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PHF8 is a histone H3K9me2 demethylase regulating rRNA synthesis被引量：7: 2010年; histone H3 离氨酸 9 的 Dimethylation (H3K9me2 ) 是与抄写压抑联系的一个重要 epigenetic 标记。这里，我们识别了 PHF8， JmjC-domain-containing 蛋白质，为这个镇压标记特定的 histone demethylase。Recombinant 全身的野类型蛋白质能把 methylation 从 H3K9me2 移开，但是到丙氨酸 H247A 的保存 histidine 的变化废除 demethylase 活动。Overexpressed 外长的 PHF8 是 colocalized， B23 染色。内长的 PHF8 也是有 B23 和 fibrillarin 的 colocalized，二生长得很好的核蛋白质，建议那 PHF8 在核是局部性的并且可以调整 rRNA 抄写。确实， PHF8 跳了到 rDNA 基因的倡导者区域。减少的 PHF8 击倒 rRNA 的表示，和基因的 overexpression 导致了 rRNA 的 upregulation 抄本。附随地， H3K9me2 水平在 PHF8 击倒的房间在 rDNA 基因的倡导者区域被提高并且当野类型然而并非催化地不活跃的 H247A 变异的 PHF8 是 overexpressed 时，显著地减少了。因此，我们的学习为调整 rRNA 抄写的 H3K9me2 识别了 histone demethylase。; Ziqi ZhuYanru WangXia LiYiqin WangLongyong XuXiang WangTianliang SunXiaobin DongLulu ChenHailei MaoYi YuJingsong LiPin Adele ChenCharlie Degui Chen; 关键词：脱甲基酶 FIBRILLARIN RDNA基因

PDX-1表达质粒的构建及表达: 2009年; 目的:为进一步研究PDX-1基因的功能打下基础。方法:从人的胰腺cDNA中PCR扩增PDX-1基因的阅读框架,构建质粒pAAV-PDX-1。用pAAV-PDX-1转染293T细胞48小时后,用RT-PCR和Western Blot方法检测293T细胞中mRNA和蛋白水平PDX-1的表达。结果:转染了pAAV-PDX-1的293T细胞中有PDX-1的表达,而在转染质粒pAAV-MCS和未转染的293T细胞中均没有检测到PDX-1的表达。结论:构建的pAAV-PDX-1质粒在mRNA和蛋白水平都能表达PDX-1。; 夏华强刘律君徐小明卢光琇; 关键词：质粒构建 293T细胞

小鼠肝脏窦状内皮细胞分离和培养的一种新方法被引量：5: 2010年; 目的:建立小鼠肝窦状内皮细胞(liver sinusoidal endothelial cells,LSEC)的分离培养方法,研究其生物学特性。方法:中性蛋白酶消化小鼠肝脏组织,Percoll密度梯度离心分离消化后的细胞悬液,用内皮细胞筛选培养基及酶差异消化法纯化LSEC;免疫细胞化学染色检测LSEC的表面标志,分析LSEC的超微结构,观察DiI荧光标记的乙酰低密度脂蛋白(acetylated-low density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)摄取能力,以体外成血管能力分析LSEC的功能。结果:分离纯化后的细胞呈典型鹅卵石样内皮细胞形态,这些细胞表达VIII因子,不表达CD31,CD90和CK19,具有窦状内皮细胞特征性的窗孔结构;能摄取DiI-Ac-LDL,并有一定的成血管能力。结论:建立了一种分离、培养LSEC的方法,为研究LSEC的功能奠定了基础。; 赵秀华罗彬罗盘程腊梅; 关键词：条件培养基窗孔小鼠

miR375表达质粒构建及表达研究被引量：1: 2010年; 目的寻找一种高效、简便的构建表达miRNA质粒的方法。方法该研究用PCR方法直接从小鼠gDNA扩增了包含miRNA375(miR375)前体序列在内的一个126bp片段以构建质粒pAAV-miR375。该研究用pAAV-miR375转染Hela细胞48h后,用定量RT-PCR方法和Northernblot检测Hela细胞中miR375的表达。结果转染了pAAV-miR375的Hela细胞中有miR375的表达,而在转染了空质粒pAAV-MCS和未转染的Hela细胞中没有检测到miR375的表达。结论该研究所构建的pAAV-miR375质粒能够表达miR-NA375。作者介绍的这一种构建表达miRNA质粒的方法比以往的方法更快速、高效、简便和保证序列的正确性。; 夏华强潘艺徐小明刘律君彭炬卢光琇; 关键词：质粒构建 HELA细胞

一个新的C-末端内质网定位信号RFSK: 2010年; 蛋白质的亚细胞定位与其生物学功能有密切的关系。以一个新的小鼠N5-谷氨酰胺甲基转移酶基因mHemk的两个转录剪接本mHemkl和mHemk2(GenBank编号分别为AY456393和AY583759)为材料,进一步分析了该蛋白的亚细胞定位。根据生物信息学预测,在这两个蛋白质C-末端可能分别存在内质网(ER)定位信号RFSK和KSLK,且这两个蛋白质都可能主要定位于细胞质。分别构建了这两个蛋白质以及相应的删除了C-末端RFSK和KSLK的缺失突变体与加强型绿色荧光蛋白的融合蛋白的表达质粒,并转染到MCF-7细胞中。结果证明mHemkl蛋白中的RFSK基序是一个新的内质网定位信号,但没有足够的证据支持KSLK基序是mHemk2蛋白的内质网定位信号。这两个转录剪接本蛋白不同的亚细胞定位是否表明它们在不同的亚细胞器内有不同的功能仍值得深入研究。; 梁琳刘永波彭炬卢光琇; 关键词：亚细胞定位

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国家重点基础研究发展计划(2007CB947900)