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通辽地区奶牛乳房炎无乳链球菌的分离与鉴定被引量：14: 2009年; 为研究通辽地区奶牛乳房炎优势性病原菌，试验对30份奶牛临床型乳房炎奶样进行细菌分离，经血液琼脂平板分离培养、生化试验及药敏试验共分离到14个菌株，最终鉴定为无乳链球菌。药敏试验结果表明，分离菌株对临床上常用的链霉素及磺胺类药物均已产生不同程度的耐药性，而对卡那霉素、庆大霉素及麦迪霉素表现出较好的敏感性。; 布日额刘娣华玉平亢丽华于高成卢微彩; 关键词：奶牛乳房炎无乳链球菌

牛源无乳链球菌sip蛋白抗原优势区的原核表达及其间接ELISA检测方法的建立被引量：6: 2011年; 为测定牛源无乳链球菌表面免疫相关蛋白(sip)的抗原性,本实验通过建立间接ELISA方法,对该蛋白的抗原性进行分析及鉴定。根据无乳链球菌sip基因序列,设计一对引物,以临床分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增sip抗原表位优势区编码的基因序列,并将其与原核表达载体pET-30a(+)连接,构建重组质粒pET-sip,转化宿主菌BL21中,经IPTG诱导,获得重组蛋白,western blot分析表明,重组蛋白具有良好的抗原性。以纯化的表达产物作为包被抗原,建立检测无乳链球菌抗体的间接ELISA方法,确定抗原最佳包被浓度为3.125μg/mL,血清最佳稀释度为1∶160,酶标二抗最适稀释度为1∶4 000。应用该方法对无乳链球菌、化脓性链球菌、大肠杆菌和金黄色葡萄球菌兔阳性血清进行检测,结果表明,该方法具有良好的特异性和灵敏度。; 郎景民布日额孙立杰刘娣吴金花锡林高娃刘燕史芬芳; 关键词：无乳链球菌原核表达间接ELISA

牛乳腺炎无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因抗原表位的高效表达及其免疫活性鉴定: 本研究根据GenBank中已公布的牛源无乳链球菌SIP基因序列抗原表位序列设计1对引物,以无乳链球菌分离菌株基因组DNA为模板,PCR扩增出SIP抗原表位序列。对其进行克隆、测序、转化、诱导表达及免疫活性鉴定。结果显示克...; 郎景民布日额刘娣吴金花锡林高娃刘燕; 关键词：无乳链球菌原核表达免疫活性; 文献传递

牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立被引量：3: 2009年; 布日额郎景民华育平刘娣吴金花; 关键词：无乳链球菌 PCR方法牛乳相关蛋白蛋白基因 RRNA

奶牛无乳链球菌内蒙古分离株SIP基因的克隆与序列分析被引量：2: 2009年; 试验根据GenBank公布的牛源无乳链球菌SIP基因序列设计并合成1对引物,通过PCR扩增获得SIP基因部分扩增产物。序列分析结果表明:SIP基因扩增产物大小为945 bp,编码315个氨基酸残基。标准菌株(+株)与内蒙古分离株(M株)的基因及氨基酸同源性为100%,这2个菌株与Gen-Bank上公布的B群无乳链球菌菌株(DQ914274)SIP基因及氨基酸同源性达到98.94%及99.68%。; 布日额郎景民刘娣华育平吴金花; 关键词：克隆

牛乳中无乳链球菌PCR快速检测方法的建立被引量：8: 2009年; 根据GenBank公布的的SIP基因序列,设计一对特异性引物,通过对PCR方法的优化,建立了牛无乳链球菌性乳房炎的快速PCR检测方法。用建立的PCR检测方法对患牛乳中无乳链球菌总DNA进行扩增,获得大小为945bp的DNA片段。特异性试验表明,停乳链球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌DNA均未扩出条带;敏感性试验表明,该对引物能够检测到的最低DNA浓度为1.25ng;重复试验表明该方法具有良好的重复性和稳定性。; 布日额郎景民华育平刘娣吴金花; 关键词：奶牛乳房炎无乳链球菌 PCR

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黑龙江省农业科学院博士后基金(LRB07-118)