国家重点基础研究发展计划(2002CCCA02800)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:陈新文李京京姚青余泽华杨东叶更多>>
- 相关机构:中国科学院华中师范大学中南大学更多>>
- 发文基金:国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生更多>>
- 棉铃虫核多角体病毒泛素基因的克隆表达及抗体制备被引量:4
- 2005年
- 昆虫杆状病毒和痘病毒是目前已知唯一编码泛素基因的病毒。通过PCR方法,克隆了棉铃虫核多角体病毒(HaSNPV)泛素基因(Ubiquitin,Ubi)。序列分析表明,该基因编码区全长252bp,编码83个氨基酸残基,预计分子量为9.24kDa。将泛素基因克隆到原核表达载体pET28a上,构建重组质粒pETUbi,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,IPTG诱导表达融合蛋白。用Histag抗体检测目的蛋白,Westenblot实验证明所表达的蛋白是带有Histag的重组融合蛋白。通过改变IPTG浓度和诱导时间对表达条件进行了优化。利用NI琼脂糖凝胶亲和层析柱纯化目的蛋白,SDSPAGE鉴定为单一条带,同时用提纯蛋白制备了特异性抗体,为进一步的研究打下基础。
- 李京京姚青杨东叶余泽华陈新文
- 关键词:棉铃虫核多角体病毒泛素克隆原核表达抗血清
- 杆状病毒介导的GFP基因转染兔髓核组织的离体研究
- 2005年
- 刘小云李康华宋建华朱峥嵘张勇陈新文
- 关键词:GFP离体研究髓核组织基因转染病毒介导外源性基因