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江苏省高校自然科学研究项目(03KJB320139)

作品数：2 被引量：0H指数：0
相关作者：徐开林邱婷婷李振宇孙海英潘秀英更多>>
相关机构：徐州医学院附属医院更多>>
发文基金：江苏省高校自然科学研究项目更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇磷脂酰肌醇
  • 2篇聚糖
  • 2篇基因
  • 2篇肌醇
  • 1篇荧光
  • 1篇造血
  • 1篇造血干
  • 1篇造血干细胞
  • 1篇造血干细胞疾...
  • 1篇增强型
  • 1篇逆转
  • 1篇逆转录
  • 1篇逆转录病毒
  • 1篇逆转录病毒载...
  • 1篇转录
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞疾病
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇基因治疗
  • 1篇干细胞

机构

  • 2篇徐州医学院附...

作者

  • 2篇潘秀英
  • 2篇孙海英
  • 2篇李振宇
  • 2篇邱婷婷
  • 2篇徐开林
  • 1篇何徐彭
  • 1篇杜冰

传媒

  • 1篇江苏医药
  • 1篇中华血液学杂...

年份

  • 1篇2007
  • 1篇2006
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
磷脂酰肌醇聚糖A类基因逆转录病毒载体的构建及表达
2006年
阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）是一种获得性良性克隆性造血干细胞疾病，研究发现PNH患者体内存在磷脂酰肌醇聚糖A类（PIG—A）基因异常，导致患者血细胞表面糖基磷脂酰肌醇锚蛋白（GPI—AP）缺乏，临床上出现血管内溶血等一系列表现。恢复PNH表型细胞的PIG—A基因的表达有可能逆转其GPI—AP的表达，为PNH的治疗提供新途径。我们构建了含PIG—A基因的逆转录病毒载体，体外转染PNH表型细胞，为PNH基因治疗提供实验依据。
邱婷婷徐开林李振宇潘秀英孙海英何徐彭
关键词：聚糖造血干细胞疾病基因治疗PNH
PIG-A基因逆转录病毒表达载体及包装细胞系的建立
2007年
目的构建含磷脂酰肌醇聚糖A类基因（PIG-A）的逆转录病毒载体并对其进行包装，获得稳定的产毒细胞系。方法采用PCR方法从质粒pEBPIG-A中扩增PIG-A基因片断，BarnHI及XhoI双酶切后连接至逆转录病毒载体pLEGFP-C1，用限制性内切酶和DNA序列测定的方法对重组质粒进行鉴定。脂质体法转染PA317包装细胞，荧光显微镜下观察EGFP瞬时表达，G418筛选抗性克隆，收集病毒上清后感染NIH3T3细胞测定病毒滴度。结果酶切证实PIG-A基因克隆至逆转录病毒载体，测序结果和原始序列相同。重组逆转录病毒载体转染PA317包装细胞，24～48h后荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白的表达。经CAl8筛选得到6个稳定抗性克隆，病毒滴度最高达1．6×10^5CFU／ml。结论构建了含PIG-A基因的逆转录病毒载体，获得了稳定的产毒细胞系。
邱婷婷徐开林李振宇潘秀英孙海英杜冰
关键词：逆转录病毒载体
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