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上皮型钙黏蛋白对小鼠胚胎干细胞向肝细胞分化的增强调控作用被引量：1: 2012年; 目的观察上皮型钙黏蛋白（E-cad）对小鼠胚胎干细胞（ESC）在体外向肝细胞分化的增强调控作用。方法将E-cad转染入BALB／c小鼠ESC使其稳定表达，再利用肝细胞生长因子（HGF）等诱导其向肝细胞分化。然后用逆转录一聚合酶链反应（RT-PCR）检测肝细胞标记基因ALB、TAT、Cyp7a1的表达，用RIA法检测培养液ALB和尿素合成情况，显微镜观察分化细胞数量和黏附状态。结果（1）普通ESC在拟胚体（EB）形成后表达E-cad最强，其后表达降低至17d不再表达，而E-cad-ESC则稳定表达E-cad；（2）肝细胞标记基因ALB、TAT和Cyp7a1在E-cad—ESC组表达要早于或强于普通ESC组，ALB和尿素合成方面，E-cad-ESC组早于普通ESC组[普通ESC组，ALB最早出现于第11天，浓度为（0．20±0．03）mg／L，在17d达到最高为（3．71±0．45）mg／L；尿素最早出现于第12天，浓度为（8．01±1．21）μmol／L，在17d达到最高为（45．01±8．01）μmol／L。E-cad—ESC组，ALB最早出现于第9天，浓度为（0．19±0．03）mg／L，在17d达到最高为（5．52±0．82）mg／L；尿素最早出现于第10天，浓度为（5．90±1．21）μmol／L，在17d达到最高为（56．93±9．03）μmol／L]，差异有统计学意义；（3）普通ESC在分化后期表现为松散的细胞群落，分化细胞数量稀少，E—cad—ESC分化细胞数量明显增多，细胞黏附能力增强并呈紧密的多层生长。结论E—cad可增强ESC向肝细胞的分化作用，表现为分化细胞数量增多并呈多层生长，ALB及尿素合成能力增强，有望成为一种在ESC向肝脏方向分化研究中的重要调控因子。; 胡安斌商昌珍闵军蔡继业何晓顺; 关键词：胚胎干细胞上皮型钙黏蛋白细胞分化肝细胞

上皮型钙黏蛋白诱导小鼠胚胎干细胞向类肝脏组织分化的研究: 2012年; 目的观察上皮型钙黏蛋白（E—cad）诱导胚胎干细胞（ESC）体外分化为类肝脏组织的作用。方法将E—cad转染入BALB／C系小鼠ESC并使其稳定表达，利用肝细胞生长因子（HGF）、成纤维细胞生长因子（FGF）、转化生长因子（TGF）等诱导其向肝细胞分化。于分化系统中检测肝细胞、胆管上皮细胞（BEC）和血管内皮细胞标记物的表达，并观察分化细胞形态。结果（1）E—cad在普通ESC中随分化而表达降低，并在17d时不再表达，而在E-cad—ESC中则稳定表达；（2）E-cad—ESC分化细胞在17d时表达肝细胞、BEC和血管内皮细胞标记物白蛋白（ALB）、γ-谷氨酰转肽酶（GGT）和血管内皮生长因子受体（VEGFR）等，而普通ESC则仅表达肝细胞和BEC标记物；（3）E—cad—ESC分化细胞黏附明显增强，至17d仍保持紧密的多层生长状态，并形成表达ALB、CK19和VEGFR等的脉管网络结构，而普通ESC则呈分散的单层细胞生长。结论稳定表达E-cad的ESC分化细胞黏附能力增强并呈多层生长，可形成一种由肝细胞、BEC和内皮细胞及其脉管网共同组成的类组织结构。; 胡安斌商昌珍闵军蔡继业何晓顺; 关键词：胚胎干细胞分化钙黏蛋白肝脏组织

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广东省科技攻关计划(20098030801126)

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