国家自然科学基金(30270587)
- 作品数：17 被引量：41H指数：4
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- RNA干扰与肿瘤基因治疗
- 2006年
- RNA干扰(RNAi)是指双链RNA在细胞内特异性诱导同源互补的mRNA降解,从而阻断相应基因表达的现象。随着研究不断取得进展,RNAi作为新型肿瘤基因治疗方法显示着巨大的潜力．
- 蒲丹李为民
- 关键词：RNA干扰肿瘤基因疗法
- HnPNPB1基因短发夹环RNA载体的构建与鉴定被引量：2
- 2006年
- 目的利用RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术,构建HnRNPB1表达载体,并进行鉴定。方法采用H1启动子,分别把被7bP序列间隔的21bp长短的HnRNPB1靶序列的反向重复序列,置于PsiRNA-hH1neoG2质粒中,分别构建HnRNPB1短发夹环RNA(ShRNA),产生重组质粒PSiRNA-hH1neoG2 HnRNPB1。结果将合成的DNA序列退火后克隆到载体上,并作测序分析,经测序鉴定确定为所需序列。结论针对HnRNPB1基因的特异性ShRNA真核表达载体PSiR-NA-hH1neoG2 HnRNPB1的成功构建,为进一步研究其基因功能打下基础。
- 蒲丹李为民陈敏陈文彬
- 关键词：RNA干扰短发夹状RNA
- 纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B_1染色诊断肺癌价值的研究被引量：15
- 2004年
- 目的 探讨纤维支气管镜刷检细胞核内不均一核糖核蛋白B1(HnRNPB1)染色在肺癌诊断中的价值。方法 对 381例病理检查证实的肺癌患者及 10 0例非肺癌患者 ,经纤维支气管镜刷检脱落细胞涂片 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞化学染色 ,研究HnRNPB1诊断肺癌的敏感性与特异性 ,并与传统的CT及痰脱落细胞学检查进行比较。结果 381例肺癌患者均经纤维支气管镜检查于病变所在叶支气管进行刷检涂片 ,HE染色脱落细胞学检查发现癌细胞 2 18例 ,采用抗HnRNPB1单克隆抗体免疫细胞学检查 ,2 0 8例样本可见HnRNPB1染色。在癌细胞阴性的 16 3例样本中HnRNPB1染色阳性 12 1例 ,癌细胞阳性与阴性组间HnRNPB1表达有明显差异 (P <0 .0 5 )。不同病理类型肺癌的HnRNPB1表达为 :鳞癌 2 19例 ,HnRNPB1染色阳性 197例 (90 .0 % ) ;腺癌 10 8例 ,HnRNPB1染色阳性 85例 (78.7% ) ;小细胞癌 5 4例 ,HnRNPB1染色阳性 4 7例 (87.0 % )。鳞癌及小细胞肺癌HnRNPB1表达阳性率高于腺癌 (P <0 .0 5 )。HnRNPB1免疫细胞化学染色诊断肺癌的敏感性为 86 .4 % ,特异性为 91% ,假阴性率为 13.6 % ,假阳性率为 9% ,阴性提示率为 6 3.6 % ,阳性提示率为 97.3%。结论 HnRNPB1免疫细胞学检查诊断肺癌的敏感性明显优于痰脱落细胞学检查 。
- 李为民陈文彬徐丹朱辉魏大鹏周清华
- 关键词：纤维支气管镜刷检肺癌细胞学检查
- 抗hnRNPB1单克隆抗体结合^(131)I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察131I-抗hnRNPB1单克隆抗体(131I-抗hnRNPB1 MAb)、抗hnRNPB1 MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法用常规氯胺-T法合成131I-抗hnRNPB1 MAb,30只C57BL/6小鼠皮下接种Lewis肺癌细胞7 d后,将荷瘤鼠随机分成5组,每组6只。分别经尾静脉注射,组:131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠单次治疗,组:131I-抗hnRNPB1 MAb 11.1 MBq/鼠强化治疗(给药2次,每次给药间隔3 d),组:Na131I 11.1MBq/鼠,组:抗hnRNPB1 MAb 50μg/鼠,组(对照组):生理盐水0.12 mL/鼠。治疗开始后每周测量1次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织作常规HE染色检查。结果治疗结束时,、、、、组小鼠的平均肿瘤体积分别为(3869±192)mm3、(1987±149)mm3、(6922±532)mm3、(6962±509)mm3、(6597±521)mm3,其中、组分别与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05),且组的平均肿瘤体积小于组(P<0.05),而、组治疗结束时平均肿瘤体积分别与对照组相比差异无统计学意义。、组的抑瘤率分别为67.17%和39.03%,高于(1.36%)、(0.9%)组的抑瘤率(P<0.05),且、组间抑瘤率的差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论抗hnRNPB1 MAb结合131I对肺癌小鼠移植瘤的生长具有明显抑制作用,且抑制作用呈量效关系。
- 陈明勇李为民徐丹陈文彬
- 关键词：肺癌MAB^131I放射免疫治疗
- 肺腺癌细胞A549 hnRNP B1基因RNA干扰的体外研究被引量：2
- 2008年
- 目的体外研究特异的小干扰RNA(siRNA)对肺腺癌细胞A549 hnRNP B1基因表达及生长的抑制作用。方法设计和构建由H1启动子驱动产生的特异的hnRNP B1 siRNA表达质粒,转染至A549细胞,荧光定量PCR法及Western blot检测hnRNP B1基因的表达,MTT法检测该表达质粒转染后对A549细胞生长的影响。结果针对hnRNP B1基因构建的重组质粒具有明显的干扰效果,受特异hnRNP B1 siRNA干扰的A549细胞hnRNP B1 mRNA及蛋白表达下调,细胞生长受到抑制。结论应用RNA干扰技术可阻止hnRNP B1基因的表达,有望成为肿瘤基因治疗新的研究方向。
- 蒲丹周陶友李为民吴迪陈小兵陈敏唐凤鸣韩娟
- 关键词：SIRNA
- HnRNP A2/B1短发夹环RNA重组体的构建与序列分析被引量：1
- 2006年
- 目的:利用RNA干扰(RNAinterfering,RNAi)技术构建HnRNPA2/B1重组质粒,并行序列分析。方法:分别将21bP长短的HnRNPA2/B1靶序列,中间为7bP序列间隔的反向重复序列,置入PsiRNA-hH1neoG2质粒中,产生重组质粒PSiRNA-hH1neoG2HnRNPA2/B1。结果:将重组质粒作测序分析,经测序鉴定确定为所需序列。结论:特异性短发夹环RNA(ShRNA)真核表达载体PSiRNA-hH1neoG2HnRNPA2/B1的成功构建,为进一步研究其基因功能奠定基础。
- 蒲丹李为民陈敏陈文彬董恒磊（校对）
- 关键词：HNRNPA2/B1短发夹状RNA
- 抗hnRNPB1单克隆抗体结合^131I对肺癌小鼠靶向治疗的实验研究被引量：1
- 2007年
- 目的 观察^131I-抗hnRNP B1MAb、抗hnRNP B1MAb对肺癌小鼠移植瘤的靶向治疗作用。方法 用常规氯胺-T法合成^131I-抗hnRNP B1MAb,皮下接种肺癌细胞7d后,将肺癌小鼠随机分成5组,每组6只。分别经尾静脉注射,Ⅰ组：^131I-抗hnRNP B1MAb11.1MBq/只单次治疗,Ⅱ组：^131I-抗hnRNP B1MAb2×11.1MBq/只强化治疗,Ⅲ组：Na^131I11.1MBq/只,Ⅳ组：抗hnRNP B1MAb50μg/只,Ⅴ组：生理盐水0.12ml作为对照组。干预后每周测量一次小鼠肿瘤的长径及短径,4周后处死小鼠,分离肿瘤并称其质量,计算抑瘤率,肿瘤组织做苏木素伊红（HE）染色检查。结果 治疗结束时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组小鼠肿瘤的平均体积分别为（3869±192）mm^3、（1987±149）mm^3、（6922±532）mm^3、（6962±509）mm^3、（6957±521）mm^3,其中I组、Ⅱ组与Ⅴ组肿瘤平均体积相比差异具有统计学意义（P〈0.05）,而I组、Ⅲ组治疗结束时肿瘤平均体积与Ⅴ组相比较无统计学意义（P〉0.05）。治疗结束时各组小鼠平均体质量差异无统计学意义（P〉0.05）。Ⅰ组强化组及Ⅱ组的抑瘤率分别为69.88%和41.35%。各治疗组小鼠未发现明显的不良反应。结论 抗hnRNP B1MAb结合^131I对小鼠肺癌的生长具有显著抑制作用,抑制作用呈量效关系,未发现明显的毒副作用。单纯抗hnRNP B1MAb及Na^131I未出现明显抑制肿瘤生长的作用。
- 陈明勇李为民徐丹陈文彬
- 关键词：肺癌^131I放射免疫治疗
- 肺癌患者外周血中HnRNP B_1的临床研究
- 2006年
- 目的探讨外周血中HnRNP A2/B1表达及其在肺癌诊断中的价值。方法采用特异性HnRNP A2/B1检测60例肺癌患者外周血中HnRNP A2/B1的表达。结果RT-PCR结果显示,60例肺癌患者外周血中49例HnRNP A2/B1mRNA表达阳性,HnRNP A2/B1mRNA半定量值0.657±0.326;对照组30例中3例阳性,半定量值0.159±0.286,两组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。检测外周血HnRNP A2/B1mRNA诊断肺癌的敏感性81%,特异性90%。结论肺癌患者外周血中HnRNP A2/B1表达增高,外周血检测HnRNP A2/B1在诊断肺癌中具有较高的敏感性和特异性。
- 吴驰李为民徐丹陈文彬魏大鹏周清华
- 关键词：肺癌患者HNRNP
- 抗核内不均一核糖核蛋白B1单克隆抗体结合^(131)Ⅰ对肺癌小鼠靶向治疗结果被引量：3
- 2006年
- 核内不均一核糖核蛋白（hnRNP）B1是存在于细胞核的一种RNA结合蛋白，在肺癌细胞株和手术切除的肺癌组织中表达，在临近的正常组织、正常的支气管上皮和肺泡上皮细胞的细胞核未见表达。我们推测抗hnRNPB1单克隆抗体（MAb）能特异性与肺癌组织高表达的hnRNPB1蛋白结合，是潜在的肺癌治疗靶点。
- 陈明勇李为民徐丹陈文彬
- 关键词：^131IRNA结合蛋白靶向小鼠肺泡上皮细胞
- 抗hnRNP B1单克隆抗体-顺铂交联物对人肺腺癌细胞A549的体外靶向生长抑制作用被引量：3
- 2009年
- 目的证实hnRNP B1单克隆抗体与顺铂(DDP)的交联物可与肺癌细胞发生特异性结合,并研究该交联物在体外的靶向抗癌作用。方法采用人肺腺癌细胞株A549常规体外培养传代。细胞分为DDP组、hnRNP B1单抗组、hnRNP B1单抗-DDP交联物组,分别加入DDP 3、5及7μg/mL,hnRNP B1单抗2.5、5及10μg/mL,交联物1.5、3及6μg/mL,培养2 h后,用培养基洗涤(仅对单抗组和交联物组进行洗涤),再分别作用12、24及48 h。以DDP组为阳性对照,同时设空白对照。每组设3个复孔。应用3H胸腺嘧啶(3H-TdR)掺入法在液闪仪上测定每分钟细胞计数(CPM),了解不同干预以及不同剂量、作用时间交联物对细胞增殖的影响;采用TUNEL技术观察细胞凋亡情况;应用流式细胞计数测定交联物对细胞周期分布的影响。结果DDP(7μg/mL)、hnRNP B1单抗(5μg/mL)、交联物(3μg/mL)作用48 h对A549细胞均有生长抑制作用,生长抑制率分别为49.7%、53.3%、59.2%。3μg/mL交联物组(30.4%、46.2%及59.2%)和6μg/mL交联物组(41.3%、52.5%及66.8%)作用12、24及48 h后的生长抑制率均强于同时间点7μg/mL DDP组(25.0%、41.3%及49.7%)。DDP(7μg/mL)、hnRNP B1单抗(5μg/mL)、交联物(3μg/mL)作用48 h后均可诱导A549肺癌细胞凋亡。A549细胞经交联物作用后,G0/G1期细胞增多(占53.9%),S期细胞减少(占43.2%),与DDP组(46.8%和47.1%)和单抗组(46.4%和46.3%)比较均有显著差异(P均<0.01)。结论hnRNP B1单克隆抗体与DDP的交联物可与肺癌细胞发生特异性结合,具有靶向抗癌作用。
- 高阳李为民陈文彬
- 关键词：单克隆抗体HNRNPB1顺铂
