国家自然科学基金(30270488)
- 作品数：4 被引量：15H指数：3
- 相关作者：王华杨华吴保敏吴明哲于慕刚更多>>
- 相关机构：中国医科大学沈阳市儿童医院辽宁师范大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金辽宁省博士科研启动基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 毒性小分子蜂毒肽基因的克隆修饰、融合载体构建及表达研究被引量：2
- 2006年
- 通过定点诱变的方法,对小分子蜂毒肽(melittin)基因进行修饰,引入了羟胺裂解位点,使蜂毒肽与其前体蛋白得以在体外融合表达.将融合的蜂毒肽前体蛋白(premelittin)经双酶切后克隆到原核表达载体PET-42a(+)中,PCR鉴定后转化至宿主菌BL21(DE3)中,在异丙基硫代--βD-半乳糖苷(IPTG)诱导下,在大肠杆菌中实现融合表达.为利用基因工程的方法表达毒性小分子多肽、实现该类药物的产业化打下基础.
- 潘凌子方宏筠李大力王关林
- 关键词：蜂毒肽修饰
- 新生大鼠缺氧缺血性脑损伤血管内皮生长因子表达与新生血管形成关系的研究被引量：4
- 2007年
- 目的观察新生大鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后不同时间脑组织中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的表达以及血管新生情况，探讨HIBD时脑组织VEGF蛋白表达与血管新生之间的相互关系。方法7日龄Wistar大鼠176只随机分成实验组（n=88）和对照组（n=88），两组分别在缺氧缺血（HI）后0、4、8、12、24、48、72h及7、14、21、28d（每个时间点8只）应用免疫组织化学染色方法检测VEGF蛋白的表达及血管新生情况。结果正常7日龄Wistar大鼠于脑组织多种细胞的胞浆中可见VEGF表达，9日龄时达高峰；HIBD后VEGF蛋白于HI后4h表达逐渐增加，于48h达高峰后逐渐下降，并且于HI后4h～14dVEGF表达明显高于对照组（P〈0．05，P〈0．01）。正常新生大鼠脑皮质中新生毛细血管数各时间点平均为3～8条／HP；而实验组于HI后3～28d的新生血管数为10～12条／HP，显著多于对照组（P〈0．01），并于HI后4～72hVEGF表达程度与新血管形成之间呈显著正相关（r=0．928，P〈0．05）。结论正常7～35日龄新生大鼠脑组织内有不同程度的VEGF蛋白表达。HI可诱导VEGF表达增加：VEGF参与了HIRD后腩组织新生血管的形成。
- 于慕刚吴明哲王华
- 关键词：血管内皮生长因子新生大鼠血管新生
- 外源性bFGF对新生大鼠脑GFAP蛋白表达影响的动态研究被引量：6
- 2004年
- 目的 :探讨缺氧缺血对新生大鼠脑星形胶质细胞酸性蛋白 (GFAP)和内源性碱性成纤维细胞生长因子 (bFGF)的作用以及外源性bFGF对缺氧缺血后GFAP表达的影响。方法 :采用免疫组化染色方法观察GFAP表达强度的变化。结果 :生后 7d时正常新生鼠脑内有微弱GFAP表达。生后 14d ,GFAP阳性细胞数量及染色强度呈高峰状态 ,主要见于脑白质区。生后 2 8d海马、脑白质内有少量GFAP阳性细胞。缺氧缺血后GFAP表达增加 ,以缺氧缺血后 48h明显。外源性bFGF增加GFAP的表达 ,以用药后 2 4h作用明显 ,并持续至用药后 5d。正常新生鼠脑有一定程度的内源性bFGF表达 ,生后 10d表达呈高峰状态。以后一直有少量bFGF表达 ,其组织学分布与GFAP大致相似。结论 :缺氧缺血可诱导内源性bFGF及GFAP的表达。外源性bFGF可增强缺氧缺血时新生鼠脑GFAP的表达 ,补充内源性bFGF的不足 。
- 王华杨华吴保敏
- 关键词：脑缺血脑缺氧碱性成纤维细胞生长因子神经胶质酸性蛋白
- VEGF-A及VEGF-C mRNA在缺氧缺血性脑损伤新生大鼠脑组织中的表达被引量：3
- 2005年
- 目的探讨血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)A和CmRNA在正常生后7日龄Wist ar新生大鼠和缺氧缺血性脑损伤(hypoxicischemicbraindamage,HIBD)后新生大鼠脑组织中的表达。方法应用原位杂交技术,通过正常生后7日龄Wistar新生大鼠HIBD动物模型,检测VEGF A和VEGF CmRNA在正常生后7日龄Wistar新生大鼠和缺氧缺血(hypoxic ischemic,HI)后不同时间点新生大鼠脑组织中的表达。结果VEGF A和VEGF CmRNA在正常生后7日龄新生Wistar大鼠脑组织中即有表达,生后第8天时达高峰,然后逐渐下降并呈低水平表达,持续至生后第35天(HI后28d);HIBD后新生大鼠脑组织中的VEGF A和VEGF CmRNA于HI后2h左右开始表达增强,HI后12h左右达高峰,其中VEGF CmRNA持续至HI后72h,而VEGF AmRNA持续至HI后14d。结论VEGF A和VEGF CmRNA在正常生后7日龄Wistar新生大鼠和HIBD后新生大鼠的脑组织中均有表达,但都以VEGF AmRNA的表达为主。
- 梁云梅王华
- 关键词：MRNA新生大鼠缺氧缺血性脑损伤
