四川省科技支撑计划(2010NZ0112)
- 作品数：2 被引量：8H指数：2
- 相关作者：徐志文朱玲廖珊郭万柱刘骁更多>>
- 相关机构：四川农业大学中江县畜牧局更多>>
- 发文基金：四川省科技支撑计划教育部“新世纪优秀人才支持计划”四川省青年科技基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 乙型脑炎病毒NS3蛋白对其体外复制能力的影响被引量：5
- 2013年
- 为研究乙型脑炎病毒(JEV)NS3蛋白对其体外增殖能力的影响,为JEV疫苗的大量生产提供一定的理论基础,构建真核重组质粒pCI-neo-NS3并转染至BHK-21细胞内,接种JEV后于不同时间点采集细胞内以及细胞外病毒,采用荧光定量RT-PCR法检测各时间点细胞内和细胞外病毒含量,同时设立不同质量浓度NS3原核表达蛋白对JEV复制影响对照组。用SPSS 21.0统计分析软件分析,比较病毒增殖情况。分析结果显示转染含NS3基因的真核载体组细胞内和上清中病毒含量都极显著高于对照组(P<0.01),加入NS3原核表达蛋白组上清中病毒含量极显著低于对照组(P<0.01)。
- 廖珊刘骁朱玲徐志文郭万柱
- 关键词：乙型脑炎病毒NS3蛋白荧光定量
- 猪核转录因子C-Rel亚基的克隆及PRV体外感染PK-15细胞对C-Rel转录时相的影响被引量：3
- 2014年
- 核转录因子κB是普遍存在于真核细胞中的转录调节因子,其信号通路在细菌、病毒感染宿主致病过程中起关键作用,直接调控宿主先天性免疫反应及细胞增殖、分化和凋亡,它的异常活化可能是PRV感染导致免疫抑制的重要原因。为进一步了解NF-κB C-Rel亚基序列特征及PRV对C-Rel mRNA转录时相的影响,本试验采用RT-PCR从猪外周血淋巴细胞中扩增NF-κB C-Rel ORF,获得阳性质粒后测序,进行相关生物信息学分析;运用实时荧光定量PCR技术对PRV感染PK-15细胞后不同时期C-Rel mRNA的转录水平进行定量分析。序列分析结果表明:所扩增猪C-Rel亚基ORF长1 773bp,编码590aa;猪C-Rel核苷酸序列与不同动物的C-Rel核苷酸序列相似性较高;大部分位于细胞核内(76.0%),无信号肽及跨膜区。荧光定量结果表明:与对照组相比,感染后0~4h,C-Rel转录水平下调,2和4h差异显著(P<0.05);4~12h,快速上调,12h达到转录高峰(P<0.01);12h后逐渐下降,24~120h,维持在较低水平,其中36h差异极显著(P<0.01),48、72和120h差异显著(P<0.05)。本研究推断PRV感染早期较弱的先天性免疫应答可能与C-Rel活化水平低下有关。
- 付梦瑾朱玲周远成杨文宇李新琼徐志文
- 关键词：C-REL转录时相
