国家自然科学基金(30270590)
- 作品数：7 被引量：37H指数：4
- 相关作者：徐勤枝丁新民周平坤梁璇白贝更多>>
- 相关机构：军事医学科学院第二军医大学西安交通大学医学院第一附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞VEGF的调控作用被引量：8
- 2007年
- 背景与目的:了解ERK1/2-Sp1信号通路对肺癌细胞血管内皮生长因子(VEGF)基因的调控作用。材料与方法:采用激酶特异抑制剂PD98059抑制ERK1/2的活性,Western blot检测ERK1/2的表达。RNA干扰技术沉默Sp1基因,Mercury信号通路系统检测Sp1的转录活性。RT-PCR检测VEGF和Sp1基因的变化。结果:ERK1/2激酶的活性几乎可被150μmol/L PD98059完全抑制,ERK1/2激酶活性下调伴随VEGF的表达下降。PD98059下调Sp1转录因子的活性。Sp1基因沉默后VEGF的表达量下调。结论:在肺癌细胞中存在ERK1/2-Sp1-VEGF信号通路,ERK1/2激酶调控VEGF的表达可能部分依赖于转录因子Sp1的活性。
- 梁璇丁新民霍艳英潘兴斌隋建丽白贝徐勤枝周平坤
- 关键词：肺癌VEGFSP1
- 抑癌基因LKB1对肺癌细胞血管内皮生长因子的表达调控被引量：4
- 2007年
- 目的:了解抑癌基因LKB1对肺癌细胞A549血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor.VEGF)的调控作用。方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1的真核表达载体并以脂质体法转染A549细胞,G418筛选稳定表达细胞株;RT-PCR及Western印迹法检测LKB1、SP1和VEGF在A549细胞中的表达变化;siRNA技术干扰转录因子SP1的表达,RT-PCR及Western印迹法检测SP1和VEGF的表达变化。结果:外源性LKB1在A549细胞中稳定表达;LKB1蛋白下调SP1和VEGF的表达;SP1可被特异性siRNA分子有效抑制.siRNA介导的SP1沉默伴随VEGF表达下调。结论:LKB1可能通过负调控转录因子SP1的表达从而调控VEGF的表达。
- 臧远胜夏天保李强
- 关键词：LKB1A549细胞血管内皮生长因子类SP1小分子干扰
- LKB1基因功能及与肿瘤关系研究进展被引量：10
- 2004年
- LKB1基因是一抑癌基因,其编码产物为一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。LKB1的功能主要是使细胞周期阻滞在G_1期、促进细胞凋亡和调节胚胎血管形成等。LKB1基因的胚系突变是Peutz-Jeghers综合征的主要致病因素。在散发肿瘤中也发现有LKB1基因突变,其中以肺腺癌和子宫颈粘液微偏癌突变率较高,分别达30％和55％左右。
- 丁新民徐勤枝周平坤
- 关键词：基因肿瘤突变
- LKB1蛋白在肺腺癌组织中的表达及临床意义被引量：8
- 2005年
- 目的:了解LKB1蛋白在肺腺癌组织中表达的临床意义。方法:应用免疫组化法检测62例肺腺癌组织中LKB1蛋白表达情况。结果:LKB1蛋白在肺腺癌细胞及正常肺支气管上皮均有表达,弥漫性分布于细胞质,细胞核亦有表达。肺腺癌组织中LKB1蛋白表达的阴性率为38.7%(24/62)。LKB1的表达与肺腺癌TNM分期中的淋巴结转移(N)及临床分期有显著的相关性,χ2=10.620,P=0.014;χ2=18.635,P=0.000。LKB1蛋白阴性组预后较差,中位生存期为15个月,而LKB1阳性组的中位生存时间为29个月,两者比较差异有统计学意义,χ2=15.350,P=0.000。结论:LKB1蛋白表达下降与肺腺癌发生淋巴结转移相关,是肺腺癌预后不良的风险因素之一。
- 丁新民李增鹏周平坤段蕴铀冯华松徐勤枝
- 关键词：肺肿瘤腺癌预后免疫组织化学
- 丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1基因沉默对肺癌细胞生物学行为的影响被引量：3
- 2007年
- 目的研究丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(LKB1)基因表达沉默对肺癌细胞生物学行为的影响。方法以RNA干扰技术建立LKB1表达抑制的细胞模型,Western blotting方法检测干扰LKB1蛋白表达的效果;通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测LKB1基因沉默肺癌细胞的增殖变化;应用Annexin V/PI双染法和流式细胞技术分析LKB1基因沉默后肺癌细胞周期的变化及其凋亡和坏死情况。结果成功建立了LKB1基因沉默肺癌细胞模型,稳定表达LKB1-siRNA细胞的LKB1蛋白表达被明显抑制,LKB1基因沉默后肺癌细胞增殖速度明显加快,但其早期与晚期凋亡率较对照组相比并无显著变化。结论LKB1基因的下调表达对95D细胞部分恶性生物学行为的发生具有一定的促进作用。
- 梁璇南克俊徐勤枝
- 关键词：RNA干扰凋亡肺癌
- 转录因子Sp1对肺癌细胞LKB1-VEGF通路调控作用研究被引量：8
- 2007年
- 目的:通过构建LKB1基因获得性肺癌细胞模型,了解转录因子Sp1对LKB1-血管内皮生长因子(VEGF)通路的调控作用。方法:应用巢式PCR(nPCR)方法扩增LKB1基因编码区,构建LKB1真核表达载体;W estern印迹检测LKB1在A549细胞中的表达;siRNA技术干扰Sp1的表达;RT-PCR联合ELISA方法检测VEGF的变化;SEAP检测系统检测Sp1的转录活性。结果:成功构建LKB1基因稳定表达细胞模型;LKB1蛋白下调VEGF表达和Sp1转录活性;siRNA介导的Sp1沉默伴随VEGF表达下调。结论:转录因子Sp1参与LKB1基因对VEGF的表达调控。
- 臧远胜周平坤丁新民梁璇隋建丽白贝李强徐勤枝
- 关键词：LKB1肺癌血管内皮生长因子转录因子SP1RNA干扰基因表达调控
- LKB1基因转染对人肺腺癌细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:探讨外源性LKB1基因表达对人肺腺癌细胞生物学行为的影响。方法:应用巢式PCR方法扩增LKB1基因编码区,利用脂质体转染技术将真核表达重组体pcDNA-LKB1质粒和空载体pcDNA3.1质粒分别导入A549细胞,经G418筛选后获得稳定转染细胞克隆,Western blot检测LKB1和STAT3在A549细胞中的表达变化。通过绘制生长曲线和克隆形成试验检测获得性表达LKB1基因后肺癌细胞的增殖变化,流式细胞术(FCM)分析其细胞周期及其凋亡的变化。结果:成功获得了稳定表达外源性LKB1基因的A549细胞系,与转染空白载体组比较,转染LKB1基因的细胞生长速度明显减慢,细胞周期中G1/G0期比例明显增加,S期比例减少,细胞凋亡率升高;同时STAT3蛋白的磷酸化水平明显降低。结论:LKB1可能通过下调STAT3蛋白磷酸化水平的表达从而抑制A549细胞的恶性生物学行为。
- 梁璇南克俊李春丽姚煜田涛王淑红
- 关键词：LKB1转染STAT3
