黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划(1155G64)
- 作品数：6 被引量：10H指数：2
- 相关作者：于天飞黎明吕建伟邵淑丽徐兴军更多>>
- 相关机构：齐齐哈尔大学中国牧工商(集团)总公司更多>>
- 发文基金：黑龙江省普通高等学校青年学术骨干支持计划黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 毕赤酵母分泌表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白抗原位点的高密度发酵
- 2013年
- 本研究首先通过摇瓶培养方法,确定了表达猪传染性胃肠炎病毒S蛋白B和C抗原位点片段的毕赤酵母在BSM培养基中生长所需的最佳配方为甘油45 g/L、氨水单次补加量0.12%、甲醇流加量1.00%。然后采用分批补料培养方法对毕赤酵母GS115/pPIC9-TY进行高密度发酵,发酵液上清中蛋白的表达量为60.18 mg/L。本发酵工艺可实现酵母工程菌的高密度表达发酵,为下一步大规模化制备重组蛋白奠定了基础。
- 于天飞齐岩邵淑丽黎明吕建伟徐兴军
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒抗原表位毕赤酵母高密度发酵
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在巴斯德毕赤酵母KM71中的表达
- 2011年
- 猪传染性胃肠炎（TGE）是猪的一种急性、高度接触性传染病，各种年龄及品种的猪对本病均易感，其中2周龄以下仔猪的死亡率可达100％。该病病原为猪传染性胃肠炎病毒（TGEV）。
- 于天飞黎明闫冰张建孙天国朱红标吕建伟
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒巴斯德毕赤酵母抗原位点S基因周龄
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在多表达系统中的表达及初步应用
- 2012年
- 本研究分别用巴斯德毕赤酵母、杆状病毒和大肠杆菌表达系统中表达的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)TH-98株纤突蛋白(S)基因5'端含有B和C抗原位点的片段,利用Dot-ELISA方法对表达蛋白进行了抗原性比较分析,初步建立了以巴斯德毕赤酵母系统表达的重组蛋白为包被抗原的TGEV Dot-ELISA检测方法。结果表明:两种真核系统中表达的重组蛋白的抗原性相对更强。抗原最佳包被量为50 ng,抗体稀释度1∶100,最适封闭液为10 mg/L牛血清白蛋白,血清反应时间为60 min;酶标二抗的工作浓度为1∶1 000,反应时间为30 min,底物在室温显色时间为5 min。本研究建立的Dot-ELISA方法对猪呼吸道冠状病毒、猪轮状病毒、猪瘟病毒和猪流行性腹泻病毒阳性血清的检测结果均为阴性,特异性良好。与Svanova TGEV/PRCV抗体诊断试剂盒比较,此方法的特异性和符合率分别为90%和87%。
- 于天飞邵淑丽黎明吕建伟徐兴军
- 关键词：TGEV纤突蛋白抗原表位
- 猪传染性胃肠炎病毒S蛋白的C和D线性抗原表位的抗原性比较被引量：3
- 2016年
- 为比较猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白含有的两个线性抗原表位(C和D)的抗原性,本研究采用Dot-ELISA方法对原核表达的S蛋白抗原C和D的两种线性表位重组蛋白进行了抗原性比较分析。结果表明,在等质量或等摩尔的条件下,含有抗原线性表位C的重组蛋白的抗原性弱于含有抗原线性表位D的重组蛋白。本研究为建立TGEV感染的血清学诊断方法,以及进一步研究抗原线性表位C和D的结构及功能奠定了基础。
- 于天飞张喜文朱可佳陈刚李赫陆泽谢鹏宇
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白抗原性
- 猪传染性胃肠炎病毒S蛋白抗原表位C的串联表达研究被引量：5
- 2017年
- 为比较含有猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S蛋白抗原表位C不同表位密度的重组蛋白的抗原性,本研究将抗原表位C的编码核酸序列进行串联,构建了重组表达质粒pET-(C_1C_2)_2~p ET-(C_1C_2)_6,并在原核表达系统中表达了重组蛋白。Western blot分析表明,表达的6种重组蛋白r-C_1C_2~r-(C_1C_2)_6均具有良好的抗原性。采用Dot-ELISA方法对各重组蛋白进行了抗原性比较分析。结果表明,含有12个表位肽的重组蛋白r-(C_1C_2)_6的抗原性强于其它重组蛋白。本研究制备的串联重组蛋白为建立TGE血清学诊断方法奠定了物质基础。
- 于天飞董慧莹张喜文谢鹏宇王有祺孙婉姝
- 关键词：猪传染性胃肠炎病毒纤突蛋白
- 猪传染性胃肠炎病毒S基因B和C抗原位点片段在昆虫细胞中的胞内表达被引量：2
- 2012年
- 通过基因重组的方法,在昆虫细胞胞内表达了猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)S基因B和C抗原位点片段.表达蛋白经Dot-ELISA检测具有良好的抗原性.本研究为TGEV的血清学检测方法的建立提供了必要的物质基础.
- 于天飞邵淑丽黎明吕建伟徐兴军
- 关键词：TGEV抗原位点昆虫细胞胞内表达
