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pGL3-Claudin-1 promoter荧光素酶报告基因质粒的构建及其功能鉴定被引量：2: 2012年; 背景:Claudin-1是一种多功能蛋白,除了组成紧密连接封闭细胞间隙,它在转录水平的表达失调可能作为一种分子标志反映到恶性肿瘤的侵袭转移和预后中。目的:构建重组大鼠重组Claudin-1萤光素酶报告基因质粒。方法:设计和合成包含5’非转录区的约2000bp的脱氧核糖核酸链,经过限制性内切酶KpnⅠ和MluⅠ酶切后插入到pGL3-Basic载体中,并用感受态E.coliDH5α和Pmd18-T-simple载体筛选阳性样品。阳性克隆通过测序和PCR证实。实验分为4组:对照组,阳性对照组(pGL3-promoter质粒转染),阴性对照组(转染pGL3-Basic质粒),实验组(转染pGL3-Claudin-1promoter质粒)。将质粒转染293T细胞检测Claudin-1启动子活性。结果与结论:重组质粒DNA测序结果采用NCBIblast比对与GenBank(gi|62750811)中大鼠Claudin-1基因启动子序列完全匹配。重组萤光素酶报告基因转录活性检测与pGL3-Basic质粒相比,重组pGL3质粒转录活性明显增强(P<0.001)。经过测序和转染结果证实有效的pGL3-Claudin-1启动子质粒构建成功。; 王洪波王鹏远刘玉村万远廉; 关键词：转录因子 CLAUDIN-1 重组质粒基因

丁酸钠对腹膜炎小鼠肠道屏障功能的保护作用被引量：8: 2012年; 目的探讨丁酸钠保护腹膜炎小鼠肠屏障的机制。方法将B57小鼠随机分为丁酸钠组及对照组。丁酸钠组胃灌丁酸钠（0．2g／kg，2次／d）。24h后检测胃肠道内丁酸浓度（n=4）。行盲肠结扎穿孔手术，观察术后死亡率。术后24h胃灌示踪剂FD40，测血浆中浓度以衡量胃肠通透性。取回肠组织石蜡切片，比较丽组小鼠腹膜炎后组织学变化。结果（1）丁酸钠组和对照组鼠胃（2．08±0．39比〈0．01mmol／kg，P〈0．01）、空肠（1．23±0．48比〈0．01mmol／kg，P〈0．05）、回肠（1．64±0．22比〈0．01mmol/kg，P〈0．01）内丁酸浓度差异有统计学意义；（2）丁酸钠组小鼠腹膜炎死亡率（23．1％，n=19）低于对照组（53．8％，n=19）（P〈0．05）；（3）术后小鼠肠道通透性明显上升[血浆FD40：假手术组（0．050±0．005）mg／L，腹膜炎组（0．230±0．020）mg／L），丁酸钠降低了腹膜炎鼠胃肠道通透性[血浆FD40：（0．120±0．020）mg／L，P〈0．01）。（4）腹膜炎小鼠的同肠黏膜明显破坏，丁酸钠减轻损伤，加快修复。结论在小鼠腹膜炎模型中，丁酸钠具有保护肠道屏障功能的作用。; 韩晓风王鹏远马元元朱静孙烈刘玉村; 关键词：丁酸钠肠道屏障腹膜炎

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国家自然科学基金(31040041)