山东省高等学校科技计划项目(J12LD02)
- 作品数：10 被引量：61H指数：4
- 相关作者：程仕伟杨立红崔海洋冯志彬黄田红更多>>
- 相关机构：鲁东大学烟台恒源生物股份有限公司更多>>
- 发文基金：山东省高等学校科技计划项目更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- 碱性蛋白酶产生菌的筛选鉴定及培养优化被引量：4
- 2012年
- 通过对筛选的产碱性蛋白酶菌株进行形态观察、生理生化试验和16S rDNA序列分析鉴定,确定高活力菌株为解淀粉芽孢杆菌。发酵碳源、氮源和金属盐的优化,确定优化培养组分。对接种体积分数、培养温度和培养pH进行研究,确定最佳培养条件。在最优条件下培养18 h后获得最大酶活力为395.18 U/mL,产酶能力比优化前提高了2.55倍。该研究为深入研究工业发酵生产碱性蛋白酶提供了参考。
- 程仕伟王梦龙冯志彬程显好
- 关键词：碱性蛋白酶RDNA发酵优化
- 响应面分析法优化肠杆菌的发酵条件生产壳聚糖酶被引量：1
- 2014年
- 利用筛选的肠杆菌发酵生产壳聚糖酶,对培养温度、pH和接种量进行优化,确立中心位点后进行响应面设计分析,确定最优发酵培养条件。结果表明:最佳培养工艺条件为培养温度31.74℃、pH 6.5和接种量为7.26%(V/V),培养36 h时壳聚糖酶活性达到13.59 U/mL,实际值与预测值之间的误差约为0.43%。壳聚糖酶的生产方式为延续合成型,具有深入优化并规模生产的潜力。
- 程仕伟孙少华张盈陶春彦朱琳姜国正
- 关键词：肠杆菌壳聚糖酶发酵条件
- 产纤维素酶枯草芽孢杆菌B29的鉴定与培养条件研究被引量：6
- 2013年
- 从近海土壤中分离1株产纤维素酶的菌株,经形态和生理生化指标鉴定为枯草芽孢杆菌。对产酶菌株经碳源、氮源、金属元素、培养温度、pH和接种量进行优化,确定最佳培养组分和条件为:20 g/L葡萄糖,10 g/L胰蛋白胨,3 g/L K2HPO4,3 g/L NaH2PO4,2 g/L氯化铁,pH 6.5,培养温度32℃,接种量为2%(v/v)。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活性为最高,为72.37 U/mL,其次是β-糖苷酶和微晶纤维素酶。
- 程仕伟崔海洋黄田红马玉岳刘进杰
- 关键词：枯草芽孢杆菌纤维素酶
- 产壳聚糖酶的肠杆菌分离鉴定及其培养特性研究被引量：1
- 2014年
- 针对筛选的一株产壳聚糖酶菌株进行了鉴定和培养特性研究.首先对产酶菌株进行鉴别培养基培养、显微镜检并结合生理生化与16S rDNA分子鉴定以确定菌属来源,后对菌株产壳聚糖酶的碳源、氮源、金属盐和诱导物进行筛选优化.结果表明:产酶菌株为产气肠杆菌,最佳培养碳源为葡萄糖,最佳氮源为氯化铵和酵母粉,MnSO4,MgSO4,KCl和NaCl对产酶有积极作用.该菌来源的壳聚糖酶为诱导酶,最佳诱导物为粉末壳聚糖,壳聚糖酶活性为1.58 U/mL.
- 程仕伟张盈倪培拙崔海洋杨立红马玉岳
- 关键词：肠杆菌壳聚糖酶
- 响应面优化金橙黄微杆菌YT9的发酵条件生产纤维素酶被引量：10
- 2013年
- 利用筛选的金橙黄微杆菌发酵生产纤维素酶,对产酶影响较大的因素(培养温度、pH值和CMC添加量)进行响应面设计分析,确定最优发酵培养条件。结果表明最佳培养工艺条件为培养温度27.8℃、pH值为7.0和0.25g/L CMC添加量,纤维素酶活性达到811.75U/mL,实际值与预测值之间的误差约为0.55%,具有工业化规模生产潜力。
- 程仕伟李坦坦梁会会杨立红姜国正
- 关键词：纤维素酶发酵条件
- 分光光度法测定酶转化液中L-丝氨酸含量被引量：1
- 2014年
- 利用分光光度法测定酶转化液中L-丝氨酸含量。研究表明L-丝氨酸茚三酮缩合产物的最大吸收波长为510 nm,正丁醇、丙酮、水、氨水展开体系有利于分离前体物甘氨酸和产物L-丝氨酸,在此条件下得到吸光度与L-丝氨酸含量的线性关系,线性相关系数为0.9991,方法检出限为0.0612g/L,平均回收率为100.9%,平均相对标准偏差为3.341%。与氨基酸分析仪相比,该法具有良好的相关性和准确的精密度,是一种简单、有效、快速的测定方法。
- 冯志彬陈国忠张娟察亚平曹薇
- 关键词：L-丝氨酸甘氨酸分光光度法
- 壳聚糖酶产生菌筛选及产酶培养优化被引量：2
- 2013年
- 以胶体壳聚糖为唯一碳源和DNS酶活鉴定法从烟台近海土壤中分离得到一株高产壳聚糖酶菌株,初步鉴定为白色链霉菌.经发酵培养组分与条件优化,获得最佳培养组分(g.L-1):葡萄糖55,壳聚糖0.5,胰蛋白胨1,尿素8,(NH4)2SO42,NH4Cl 1,KH2PO43,FeSO4·7H2O 1,ZnSO4·7H2O 2,CaCl2·6H2O2,MnSO4·H2O2,NaCl2.最适产酶pH 7.0,温度28℃,装液量50 mL,接种量2%.优化后菌株培养48 h时产酶量为51.65 U.mL-1.
- 程仕伟杨立红洪波缪静
- 关键词：壳聚糖酶菌株筛选白色链霉菌发酵优化
- 产纤维素酶的金橙黄微杆菌YT9分离鉴定及其培养条件优化被引量：4
- 2013年
- 从渤海近海土壤中分离1株产纤维素酶菌株,经形态、生理生化指标和16S rDNA分析鉴定为金橙黄微杆菌。对该产酶菌株进行碳源、氮源、金属盐、培养温度、pH值和诱导物质量浓度的优化,确定最佳培养基组分和条件为:果糖20g/L、羧甲基纤维素钠(CMC)0.5g/L、蛋白胨8g/L、硫酸亚铁铵2g/L、K2HPO42g/L、NaH2PO42g/L、MnSO41g/L、pH6.5、培养温度30℃、接种量4%。优化后纤维素酶系中以羧甲基纤维素酶活力为最高,为226.27U/mL,其次是β-葡萄糖苷酶和微晶纤维素酶。
- 缪静李坦坦程仕伟梁会会崔海洋
- 关键词：纤维素酶培养条件优化
- 产纤维素酶的解淀粉芽孢杆菌分离鉴定及酶学性质研究被引量：34
- 2014年
- 对一株产纤维素酶菌株进行分离鉴定，并对其酶学特性进行了初步研究．刚果红染色法筛选产纤维素酶菌株B16，采用形态观察、生理生化指标和16SrDNA确定其菌属来源，分析纤维素酶的最适反应pH值和温度、酸碱和热稳定性、金属离子对酶活性的影响，最后考察纤维素酶系的分布．结果表明：筛选菌株为解淀粉芽孢杆菌，其较适反应温度为30℃，较适pH8．0，在10～60℃呈高稳定性，在pH5～8时稳定性较强，Mn2＋和Ba2＋是该酶的激活因子．除微晶纤维素酶活力（16．39U／mL）稍弱外，滤纸酶（70．37U／mL）、届．葡萄糖苷酶（131．55U／mL）、羧甲基纤维素酶（307．23U／mL）活力均相对较高．结果表明，该酶在饲料添加剂方面具有应用潜力．
- 崔海洋程仕伟黄田红李秀娟杨立红陈国忠
- 关键词：纤维素酶解淀粉芽孢杆菌酶学性质
- 链霉菌壳聚糖酶的纯化及其酶学性质被引量：4
- 2013年
- 分离纯化从烟台近海土壤筛选的链霉菌来源壳聚糖酶,并对其酶学性质进行研究。通过(NH4)2SO4分级沉淀分离得粗酶,透析后经Sephadex G-100柱纯化,得到2种壳聚糖酶(ChA和ChB)。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳及Sephadex G-75凝胶过滤确定ChA的相对分子质量,研究ChA的最适底物水解条件、热稳定性、水解动力学及金属离子对酶活性影响。结果表明:ChA为单亚基蛋白,相对分子质量为4.16×104,在220和280 nm处呈现两个紫外吸收峰,催化水解壳聚糖的最适pH为5.0～5.5,最适温度为55℃。热稳定性实验表明:30℃温育1 h后酶活为初始酶活的33.3%,40℃温育1 h后酶活为初始酶活的22.2%。ChA的酶促反应初速率为6.2×10-3μmol/(mL.min),Vmax为0.318μmol/(mL.min),Km为1×10-2mg/mL,且对底物表现相对专一性。K+、Na+、Li+、Mg2+、Ca2+、Ba2+Zn2+、Cu2+和Co2+对ChA活力均表现为抑制作用,过渡金属离子Mn2+对酶有激活作用,重金属离子Hg2+、Ag+、Cd2+和Pb2+对酶均有较强的抑制作用。Mn2+和Zn2+的动力学研究表明,Mn2+对酶为混合型激活作用,Zn2+对酶为竞争性抑制作用。
- 杨立红程仕伟冯志彬周楠楠孔云红明永飞
- 关键词：酶学性质壳聚糖酶分离纯化链霉菌
