浙江省自然科学基金(LY12C20008)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：李连军杨最素孙瑜丁国芳徐律更多>>
- 相关机构：浙江海洋学院浙江海洋大学更多>>
- 发文基金：浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 抗前列腺癌菲律宾蛤仔酶解多肽的制备被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨菲律宾蛤仔酶解多肽的制备方法以及体外抗前列腺癌PC-3、DU-145细胞的活性。方法:以胰蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和中性蛋白酶4种蛋白酶为供选酶种,以酶解液中游离ANN含量和腥味值为测量指标,对酶种进行筛选,以获得最佳酶解工艺。选择分子质量3 ku以下的酶解液分离纯化,所得多肽通过MTT法、AO/EB染色,做体外抗前列腺癌细胞试验。结果:胰蛋白酶酶解效果最佳,最佳酶解条件组合是pH 8.0,温度50℃,酶解时间8 h,加酶量1200 u/g。分子质量3 ku以下的酶解液能抑制PC-3、DU-145细胞生长,出现细胞凋亡的形态学改变。结论:由胰蛋白酶酶解所得多肽,在体外能抑制前列腺癌PC-3和DU-145细胞生长,诱导细胞凋亡。
- 杨最素徐律李连军黄芳芳郁迪孙瑜
- 关键词：菲律宾蛤仔前列腺癌细胞抗癌活性
- 菲律宾蛤仔酶解寡肽的制备及抗前列腺癌PC-3细胞的实验研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究菲律宾蛤仔酶解寡肽(RPO)的制备及体外抗前列腺癌PC-3细胞的活性。方法选用胰蛋白酶对菲律宾蛤仔进行酶解,经截取分子量为3KDa的超滤膜、DEAE SepharoseFF阴离子交换、反相高效液相色谱C18分离制备菲律宾蛤仔酶解寡肽,并应用MTT法、AO/EB染色及Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测其体外抗PC-3细胞增殖活性。结果菲律宾蛤仔酶解多肽3KDa以下的组分经阴离子交换,得到的峰1由液相色谱纯化后,获到分子量为607.6 kDa寡肽样品;MTT法结果显示,该寡肽能抑制PC-3细胞增殖,呈剂量和时间依赖;AO/EB染色PC-3出现凋亡的形态学改变;流式细胞仪检测PC-3细胞早期凋亡率、坏死率随寡肽浓度增加而增多,明显高于对照组。结论胰蛋白酶酶解菲律宾蛤仔得到的寡肽能抑制PC-3细胞增殖,诱导凋亡。
- 徐律杨最素黄芳芳李荣王铣孙瑜
- 关键词：菲律宾蛤仔寡肽PC-3细胞凋亡
- 菲律宾蛤仔提取物及生物活性的研究进展被引量：5
- 2013年
- 菲律宾蛤仔是我国四大养殖贝类之一,营养丰富,蛋白含量高,具有食用和药用价值。从菲律宾蛤仔中提取的氨基多糖、糖胺聚糖、糖蛋白、活性多肽等物质,具有抗肿瘤、抗氧化、降血脂、增强免疫力及抗动脉粥样硬化等作用,本文综述这些生物活性成分的研究现状,为海洋功能食品和海洋药物的研发提供参考。
- 徐律李连军杨最素孙瑜丁国芳
- 关键词：菲律宾蛤仔提取物生物活性
- 菲律宾蛤仔酶解多肽抗前列腺癌DU-145细胞的活性研究
- 2013年
- [目的]探讨菲律宾蛤仔酶解多肽抗人前列腺癌DU-145细胞增殖的活性。[方法]对菲律宾蛤仔内脏进行酶解,经超滤截取3 kD以下的多肽,应用MTT法、倒置显微镜观察和AO/EB染色等方法检测其体外抗DU-145细胞的活性。[结果]MTT法检测结果表明不同浓度的多肽对DU-145细胞有明显的生长抑制作用。通过倒置显微镜观察和AO/EB荧光双染观察到DU-145细胞出现细胞凋亡的形态学特征。[结论]菲律宾蛤仔3 kD以下的多肽具有抑制DU-145细胞生长,呈浓度和时间依赖性,并诱导细胞凋亡作用。
- 李连军徐律杨最素丁国芳孙瑜
- 关键词：菲律宾蛤仔前列腺癌细胞凋亡
- 菲律宾蛤仔寡肽抗前列腺癌DU-145细胞的机制研究被引量：3
- 2017年
- 为研究人工合成的菲律宾蛤仔寡肽体外抗前列腺癌细胞DU-145的活性及作用机制,实验采用流式细胞仪、激光共聚焦显微镜、Western blot等方法检测人工合成菲律宾蛤仔寡肽作用于DU-145细胞后细胞凋亡率、线粒体膜电位改变、细胞色素C表达、caspase3、caspase9的变化,并用电子显微镜观察细胞超微结构的改变。结果显示,随着药物浓度的增加和作用时间的延长,DU-145细胞的抑制率逐步增高,当药物浓度为2.5 mg/m L时,24 h抑制率为49.9%±4.1%,72 h抑制率为97.2%±7.34%;Hoechst33258染色和电子显微镜下观察发现,加药组细胞出现细胞核固缩、染色质凝集和细胞核碎片化等细胞凋亡的典型特征,随着药物浓度的增加,凋亡的细胞逐渐增多;线粒体膜电位逐步下降;Western blot检测显示药物作用后细胞内Bax表达增加,Bcl-2表达减少,Bax/Bcl-2比值增加,Cyt-C、caspase-3、caspase-9表达增加,且与药物浓度成正相关。研究表明,人工合成菲律宾蛤仔寡肽能诱导人前列腺癌细胞DU-145凋亡,可能机制为上调Bax表达、下调Bcl-2表达、增加Bax/Bcl-2比值,诱导线粒体膜电位下降,促使Cyt-C转移并激活caspase家族发生级联反应。
- 孙瑜李连军杨最素丁国芳
- 关键词：菲律宾蛤仔寡肽前列腺癌CASPASE家族CYT-C
