福建省科技计划项目(2006H0085)
- 作品数：3 被引量：19H指数：2
- 相关作者：林琳胡长浩沈麟施文芳邹有土更多>>
- 相关机构：福建师范大学更多>>
- 发文基金：福建省科技计划项目国家自然科学基金福建省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 低温耐热脂肪酶的筛选、纯化及特性研究被引量：2
- 2009年
- 目的:对一株低温耐热脂肪酶产生菌Pseudomonas RT-7进行产酶、纯化和特性研究。方法和结果:该菌的发酵液经50%硫铵沉淀、DEAE-Sepharose及SephacrylS-100分离获得了纯化的脂肪酶(PL-7)。SDS-PAGE电泳估算其表观分子量为44kDa,对底物特异性、作用温度、作用pH和耐热性的研究表明该酶为碱性脂肪酶,最适温度在15～20℃。该酶对C≤12链长的甘油三酯有较好的水解能力。该酶具有在低温和高温下稳定而在中温下不稳定的特点:表现为该酶经60℃30min处理后残余酶活高达93.33%,90℃处理30min后残余酶活仍有35.19%,而在40℃处理30min酶活仅残余28.23%。结论:该酶为低温碱性脂肪酶并在高温条件下具有很好的耐热性。
- 施文芳胡长浩沈麟林琳
- 关键词：假单胞菌低温脂肪酶耐高温
- 扩展青霉脂肪酶K56R叠加突变对热稳定性的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:扩展青霉脂肪酶随机突变体ep8是一株热稳定性比野生型有所提高的突变体。获得热稳定性提高的优良菌株。方法:在ep8的基础上利用重叠延伸PCR构建叠加突变重组质粒pPIC3.5K-ep8-K56R,将该质粒电转毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115进行异源表达。结果:该叠加突变脂肪酶在毕赤酵母中获得了活性表达。15%SDS-PAGE结果分析表明突变脂肪酶PEL-ep8-K56R-GS分子量与野生型PEL-GS一致,约为28kDa。叠加突变脂肪酶在37℃时酶活为852U/mL、野生型为760u/mL、随机突变体为824u/mL,叠加突变体酶活相比野生型提高了21.1%,相比随机突变体提高了3.4%。热稳定性分析数据表明叠加突变脂肪酶Tm值为40.1℃、野生型为38.7℃、随机突变体为39.9℃,Tm值相比野生型提高了1.4℃,相比随机突变体提高了0.2℃。
- 沈麟施文芳胡长浩林琳
- 关键词：扩展青霉脂肪酶叠加突变热稳定性
- 脂肪酶催化合成生物柴油的瓶颈问题及其对策被引量：13
- 2008年
- 生物柴油,一种新型的清洁能源燃料,具有可再生、可生物降解、环境友好等优良的品性,可部分或全部替代石化柴油。碱催化法、脂肪酶催化法及超临界法是合成生物柴油的主要工艺,其中脂肪酶催化法是一种节能型、环保型工艺,在节能和环保方面,有着碱催化法无可比拟的优越性,具有良好的工业应用前景。但目前在实现产业化的进程中仍存在如酶成本高、稳定性较差、甲醇对酶的失活效应及反应时间长等瓶颈问题。通过固定化技术和全细胞催化剂的采用、甲醇流加方式的改进、溶剂工程的改善及酰基受体和耐醇酶的开发等技术手段,结合固定床生物反应器,较好地解决了这些瓶颈问题,从而推进了酶催化法合成生物柴油的工业化进程。主要对酶法合成生物柴油工艺存在的主要问题及相应对策研究进展进行概括介绍,并对其工业化发展前景进行讨论。
- 吴义真邹有土林琳
- 关键词：生物柴油脂肪酶酶催化法
