云南省应用基础研究计划面上项目(2009ZC185M)
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 相关作者：鲁帅尧和占龙赵远禹文海王俊斌更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院更多>>
- 发文基金：云南省应用基础研究计划面上项目云南省技术创新人才培养基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 树鼩Retn基因的克隆及序列测定被引量：2
- 2011年
- 目的克隆树鼩(Tupaia belangeri)Retn基因,为在树鼩中开展Retn相关研究提供实验资料。方法在树鼩脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行基因扩增,通过基因克隆、重组质粒的酶切鉴定,对Retn克隆质粒的序列测定和分析。结果抽提的总RNA完整性较好,RT-PCR产物电泳检测得到了目的条带,重组克隆质粒经Pst I单酶切证明了Retn基因已克隆至质粒载体,测序获得了363个核苷酸序列,1个编码114个氨基酸的开放阅读框,序列提交GenBank,登录号为JF267792;经Blast软件进行序列分析,其核苷酸序列和氨基酸序列与鼠类的同源性分别为95%和99%。结论成功克隆了树鼩Retn基因及序列测定,为树鼩Retn基础数据的建立和开展相关研究提供了实验资料。
- 鲁帅尧和占龙禹文海赵远陈瑜李鸿钧
- 关键词：树鼩克隆测序
- 猕猴抵抗素基因克隆及序列分析被引量：1
- 2013年
- 目的克隆猕猴抵抗素基因，并对其进行鉴定及序列分析。方法用猕猴腹部脂肪组织提取总RNA，采用RT—PCR进行抵抗素基因扩增，克隆至质粒载体，通过PCR和酶切鉴定后，进行测序，用DNAMAM软件进行序列分析，再用ORFfinder软件确定其编码区，并用BLAST软件比对。结果RT—PCR产物电泳检测得到了363bp目的条带，重组克隆质粒经PCR和XbaI与PstI双酶切鉴定均为阳性，测序结果经序列分析表明，其与人类抵抗素基因序列的同源性为96％，与大鼠的同源性为67％，与小鼠的同源性为65．7％，基于抵抗素基因的进化树结果表明猕猴与人类有较近的亲缘关系；ORFfinder软件的分析结果表明，编码猕猴抵抗素的氨基酸有108个，与人类抵抗素氨基酸的同源性为92％，仍然具有较高的同源性。结论成功克隆了猕猴抵抗素基因，可为下一步在猕猴中开展相关研究奠定前期基础和提供实验资料。
- 鲁帅尧王俊斌杨凤梅禹文海赵远陈丽雄李艳艳和占龙
- 关键词：抵抗素基因克隆猕猴
- ELISA方法检测恒河猴血清中抵抗素被引量：2
- 2011年
- 目的用ELISA检测试剂盒,探索一种恒河猴血清抵抗素(Resistin)定量的快速检测方法,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。方法选择用于人抵抗素检测的ELISA定量检测试剂盒,对恒河猴血清进行抵抗素的测定;按年龄段将实验猴分组,幼年组、成年组和老年组,每组10只,制备血清,检测抵抗素,并进行统计分析,初步建立各年龄段恒河猴血清抵抗素的正常参考值。结果用ELISA定量检测试剂盒测定恒河猴血清抵抗素数值稳定,幼年组、成年组和老年组的血清抵抗素正常参考值分别为(6 510±1 730)pg/mL、(5 880±1 250)pg/mL和(1 760±920)pg/mL,有随年龄增长而逐步降低的趋势,老年组极显著低于幼年组和成年组(P<0.01)。结论人抵抗素ELISA检测试剂盒可以作为一种对恒河猴血清抵抗素定量的临时快速的检测方法,且随着年龄的增长其血清抵抗素正常参考值有逐步降低趋势。
- 赵远鲁帅尧和占龙禹文海王俊斌
- 关键词：恒河猴血清抵抗素ELISA
- 实验性高脂血症恒河猴模型的初步建立及分析被引量：6
- 2012年
- 目的建立实验性高脂血症恒河猴模型,为人类高脂血症研究提供理想动物模型。方法设计高脂实验饲料配方并检测常规营养成分,用高脂饲料诱导实验性高脂血症恒河猴模型,分别在2个月、4个月、6个月后监测体重、血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)等指标,对其血脂指标的变化趋势进行分析。结果模型组在实验2个月、4个月时的日采食量和摄入能量均低于对照组(P<0.05),但体重则无明显变化(P>0.05);而在实验6个月时日采食量和摄入能量与对照组无显著性差异(P>0.05),体重有显著性差异(P<0.05);模型组与对照组的TC、TG、HDL-C、LDL-C在实验前和2个月比较无显著性差异(P>0.05);在4个月比较时TC、TG、LDL-C有显著性差异(P<0.05),而HDL无显著性差异(P>0.05);在6个月比较时TC、LDL-C有显著性差异(P<0.05),并且TC、LDL-C远远高于恒河猴血脂的正常参考值水平,而TG、HDL-C则无显著性差异(P>0.05);变化趋势分析结果为,模型组TC和LDL-C水平有递增趋势、TG水平则出现了先递减后逐渐恢复的趋势、HDL-C水平未出现明显变化趋势。结论模型组恒河猴具有高胆固醇血症和高低密度脂蛋白血症的特征,已经初步建立了实验性恒河猴高脂血症动物模型。
- 杨凤梅李艳艳鲁帅尧赵远禹文海陈丽雄王俊斌和占龙
- 关键词：血脂高脂血症动物恒河猴
- 从ICR小鼠脂肪组织对resistin基因的扩增被引量：2
- 2011年
- 目的 PCR扩增ICR小鼠脂肪组织的resistin基因,为进一步在ICR小鼠中开展resistin的相关研究提供必要的基础。方法在脂肪组织中抽提总RNA,用RT-PCR进行resistin基因的体外扩增,经电泳检测和测序后用DNAMAN软件进行碱基序列分析。结果抽提的总RNA完整性较好,RT-PCR产物电泳检测获得了363 bp的目的条带,双向测序的碱基峰值图均一,所扩增片段的序列与GenBank报道的小鼠resistin序列有93.8%的同源性,说明获得的基因片段是ICR小鼠的resistin基因。结论在体外成功扩增了ICR小鼠脂肪组织的resistin基因,可为在ICR小鼠中开展resistin基因生物功能等的研究奠定基础。
- 鲁帅尧赵远唐东红和占龙禹文海邵聪文
- 关键词：ICR小鼠脂肪组织扩增
- 人类与部分实验动物RETN基因同源性分析被引量：2
- 2012年
- 目的分析人类与部分实验动物的RETN基因同源性,为人类RETN基因相关疾病及基因功能研究对理想实验动物的选择提供依据。方法提取猕猴、大鼠、小鼠和树鼩的脂肪组织总RNA,用相应的RETN引物进行RT-PCR,对其产物进行双向测序;同时在GenBank中查询人类、猪、牛的RETN基因序列;再运用ORF Finder软件调取其ORF核苷酸序列和氨基酸序列,用DANMAN软件对所获得的序列进行比对,分析其同源性。结果人类RETN的核苷酸序列与猕猴、小鼠、树鼩、大鼠、猪、牛的同源性分别为95.4%、65.4%、65.4%、66.4%、81.0%、81.0%;氨基酸序列分别为91.7%、55.6%、55.6%、53.7%、75.9%、72.2%。;系统进化树结果表明,就RETN基因而言,人与猕猴的亲缘关系较近。结论基于同源性分析结果,在RETN的进化上猕猴与人类存在较近的亲缘关系,是研究人类RETN生物学功能及其相关疾病的最佳实验动物。
- 鲁帅尧龙海亭禹文海和占龙赵远杨凤梅李鸿钧
- 关键词：同源性实验动物小鼠树鼩
- 高脂血症恒河猴血清RETN与血脂的相关性分析被引量：2
- 2012年
- 目的探讨高脂血症恒河猴血清抵抗素(RETN)水平与血脂的相关性。方法高脂血症恒河猴和健康恒河猴各8只,分别为实验组及对照组,测定其空腹血清RETN、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C),分析高脂血症恒河猴血清RETN水平与血脂的关系。结果实验组的血清RETN水平、TC、LDL-C显著高于对照组(P<0.05),实验组TG较对照组显著降低(P<0.05);两组HDL-C差异不显著(P>0.05)。相关分析显示,血清RETN与TC、LDL-C正相关,与TG负相关,与HDL-C无相关性。结论高脂血症恒河猴血清RETN水平与血脂存在相关性,可为人类高脂血症研究提供实验数据。
- 李艳艳和占龙赵远杨凤梅禹文海陈丽雄王俊斌鲁帅尧
- 关键词：高脂血症恒河猴抵抗素血脂
