广东省社会发展科技计划项目(2007B080701022)
- 作品数:2 被引量:11H指数:1
- 相关作者:谢庆东马廉唐秋灵林广裕黄天华更多>>
- 相关机构:汕头大学汕头大学医学院第二附属医院汕头大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金:广东省社会发展科技计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 脐带间充质干细胞在精原细胞培养条件下的生殖细胞特性被引量:10
- 2008年
- 目的研究人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)在精原细胞培养条件下向精原细胞方向分化的潜能。方法采用组织块贴壁法获得MSCs,取第3代MSCs分组进行诱导培养:对照组用基本培养液培养,实验组用条件培养液培养。用倒置显微镜和扫描电镜观察对照组和实验组细胞的外部形态差异;透射电镜观察2组细胞内部的超微结构变化;免疫组织化学方法检测2组细胞是否表达精原细胞的标记物CD117及CD49f;Western blot进一步检测2组细胞表达精原细胞特异性标记物CD49f的情况。结果以人脐带华尔通胶为原料培养获得的贴壁细胞高表达MSCs相关的标记,不表达或低表达造血细胞和与移植排斥相关的细胞表面标记,并可以维持在未分化状态稳定生长、增殖;实验组细胞形态发生了明显变化,由成纤维细胞形变为圆形,并发现极少数变圆的细胞继续分化呈形似蝌蚪状,对照组细胞形态不发生类似变化,超微结构也显示了很大的差异;免疫组织化学证实实验组细胞表达精原细胞的标记物CD117、CD49f,而对照组细胞不表达CD49f,CD117弱阳性表达;Western blot进一步证实人脐带MSCs诱导前不表达精原细胞标记CD49f,而诱导后表达CD49f。结论用组织块贴壁法获得人脐带来源的MSCs,在精原细胞培养条件下进行诱导培养,不仅能发生精原细胞样的形态变化及伴发细胞的分化过程,而且能表达精原细胞的特征性标记,证实人脐带来源的MSCs具有向精原细胞方向分化的潜能。
- 唐秋灵何红燕林广裕林丽敏谢庆东黄天华马廉
- 关键词:脐带间充质干细胞精原细胞生物学特征
- 人脐带间充质干细胞移植于不育小鼠睾丸的研究被引量:1
- 2009年
- 目的观察人脐带华尔通胶来源的间充质干细胞(MSCs)移植于不育小鼠睾丸的克隆能力及对其生殖功能的影响。方法采用腹腔内单次注射白消安的方法构建不育小鼠模型;采用组织块贴壁法获得MSCs,分别用Brdu和Hoechst33258标记,显微注射法移植入不育小鼠睾丸的精曲小管内;采取免疫组织化学和快速冷冻切片荧光显微镜下观察的方法检测其移植细胞存活情况;采用HMIAS-2000高清晰度彩色医学图文分析系统测量小鼠睾丸精曲小管直径。应用SPSS13.0软件进行统计学分析。结果白消安单次注射可造成15%的小鼠死亡,用药后第4周,不育小鼠睾丸的精曲小管仅存基底膜,呈薄的空管状;传至3代即可得到数量较多的纯化MSCs,MSCs移植于异体小鼠睾丸获得成功,移植后的细胞能存活至少4个月,并且发生了从管腔到基底膜再到管腔的移行过程;移植后26d与120d,不育模型移植细胞组精曲小管直径均较未移植细胞组有所增加,且其差异有统计学意义(P<0.01)。结论采用精曲小管显微注射法将MSCs移植于不育小鼠睾丸获得成功,移植后的MSCs能长期存活并发生移行,且能促进不育小鼠生殖功能的恢复。
- 唐秋灵林广裕林丽敏黄天华谢庆东马廉
- 关键词:脐带间充质干细胞睾丸生殖功能