浙江省自然科学基金(Y5053340)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 响应面法优化白腐菌Pleurotus eryngii_(-Co007)产木质素降解酶条件被引量：7
- 2011年
- 为提高Pleurotus eryngii-Co007产木质素降解酶能力,考察了初始pH、秸秆浓度、Cu2+浓度、吐温-80含量对其产木质素降解酶的影响。采用单因素试验和响应面分析法的Central Composite进行试验设计,得到Pleurotus eryngii-Co007产木质素降解酶的最佳条件:培养基初始pH 5.63、秸杆加量1.12%、Cu2+浓度4.00mmol/L、吐温-80含量0.83g/L。在此条件下,第8天摇瓶发酵液中木质素降解酶活性达到241.40U/ml,与回归模型的预测值相对误差仅2.18%。
- 陈敏郭倩姚善泾
- 关键词：刺芹侧耳木质素降解酶产酶条件响应面
- 固定化载体对白腐菌Pleurotus eryngii_(-Co007)产木质素降解酶的影响
- 2013年
- 以筛选得到的高产菌株Pleurotus eryngii-Co007为研究对象,考察4种不同吸附型固定化载体对其生长和产酶的影响。采用摇瓶发酵,以未添加载体接种发酵作对照,研究Pleurotus eryngii-Co007的生长代谢情况,测定发酵液中木质素降解酶的含量,并测定了固定化载体培养得到的Pleurotus eryngii-Co007菌丝体再利用产木质素降解酶的含量。结果表明,在发酵培养基中,添加固定化载体体系中的菌丝体生物量较对照组高,其中尼龙布效果最好,是对照组生物量的1.2倍。载体的添加能促进木质素降解酶的合成,在发酵培养基中,以尼龙布为载体所产生的木质素降解酶活性最高,达到190.67 U/mL,是对照组的1.9倍。在缓冲液体系中考察不同载体对菌丝体再利用产木质素降解酶的影响,结果表明,在缓冲液体系中Pleurotus eryngii-Co007产木质素降解酶要优于发酵培养基;除厨用无锈钢丝海绵外,其他吸附型载体的添加均较对照组提高了再利用菌丝体的产酶量并提前了产酶时间;菌丝体二次利用产生的木质素降解酶量远高于三次利用。在添加多孔陶粒载体的固定化体系中,菌丝体二次利用时产生的木质素降解酶活性达到最高,在第7天活性为306.41 U/mL,较对照组提高25%,且高峰期提前2 d。表明,吸附型固定化培养利于Pleurotuseryngii-Co007的生长和木质素降解酶的合成。
- 吴琼陈敏
- 关键词：刺芹侧耳固定化木质素降解酶
- 刺芹侧耳木质素降解酶纯化及对染料脱色作用被引量：2
- 2010年
- 对Pleurotus eryngii Co60-7菌株发酵液中木质素降解酶的分离纯化过程进行了研究,设计了一条主要由加盐沉淀和离子交换组成的分离纯化路线。通过35%硫酸铵饱和度的初沉和75%硫酸铵饱和度二沉可最大程度去除发酵液中的杂蛋白并获得目标蛋白,蛋白回收率为90.8%,纯化因子为3.81。用DEAE-SepharoseTMFast Flow进行三步洗脱层析,可较好地实现发酵液中目标蛋白的捕获。经过该纯化路线,木质素降解酶蛋白回收率达75.42%,纯化因子为10.55。经SDS-PAGE和Native-PAGE电泳分析,洗脱液DEⅡ中含有3种木质素降解酶组分。用该酶液进行溴酚蓝、亚甲基蓝和刚果红降解实验,结果表明该木质素降解酶液对3种染料都有不同程度的降解,染料间结构的差异会影响其降解效率。
- 陈敏姚善泾梁新乐
- 关键词：刺芹侧耳木质素降解酶离子交换层析染料脱色
- 白腐菌Pleurotus eryngii-Co007产木质素降解酶条件的优化被引量：6
- 2011年
- 木质素降解酶是参与降解木质素的酶类，广泛存在于白腐真菌中。为提高白腐菌Pleurotus eryngii—Co007的产木质素降解酶的活力，研究了该菌株的产酶曲线、发酵参数及培养基组分对其产木质素降解酶的影响。单因素试验结果表明该菌株发酵第8天时发酵液中木质素降解酶酶活最高；较优的发酵参数是pH5．0—6．0、发酵温度25—27℃，接种量10％～15％，其中pH影响最显著；麦芽糖和有机氮源有利于木质素降解酶的表达。但考虑到酶表达的增加量和生产成本的经济性选择3％的葡萄糖、0．2％酵母粉和0．2％牛肉膏组合氮源；诱导剂中秸杆、Cu^2＋和吐温80诱导产酶效果明显。
- 陈敏郭倩姚善泾
- 关键词：PLEUROTUS木质素降解酶产酶条件
- 1种提高Native-PAGE中活性目标蛋白回收率的方法
- 2012年
- 为了提高Native-PAGE电泳条带中活性目标蛋白的回收率,以木质素降解酶粗酶为材料,分析了超声处理对Native-PAGE中活性目标蛋白回收的影响。通过比较超声组与对照组的活性目标蛋白回收率,结果表明超声处理能促进Native-PAGE电泳胶中活性目标蛋白的溶出,提高活性目标蛋白回收率。根据单因素试验结果,采用响应面分析法的中心组合试验设计,得到的最佳超声条件是:超声时间188.40min、超声功率76.31W。在此条件下,Native-PAGE中活性目标蛋白回收率达40.03%,与回归模型的预测值相对误差仅1.11%,回归方程与实际情况拟合较好。
- 陈敏郭倩蒋予箭
- 关键词：超声处理响应面
