的一类职业病。趋化因子作为一类特殊的细胞因子,在矽肺早期炎症和纤维化的发生发展中发挥重要作用。阐明趋化因子与肺纤维化发生发展的关系,更进一步了解肺纤维化的形成机制,为开辟矽肺防治新领域提供理论依据。 肖芳 高路杨 王献华关键词:矽肺 趋化因子 肺纤维化 槲皮素对SiO_2介导人胚肺成纤维细胞增殖及TGF-β1表达的影响 被引量:8 2013年 目的探讨槲皮素抗硅肺纤维化的作用机制。方法以支气管肺泡灌洗法收集硅肺患者AM,在体外用含有SiO2(50μg/ml)的DMEM培养基和不含SiO2的DMEM培养基培养18h,然后收集培养的AM上清液,加入低、中、高浓度槲皮素(10、20和40μmol/L)作为刺激上清。用组织贴块法获取培养HELF,与刺激上清液共同孵育后,MTT法检测HELF增殖情况,免疫细胞化学法检测HELF中TGF-β1的表达。结果 (1)各槲皮素组能抑制HELF增殖,并且浓度愈大抑制作用愈强,三组与SiO2+AM组(0.620±0.096)相比、中浓度组(0.406±0.070)和高浓度组(0.334±0.050)与AM组(0.490±0.064)相比差异有显著性(P<0.01)。(2)三种浓度槲皮素均能降低HELF中TGF-β1的表达,与SiO2+AM组(0.542±0.095)相比差异有显著性(P<0.05),与AM组(0.394±0.109)和空白对照组(0.314±0.066)比较差异无显著性。结论槲皮素对硅肺纤维化有一定的防治作用。 彭海兵 刘燕 王建行 赵霞 王献华关键词:槲皮素 SIO2 TGF-Β1 肺泡巨噬细胞 细胞 基因芯片技术在肺纤维化研究中的应用 被引量:1 2013年 肺纤维化的病变特点是肺部炎症导致肺泡持续性损伤、反复破坏、修复、重建及细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)的过度沉积,涉及到细胞、细胞因子、ECM等因素间的相互作用,是多因素、多环节参与的缓慢的错综复杂的过程,也是多种原因引起的慢性肺疾病的共同结局。 田莉 高路杨 唐军栋 王献华 马小兵 宋旭东关键词:肺纤维化 基因芯片技术 MATRIX 慢性肺疾病 肺部炎症 病变特点 血管生成素样蛋白4在肺纤维化过程中的作用 被引量:2 2014年 血管生成素样蛋白(Angiopoietin-like protein fami-ly, ANGTLs)是一种与脂类代谢、葡萄糖代谢、血管生成、肿瘤及代谢性疾病相关的分泌性蛋白质因子。在ANGPTLs系列基因的研究报道中以ANGPTL3、ANGPTL4和ANGPTL6较多。有动物实验提示,肺纤维化早期的病理变化是以肺内微血管内皮细胞受累为主的发展演变过程。本文就ANGPTL4的生物学结构与功能及其在肺纤维化过程中可能存在的作用与机制进行探讨,为肺纤维化机制的研究提供新思路。 薛荣 唐军栋 张宏伟 刘岩 肖芳 王献华关键词:肺纤维化 信号通路 血管生成 内皮细胞 二氧化硅对矽肺患者肺泡巨噬细胞白细胞介素-1β表达的影响 被引量:4 2010年 目的探讨二氧化硅(SiO2)刺激矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)对自细胞介素-1β(IL-1β)表达的影响。方法收集矽肺患者的肺泡灌洗液,分离培养AM,对照组加入无血清培养液,处理组加入含SiO2粉尘不含血清的培养液。两组在相同条件下分别培养3、6、12、18、24、36h,用免疫细胞化学法和酶联免疫吸附(ELISA)方法检测AM细胞内及其培养上清中IL—Iβ的表达。结果处理组AM胞质中的IL-1β表达呈双峰,3h已有较高水平的IL—16(平均吸光度值为0.2597±0.0102),并随刺激时间不同表达量不同,在12h达最高浓度(平均吸光度值为0.3632±0.0076),且处理组AM胞质中IL-1β的表达在各个时间点均高于对照组,差异有统计学意义(P〈0.01);AM培养上清IL-1β的表达与细胞质内的情况一致。结论SiO2可促进AM的IL-1β表达增高,IL-1β在肺纤维化形成过程中起较重要的作用。 蒋建姝 王献华 马小兵 赵静关键词:二氧化硅 肺泡 矽肺 矽肺纤维化发展过程中差异基因MMP-12功能的实验研究 被引量:1 2017年 目的构建基质金属蛋白酶-12(MMP-12)基因小干扰RNA片段(siRNA)表达质粒,探讨MMP-12基因在矽肺纤维化发展过程中的功能。方法利用RNA干扰技术,将构建的MMP-12-siRNA表达质粒转染大鼠肺成纤维细胞(FB),筛选出最佳干扰基因序列。实验分为3组:对照组(C),加未经SiO_2粉尘刺激的肺泡巨噬细胞(AM)培养上清液;SiO_2刺激组(S),加经SiO_2粉尘刺激的AM培养上清液;转染组(T),首先将筛选出的含最佳干扰基因序列的质粒转染FB,基因沉默后,再加经SiO_2粉尘刺激的AM培养上清液。运用免疫细胞化学法检测各组中I型及Ⅲ型胶原蛋白的表达情况。结果经条件上清培养液刺激后,S组FB中各时段I型胶原及Ⅲ型胶原表达均比C组增加,S组I型胶原蛋白为0.360 8±0.006 9~0.694 3±0.007 3,C组为0.240 9±0.005 8~0.257 8±0.009 0,差异均有统计学意义;Ⅲ型胶原蛋白为0.198 9±0.027 8~0.412 9±0.010 8,差异亦均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);T组FB中I型胶原及Ⅲ型胶原的表达均比S组明显减少,差异有统计学意义(P<0.01)。结论利用RNA干扰技术将MMP-12-siRNA表达质粒转染FB,可沉默MMP-12基因的表达,并可减少I及Ⅲ型胶原蛋白的沉积,证实MMP-12基因在矽肺纤维化的发展中起重要作用。 尹丹丹 唐军栋 高路杨 景友玲 马小兵 张云香 王献华关键词:矽肺纤维化 成纤维细胞 RNA干扰技术 矽肺患者肺泡巨噬细胞培养上清对人胚肺成纤维细胞增殖的影响 被引量:2 2013年 目的:探讨二氧化硅(SiO2)刺激的矽肺患者肺泡巨噬细胞(AM)培养上清中IL-1β的表达及其协同其它因子对人胚肺成纤维细胞(FB)增殖的作用。方法:收集矽肺患者肺灌洗液中的AM,在体外以SiO2(50μg/ml)和不加血清的DMEM培养3、6、12、18、24、36小时,采用ELISA法检测不同时间点AM上清中IL-1β的表达,并用MTT和3H-TdR法检测AM培养上清作用于FB的细胞增殖情况。结果:经SiO2刺激的矽肺患者AM上清中IL-1β的表达明显上调,与对照组同时间相比,差异具有显著性(P<0.01),IL-1β表达在体外培养12小时达最高峰;AM培养上清各时间点均有促进FB增殖的作用,18小时上清促增殖作用最强,且经SiO2刺激的AM上清促细胞增殖作用更显著(P<0.05,P<0.01)。结论:SiO2再刺激的矽肺患者AM培养上清可以促进人胚肺FB的增殖,其机制之一可能为上调AM中IL-1β的表达进而影响细胞因子网络调控。 蒋建姝 高路杨 唐军栋 朱兰 宋旭东 王献华关键词:肺泡巨噬细胞 培养上清 成纤维细胞 白细胞介素-1Β 矽肺大鼠肺纤维化发展过程中差异基因PAI-1功能的实验研究 被引量:1 2012年 目的构建纤溶酶原激活物抑制因子-1(PAI-1)基因小干扰RNA片段(siRNA)表达质粒,探讨PAI-1基因在矽肺纤维化发病中的功能。方法利用RNA干扰技术,将构建的PAI-1-siRNA表达质粒转染大鼠肺成纤维细胞(FB),筛选最佳干扰序列。实验分3组:对照组(C),加入未经二氧化硅(SiO2)粉尘刺激的肺泡巨噬细胞(AM)培养上清;SiO2刺激组(S),加入经SiO2粉尘刺激的AM培养上清;转染组(T),先将筛选出最佳干扰序列的质粒转染FB,再加入经SiO2粉尘刺激的AM培养上清。用免疫细胞化学法检测各组I、Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果经条件上清刺激后,S组与C组比较,FB中I、Ⅲ型胶原表达增加(P<0.05或P<0.01);T组与S组比较,FB中Ⅰ、Ⅲ型胶原的表达明显下降(P<0.01)。结论通过RNA干扰技术将PAI-1-siRNA表达质粒转染FB,可使PAI-1基因沉默,且可减少细胞外基质的沉积,提示PAI-1基因与矽肺纤维化的发生、发展密切相关。 尹丹丹 唐军栋 高路杨 景友玲 马小兵 赵静 宋旭东 王献华关键词:纤溶酶原激活物抑制因子-1 RNA干扰技术